| 米醋沉淀中Bacillus subtilis DNA提取及ERIC-PCR体系条件优化 |
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| 引用本文： | 廖永红,任文雅,孙宝国,徐瑾,沈晗,金志刚.米醋沉淀中Bacillus subtilis DNA提取及ERIC-PCR体系条件优化[J].食品工业科技,2011,32(6):212-215,219. |
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| 作者姓名： | 廖永红 任文雅 孙宝国 徐瑾 沈晗 金志刚 |
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| 作者单位： | 北京工商大学,化学与环境工程学院,北京100037 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑项目 |
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| 摘 要： | 利用稀释平板法从米醋沉淀中分离获得细菌,通过对其进行16S rDNA分子鉴定,表明该细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。以该菌为实验材料,研究了细菌基因组DNA的提取方法,并将ERIC-PCR法首次应用于醋液菌种,对此反应体系的主要因素进行了优化,最终建立了适合于本实验室的ERIC-PCR体系。结果表明,采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要;建立的反应体系为:25μL反应体积10×扩增缓冲液(含Mg2+)2.5μL,20pmol/μLERIC-PCR引物E11.0μL,20pmol/μLERIC-PCR引物E21.0μL,DNA模板2μL,2.5mmol/LdNTPs混合液1.6μL,taq聚合酶0.9μL,双蒸水补齐;PCR反应程序为:94℃变性4min,1个循环;94℃变性30s,58℃退火40s,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸4min。
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| 关 键 词： | 细菌 分离 DNA提取 ERIC-PCR 优化 |
Genomic DNA extraction from Bacillus subtilis in vinegar precipitation and the optimization of the system of ERIC-PCR |
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| LIAO Yong-hong,REN Wen-ya,SUN Bao-guo,XU Jin,SHEN Han,JIN Zhi-gang.Genomic DNA extraction from Bacillus subtilis in vinegar precipitation and the optimization of the system of ERIC-PCR[J].Science and Technology of Food Industry,2011,32(6):212-215,219. |
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| Authors: | LIAO Yong-hong REN Wen-ya SUN Bao-guo XU Jin SHEN Han JIN Zhi-gang |
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| Affiliation: | (College of Chemical and Environmental Engineering,Beijing Technology and Business University,Beijing 100037,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ERIC-PCR |
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