| 副溶血弧菌的磁珠捕获及检测 |
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| 引用本文： | 王报贵,武晓丽,董素琴,陈飞,陈星星,甘敏,明星,徐锋.副溶血弧菌的磁珠捕获及检测[J].食品工业科技,2013,34(13). |
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| 作者姓名： | 王报贵 武晓丽 董素琴 陈飞 陈星星 甘敏 明星 徐锋 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学生命科学与食品工程学院中德联合研究院,江西南昌,330047
2. 江西中医学院基础医学部,江西南昌,330004 |
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| 基金项目： | "十二五"国家科技支撑计划，国家自然科学基金项目，食品科学与技术国家重点实验室目标导向课题，自由探索课题，2012年赣鄱英才555工程人才计划 |
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| 摘 要： | 建立结合免疫磁珠和PCR快速检测副溶血性弧菌的新方法.本研究选用副溶血弧菌作为抗原免疫日本大耳兔制备了多克隆抗体,用ELISA法检测抗体效价.利用辛酸硫酸铵沉淀结合逆向吸附对多抗血清进行纯化,经SDS-PAGE和斑点杂交检测验证纯化后抗体的特异性.将纯化后的抗体偶联于羧基化修饰的纳米磁珠表面,用来进行菌体的捕获.结果表明,抗体的效价达到106,纯化获得只与副溶血弧菌发生反应的高纯度抗体.制备的免疫磁珠捕获率在55％ ～70％之间,且稳定性较好,盐离子浓度(3.5％ NaCl、4.5％ NaCl)对捕获率的影响不大,在pH5～9之间,磁珠捕获差异也较小.在对纯培养物的检测实验中,本方法最低检测限为102cfu/mL;而在鱼肉糜样本中的检测限为103cfu/mL,且样品中高浓度杂菌的存在不影响检测灵敏度.免疫磁珠结合PCR用于副溶血性弧菌的检测具有很高的灵敏度和特异性,具有广阔的前景.
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| 关 键 词： | 副溶血弧菌 多克隆抗体 免疫磁珠 PCR |
Bead capture and detection of Vibrio parahaemolyticus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio parahaemolyticus polyclonal antibodies immunomagnetic beads PCR |
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