仿生硅化-磁性Fe3O4固定化木瓜蛋白酶的性质

将木瓜蛋白酶(papain)交联固定在经氨基修饰过的磁性粒子上,通过papain诱导仿生硅化使磁性粒子(MNPS)表面包覆一层氧化硅,并将papain同时包埋于其中,制备出磁性氧化铁(Fe3O4)-氧化硅载体。红外光谱仪的测定表明,仿生硅化作用所形成的氧化硅能很好地包覆在磁性粒子交联酶(EMNPS)表面。当酶浓度为7.5mg·mL-1时,酶的载入量为0.24mg papain·mg-1 MNPS,此时EMNPS和EMNPS/SiO2的活性分别3.72和3.66U·mg-1 MNPS。EMNPS/SiO2的pH稳定性、温度稳定性、重复操作稳定性均优于EMNPS。与游离papain相比,EMNPS与底物的亲和力略有升高,而EMNPS/SiO2与底物的亲和力降低。EMNPS和EMNPS/SiO2的米氏常数Km分别为1.39、2.31mg·mL-1,最大反应速度Vm分别为0.04、0.038mg·mL-1·min-1。