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白藜芦醇在酿酒酵母中的组合表达
引用本文:孙萍,郭丽琼,梁景龙,林俊芳,黄晓燕,黄佳俊.白藜芦醇在酿酒酵母中的组合表达[J].食品与发酵工业,2013(8):7-12.
作者姓名:孙萍  郭丽琼  梁景龙  林俊芳  黄晓燕  黄佳俊
作者单位:华南农业大学食品学院
基金项目:国家自然科学基金项目(No.31272217;No.31071837)
摘    要:将克隆自拟南芥的4cl基因和巨峰葡萄的rs基因,利用降落重叠延伸PCR的方法,成功构建了含有G418抗性筛选标记的酵母表达载体pRS42K-4CL以及含有潮霉素抗性筛选标记的酵母表达载体pRS42H-RS。采用LiAc/SS carrier DNA/PEG法将含有目的基因的2个载体共同转化至酿酒酵母工业菌株EC1118中,通过PCR及酶切鉴定等方法验证重组工程菌。以对香豆酸为底物,将获得的酿酒酵母工程菌于YPD液体培养基中发酵(25℃,150 r/min,96 h),发酵液用乙酸乙酯抽提后采用高效液相色谱(HPLC)法进行检测,其结果显示发酵产物中白藜芦醇的含量为0.78 mg/L。这表明,拟南芥的4cl基因与巨峰葡萄的rs基因在酿酒酵母工程菌中成功得到了表达,并且表达产物利用对香豆酸为前体物质合成了目标产物白藜芦醇。该研究为进一步实现白藜芦醇在酵母中的工业化生产奠定了基础。

关 键 词:白藜芦醇  酿酒酵母  组合表达  4-香豆酰辅酶A连接酶  白藜芦醇合酶

Combinatorial expression of resveratrol in engineered Saccharomyces cerevisiae
SUN Ping;GUO Li-qiong;LIANG Jing-long;LIN Jun-fang;HUANG Xiao-yan;HUANG Jia-jun.Combinatorial expression of resveratrol in engineered Saccharomyces cerevisiae[J].Food and Fermentation Industries,2013(8):7-12.
Authors:SUN Ping;GUO Li-qiong;LIANG Jing-long;LIN Jun-fang;HUANG Xiao-yan;HUANG Jia-jun
Affiliation:SUN Ping;GUO Li-qiong;LIANG Jing-long;LIN Jun-fang;HUANG Xiao-yan;HUANG Jia-jun;College of Food Science,South China Agricultural University;
Abstract:
Keywords:
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