特异性检测、鉴别乳酸片球菌的引物探针及其应用

为解决现有方法在检测乳酸片球菌时表现出耗时长、检测不灵敏的缺点，拟制备并运用2对特异性引物探针快速准确地从复杂生境中检测乳酸片球菌。提取乳酸片球菌HP-B1099基因组DNA，通过4因素3水平正交实验寻找ERIC-PCR最佳反应程序，并得到乳酸片球菌有代表性的2条ERIC基因片段，设计获得2对引物探针1099-750-F/1099-750-R、1099-3-F/1099-3-R，并对2对引物的特异性、普适性、检测限度进行验证与检验。结果表明：基于ERIC-PCR技术设计的2对引物探针，可简便快速地实现混合样本中乳酸片球菌的检出，具有特异性、普适性的特点，并在多达8种基因组DNA或8种菌株混合样本中特异性地鉴别痕量乳酸片球菌，最终实现在多株近缘菌株或复杂生境中检出极低浓度的乳酸片球菌。