双亲灭活青霉菌与枯草芽孢杆菌原生质体融合

目的:为选育具有高纤维素酶活性且强抗逆性的新菌株,将高产纤维素酶的青霉菌Penicillium Q5与强抗逆性的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3进行原生质体融合。方法:采用双亲灭活原生质体技术对青霉菌与枯草芽孢杆菌进行原生质体融合,考察原生质体制备条件与融合中的影响因素。结果:对亲本菌株进行酶解前处理,随着酶解浓度和酶解时间的增加,原生质体的形成率随之增大,而再生率下降。对融合过程进行正交试验,结果在融合温度38℃,融合时间10 min,PEG质量浓度0.4 g/L的条件下,融合率为3.08×10-7。在172株融合子中筛选出1株R62,保留了亲本的酶活且在p H 8~10条件下有较强的抗逆性。结论:双灭活原生质体融合方法成功选育出具有抗逆性的高产纤维素酶菌株。