| 牛乳主要过敏原αS1-酪蛋白的纯化鉴定及其多克隆抗体的制备 |
| |
| 引用本文： | 何圣发,龙彩云,王娇,熊梦,赵江强,燕燕,董亚萍,李欣,陈红兵.牛乳主要过敏原αS1-酪蛋白的纯化鉴定及其多克隆抗体的制备[J].食品工业科技,2022,43(15):106-114. |
| |
| 作者姓名： | 何圣发 龙彩云 王娇 熊梦 赵江强 燕燕 董亚萍 李欣 陈红兵 |
| |
| 作者单位： | 1.赣南医学院公共卫生与健康管理学院，江西赣州 3410002.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌 3300473.赣州市疾病预防控制中心，江西赣州 3410004.南昌大学食品学院，江西南昌 3300475.南昌大学中德联合研究院，江西南昌 330047 |
| |
| 基金项目： | 赣南医学院博士启动课题（QD201809）；赣南医学院重点科研课题（ZD201816）；南昌大学食品科学与技术国家重点实验室开放课题（SKLF-KF-202003）；江西省自然科学基金项目（20202BAB215013）；国家自然科学基金项目（32160606）。 |
| |
| 摘 要： | 目的:从牛乳酪蛋白中纯化获得αS1-酪蛋白并对其进行综合鉴定，以及制备特异性识别αS1-酪蛋白的兔多克隆抗体。方法:采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析色谱对αS1-酪蛋白进行分离纯化，利用酪蛋白的理化性质（等电点和含量）、免疫学技术和质谱技术对纯化的αS1-酪蛋白进行综合鉴定，然后通过透析和冷冻干燥获得高纯度的αS1-酪蛋白，最后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并分析其特异性。结果:在4种酪蛋白中，αS1-酪蛋白在阴离子交换层析色谱中的出峰时间最晚、峰面积最大，在电泳图中的位置最高，最终获得纯度高达94.26%的αS1-酪蛋白，得率为27.19%。免疫5次后，两只兔子的抗血清效价分别为128万和32万，抗血清除了与大豆蛋白存在轻微交叉反应（<0.25%）外，与α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、蛋清蛋白、花生蛋白均无交叉反应，表明特异性高。结论:本研究制备了高纯度的αS1-酪蛋白及其高特异性的多克隆抗体，为过敏原蛋白的纯化与综合鉴定提供了思路，为αS1-酪蛋白免疫学检测方法的建立提供了物质基础。
|
| 关 键 词： | 牛乳过敏原 αS1-酪蛋白 纯化 鉴定 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2021-11-05 |
|
| 点击此处可从《食品工业科技》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《食品工业科技》下载全文 |
