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单增李斯特菌与志贺氏菌多重PCR检测技术的建立
引用本文:徐伟, 刘军, 李素芳.单增李斯特菌与志贺氏菌多重PCR检测技术的建立[J].中国食品学报,2009,9(1):201-207.
作者姓名:徐伟  刘军  李素芳
作者单位:中国计量学院生命科学学院,杭州,310018
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科研项目,留学回国人员科技活动启动项目,浙江省新苗人才计划项目 
摘    要:目的:为食品、卫生行业提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的单增李斯特菌(Listeria Monocyto-genes)与志贺氏菌(Shigella)多重PCR检测方法.方法:根据单增李斯特茵转录调节子基因prfA、志贺氏茵侵袭性质粒抗原H基因ipaH筛选出引物;优化多重PCR的引物浓度、退火温度及Mg2+等条件,分析单-PCR及多重PCR的特异性、灵敏度;结合24 h增茵培养.确定多重PCR检测人工污染脱脂灭茵乳的检出限.结果:多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即单增李斯特茵(274bp)和志贺氏茵(421bp).该方法的灵敏度:78 pg单增李斯特茵基因组DNA、7.5pg志贺氏茼基因组DNA.多重PCR检测人工污染脱脂灭菌乳,单增李斯特茵与志贺氏茵的灵敏度分别为2cfu/25mL和1.6cfu/25mL.结论:该方法在食品、卫生行业具有很好的应用和开发前景.

关 键 词:多重PCR  单增李斯特菌  志贺氏菌  食品检测

The Development of Multiplex PCR Technique for Detection of Listeria Monocytogenes and Shigella
Xu Wei,Liu Jun,Li Sufang.The Development of Multiplex PCR Technique for Detection of Listeria Monocytogenes and Shigella[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2009,9(1):201-207.
Authors:Xu Wei  Liu Jun  Li Sufang
Abstract:
Keywords:
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