菜籽源锌螯合肽的制备、纯化和结构解析 |
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引用本文: | 黄晶晶,谢宁宁,李博,程江华,王灼琛,殷俊峰,闫晓明.菜籽源锌螯合肽的制备、纯化和结构解析[J].中国粮油学报,2016,31(6):68-73. |
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作者姓名: | 黄晶晶 谢宁宁 李博 程江华 王灼琛 殷俊峰 闫晓明 |
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作者单位: | 安徽省农业科学院农产品加工研究所,安徽省农业科学院农产品加工研究所,中国农业大学食品科学与营养工程学院,安徽省农业科学院农产品加工研究所,安徽省农业科学院农产品加工研究所,安徽省农业科学院农产品加工研究所,安徽省农业科学院农产品加工研究所 |
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基金项目: | “十二五”科技支撑计划项目(批准号:2012BAD14B13),安徽省农业科学院院长杰出青年基金项目(批准号:14B1211),安徽省农业科学院院长青年创新基金面上项目(批准号:14B1253)。 |
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摘 要: | 采用碱性蛋白酶水解菜籽蛋白制备水解物,运用固定金属亲和层析(IMAC-Zn2+)和葡聚糖凝胶G25(Sephadex G25)层析分离纯化;利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)鉴定序列;采用EDTA络合滴定法(ECT)、双硫腙比色法(DCM)、原子吸收光谱(AAS)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测锌螯合率。试验表明:菜籽蛋白的4 h水解物锌螯合潜力最佳;分离该水解物获得3个肽组分(I,Ⅱ和Ⅲ),其中Ⅱ和Ⅲ具有锌螯合能力;进一步分离后分别获得3个(Ⅱ-1,Ⅱ-2,Ⅱ-3)和2个肽组分(Ⅲ-1和Ⅲ-2),组分Ⅱ-3的锌螯合率最高,高于同浓度的谷胱甘肽(GSH)(P0.05);鉴定Ⅱ-3序列获得4条肽,即Ala-Arg(AR),Asn-Ser-Met(NSM),Gly-Lys-Arg(GKR)和Glu-Pro-SerHis(EPSH)。其中NSM的锌螯合率最高,来源于菜籽蛋白NADH-enoyl-ACP reductase Chain A序列中的296-298氨基酸残基。因此,菜籽蛋白可以作为微量元素螯合肽的优良来源。
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关 键 词: | 锌 菜籽蛋白水解物 螯合肽 固定金属亲和层析 碱性蛋白酶 |
收稿时间: | 2014/10/11 0:00:00 |
修稿时间: | 1/9/2015 12:00:00 AM |
Preparation, affinity purification and characterization of zinc-chelating peptides from rapeseed protein hydrolysates |
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Abstract: | |
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Keywords: | Zinc Rapeseed protein hydrolysates Chelating peptides Immobilized metal affinity chromatography Alcalase |
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