双重PCR熔解曲线峰快速检测食品中猪源性成分方法的建立 |
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引用本文: | 高菲等.双重PCR熔解曲线峰快速检测食品中猪源性成分方法的建立[J].食品工业科技,2014(14):81-83. |
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作者姓名: | 高菲等 |
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摘 要: | 基于国际生命条码联盟(CBOL,the Consortium for the Barcode of Life)提出的barcoding技术所确定的序列区域,针对猪的线粒体COⅠ基因序列设计特异性引物。为了避免食品中PCR抑制剂的影响,本实验设置GCG(胰岛素受体)基因125bp的纯化片段为内参照,控制假阴性结果的出现。通过优化PCR反应条件,猪和GCG基因的特异性产物在79.2℃和75℃有特异性熔解峰。设置牛、羊、鸡、兔、鼠和空白对照,均无扩增。测序结果表明,该猪特异性引物的PCR产物含有245bp的核苷酸序列与GenBank中相应序列吻合;该方法检出限为0.001%。
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