| 利用重组枯草芽孢杆菌L-氨基酸连接酶合成丙谷二肽 |
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| 引用本文： | 洪翔,朱新雅,贾子樊,黄晗,谭旭,范晓光.利用重组枯草芽孢杆菌L-氨基酸连接酶合成丙谷二肽[J].发酵科技通讯,2017,46(2). |
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| 作者姓名： | 洪翔 朱新雅 贾子樊 黄晗 谭旭 范晓光 |
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| 作者单位： | 1. 天津科技大学工业发酵微生物教育部重点实验室,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;2. 天津科技大学生物工程学院,天津,300457;3. 天士力控股集团有限公司健保食品开发中心,天津,300040 |
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| 基金项目： | 工业发酵微生物教育部重点实验室暨天津市工业微生物重点实验室(天津科技大学)开放基金资助项目 |
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| 摘 要： | 利用大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE 3)克隆并表达来源于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ATCC 15245的L-氨基酸连接酶(L-amino acid ligase,Lal)基因,采用Ni-NAT亲和层析法分离纯化得到重组的Lal,并以L-丙氨酸和L-谷氨酰胺为底物制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(丙谷二肽).Lal属于ATP依赖酶,研究结果表明其最适反应温度和pH值分别为37℃和9.0,连续催化反应14 h可催化等摩尔的底物氨基酸(30 mmol/L)生成22.4 mmol/L的丙谷二肽,最高摩尔转化率可达74.7％.成功克隆表达了枯草芽孢杆菌的L-氨基酸连接酶,并将其应用于丙谷二肽的酶法合成,研究结果可为丙谷二肽的生物制造奠定理论基础.
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| 关 键 词： | 丙谷二肽 L-氨基酸连接酶 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 酶法合成 |
Enzymatic synthesis of L-alanyl-L-glutamine by L-amino acid ligase from Bacillus subtilis |
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| Authors: | HONG Xiang ZHU Xinya JIA Zifan HUANG Han TAN Xu FAN Xiaoguang |
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