| 亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用 |
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| 引用本文： | 徐建妙,陈策,张博,柳志强.亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用[J].食品与发酵工业,2019(10):29-35. |
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| 作者姓名： | 徐建妙 陈策 张博 柳志强 |
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| 作者单位： | 1.浙江工业大学生物工程学院 |
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| 基金项目： | 浙江省科技计划公益技术应用研究项目(2017C33157) |
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| 摘 要： | 亮氨酸脱氢酶催化2-酮丁酸生成L-2-氨基丁酸需要辅酶NADH参与,构建 Escherichia coli (LeuDH/FDH),通过共表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶实现了辅酶NADH胞内循环再生。通过产酶条件优化,提高该菌株催化制备L-2-氨基丁酸的效率。结果表明,在5L发酵罐上,在诱导温度为22 ℃、诱导剂乳糖质量浓度为 8.0 g/L 和诱导时间为17 h的条件下,亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的酶活分别达到79.2 U/g和216.1 U/g,催化效果最佳。利用该菌株全细胞为催化剂,耦合苏氨酸脱氨酶,在1L反应体系中进行了催化反应, L -苏氨酸质量浓度为180 g/L时,无需额外添加辅酶,8 h反应后底物转化率达到99%,L-2-氨基丁酸 e.e.值99.5%以上,时空产率19.3 g/(L·h)。该研究为建立高效、低成本的L-2-氨基丁酸工业化生产方法提供了基础。
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| 关 键 词： | L-2-氨基丁酸 亮氨酸脱氢酶 甲酸脱氢酶 共表达 优化 |
Optimized conditions for Escherichia coli( LeuDH/FDH) co-expressing leucine dehydrogenase and formate dehydrogenase for producing L-2-aminobutyric acid |
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| XU Jianmiao,CHEN Ce,ZHANG Bo,LIU Zhiqiang.Optimized conditions for Escherichia coli( LeuDH/FDH) co-expressing leucine dehydrogenase and formate dehydrogenase for producing L-2-aminobutyric acid[J].Food and Fermentation Industries,2019(10):29-35. |
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| Authors: | XU Jianmiao CHEN Ce ZHANG Bo LIU Zhiqiang |
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| Affiliation: | (College of Biotechnology and Bioengineering,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,China) |
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| Abstract: | XU Jianmiao;CHEN Ce;ZHANG Bo;LIU Zhiqiang(College of Biotechnology and Bioengineering,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,China) |
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| Keywords: | L-2-aminobutyric acid leucine dehydrogenase formate dehydrogenase co-expression optimization |
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