栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达 |
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引用本文: | 崔喜艳,董雅致,刘晓庆,张治安.栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达[J].中国油料,2014(3):329-333. |
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作者姓名: | 崔喜艳 董雅致 刘晓庆 张治安 |
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作者单位: | [1]吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118 [2]吉林农业大学农学院,吉林长春130118 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31171459); 吉林省自然科学基金(201215178) |
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摘 要: | 根据NCBI中发表的大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)序列(AF303939-1)设计特异引物,以吉农13大豆为实验材料,采用Trizol法提取叶片总RNA,通过RT-PCR克隆大豆rbcS的cDNA。将该基因与原核表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞,双酶切鉴定后筛选阳性克隆,测序结果显示:rbcS全长696bp,其中开放阅读框为537bp,编码178个氨基酸;选择含大豆rbcS cDNA阳性克隆菌液IPTG诱导,经SDSPAGE分析,诱导表达出分子量为29.1kDa的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符。诱导7h蛋白表达量最高,为64.15%。
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关 键 词: | 栽培大豆 rbcS 基因克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of full - length cDNA of Rubisco small subunit gene (rbcS) in Glyine max |
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Affiliation: | CUI Xi -yan, DONG Ya - zhi , LIU Xiao - qing , ZHANG Zhi - an ( 1. School of Life Sciences, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China ; 2. College of Agronomy, Jilin Agricultural University , Changchun 130118, China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Glycine max rbcS Gene cloning Prokaryotic expression |
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