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华根霉细胞总蛋白及膜蛋白双向电泳优化体系的建立
作者单位:;1.江南大学工业生物技术教育部重点实验室食品安全与营养协同创新中心;2.江南大学生物工程学院酿造微生物及应用酶学研究室
摘    要:分别针对丝状真菌华根霉细胞总蛋白和膜蛋白,比较了不同蛋白样品的提取方法及IPG胶条的p H梯度对2-DE结果的影响,获得了较优的双向电泳图谱,通过重复实验及蛋白点匹配分析,确定了不同方法的适用性。分别采用Ready PrepTMProtein Extraction Kit试剂盒和Triton X-100提取细胞总蛋白和膜蛋白,利用p H 3~10非线性IPG胶条,可获得相应蛋白点数较多、分辨度高、较清晰、重复性好的华根霉细胞总蛋白和膜蛋白2-DE图谱。利用PDQuest 8.0.1软件分析,细胞总蛋白重复样品间和膜蛋白重复样品间的蛋白斑点匹配度分别达到87%和94%。该研究为华根霉及其他相关微生物蛋白质组学研究奠定了技术基础。

关 键 词:华根霉  双向电泳  总蛋白  膜蛋白

Optimization of two-dimensional electrophoresis for total proteins and membrane proteins from Rhizopus chinensis
Abstract:
Keywords:
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