小麦RAPD分子标记体系的建立与优化

本研究在给定PCR扩增程序以及主要成分用量的情况下,通过优化聚合酶链式反应中模板DNA质量浓度、Taq聚合酶用量以及Mg~(2+)浓度几个主要变量,采用单因素试验和正交试验相结合的方法对小麦基因组DNA的RAPD扩增体系各参数进行比较筛选,创建其最佳反应体系为:20μL反应体系中,模板DNA 20ng,Taq DNA聚合酶浓度1.5U,Mg~(2+)2.0mmol/L,复性温度38℃,变性时间15s。