| 酒用酸性脲酶的纯化及其N端序列的测定 |
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| 引用本文： | 杨鲁强,王松华,田亚平,徐岩,赵光鳌.酒用酸性脲酶的纯化及其N端序列的测定[J].食品与生物技术学报,2008,27(6). |
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| 作者姓名： | 杨鲁强 王松华 田亚平 徐岩 赵光鳌 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 采用乙醇分级沉淀、Superdex200凝胶过滤、Mono Q离子交换对Enterobactria sp R-SYB082产酒用酸性脲酶进行了纯化.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶已达到电泳纯,纯化倍数为21.1,酶活回收42%.Superdex200凝胶过滤测定其全酶相对分子质量约为430 000,SDS-PAGE电泳测定其亚基相对分子质量约为72 000,表明该酶为同源六聚体,并利用Edman降解法测定了蛋白质N端序列的8个氨基酸残基序列:S-F-K-M-D-R-K-Q.酶反应的最适pH为4.5,最适温度为35℃.以尿素为底物时,该酶表现Km及Vmax分别为19.5μmol/L和0.87μmol/min.Na 、Mn2 对酶活有一定的激活作用,Ca2 、Zn2 对酶活有一定的抑制作用,酒石酸、琥珀酸对酶活有一定的激活作用,草酸、乙酸对酶活有一定的抑制作用.
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| 关 键 词： | 酸性脲酶 尿素 肠杆菌属细菌 纯化 N端序列 |
Purification and N-terminal Analysis of An Acid Urease |
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| YANG Lu-qiang,WANG Song-hua,TIAN Ya-ping,XU Yan,ZHAO Guang-ao.Purification and N-terminal Analysis of An Acid Urease[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2008,27(6). |
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| Authors: | YANG Lu-qiang WANG Song-hua TIAN Ya-ping XU Yan ZHAO Guang-ao |
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