| 鲢鱼背肌组织蛋白酶L的初步分离及蛋白层析纯化方法 |
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| 引用本文： | 王谦,焦熙栋,闫博文,孟令璐,曹洪伟,黄建联,赵建新,张灏,陈卫,范大明.鲢鱼背肌组织蛋白酶L的初步分离及蛋白层析纯化方法[J].中国食品学报,2022,22(3):111-119. |
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| 作者姓名： | 王谦 焦熙栋 闫博文 孟令璐 曹洪伟 黄建联 赵建新 张灏 陈卫 范大明 |
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| 作者单位： | 江南大学食品科学与技术国家重点实验室 江苏无锡 214122;江南大学食品学院 江苏无锡 214122;农业农村部冷冻与调理水产品加工重点实验室 福建厦门 361022;福建省冷冻调理水产品加工重点实验室 福建厦门 361022;福建安井食品股份有限公司 福建厦门 361022;江南大学食品科学与技术国家重点实验室 江苏无锡 214122;农业农村部冷冻与调理水产品加工重点实验室 福建厦门 361022;江南大学食品学院 江苏无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家“十三五”重点研发计划项目(2019YFD 0902000)；国家自然科学基金项目(31822038)；厦门市第二批重大科技项目(3502Z2020 1032)；食品科学与工程一流学科建设项目(JUFSTR20180102)；“江苏省食品安全与质量控制协同创新中心”项目 |
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| 摘 要： | 研究鲢鱼背肌中组织蛋白酶L的初步分离和纯化方法，重点研究初步分离过程中酸化处理条件、硫酸铵饱和度和透析袋分子质量对粗酶液中组织蛋白酶L活性的影响，以及纯化过程中不同类型离子交换层析柱和离子交换平衡缓冲液pH值对蛋白层析纯化的影响。结果表明:盐析最佳硫酸铵饱和度范围55%~90%，酸处理最优条件pH 3.0，40 ℃热处理10 min后pH值回调至6.0，透析袋最佳分子质量7 000 u。采用弱阴离子交换和分子筛两步层析法，选取20 mmol/L、pH 6.0磷酸盐缓冲液作为弱阴离子柱的平衡缓冲液，可得到45 ku电泳纯组织蛋白酶L，其纯化倍数为487，回收率为22 mg/1 000 g。本法可最大限度地去除杂蛋白且操作简便、回收率高，为探究鱼糜凝胶劣化现象的有效抑制方法奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 鲢鱼 组织蛋白酶L 初步分离 蛋白层析 |
| 收稿时间： | 2021/3/8 0:00:00 |
Preliminary Isolation and Purification by Protein Chromatography of Cathepsin L from Silver Carp Dorsal Muscle |
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| Wang Qian,Jiao Xidong,Yan Bowen,Meng Linglu,Cao Hongwei,Huang Jianlian,Zhao Jianxin,Zhang Hao,Chen Wei,Fan Daming.Preliminary Isolation and Purification by Protein Chromatography of Cathepsin L from Silver Carp Dorsal Muscle[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2022,22(3):111-119. |
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| Authors: | Wang Qian Jiao Xidong Yan Bowen Meng Linglu Cao Hongwei Huang Jianlian Zhao Jianxin Zhang Hao Chen Wei Fan Daming |
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