| 环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 肖陈贵,顾大勇,丁 晶,杨星星,毕思远,朱 海,岳振峰,侯乐锡. 环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 食品安全质量检测学报, 2014, 5(11): 3425-3430 |
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| 作者姓名： | 肖陈贵 顾大勇 丁 晶 杨星星 毕思远 朱 海 岳振峰 侯乐锡 |
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| 作者单位： | 深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院,广东省深圳市易瑞生物技术有限公司,深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院 |
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| 基金项目： | 深圳市科技研发资金项目（JSGG20130624152620659，CXZZ20130322112111131） |
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| 摘 要： | 目的制备并鉴定环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体。方法以环戊二烯类农药的特征部分为基础设计合成半抗原4-(4,5,6,7,8,8-六氯-3a,4,7,7a-四氢-4,7-亚甲基-1H-聚-1-氧)4-丁酮酸(CCD),并通过活泼酯法将其与载体蛋白BSA、OVA分别偶联制备免疫抗原CCD-BSA和包被抗原CCD-OVA;再经过动物免疫、细胞融合,筛选、克隆,得到1株能稳定分泌环戊二烯类农药抗体的单克隆细胞株。细胞株经扩大培养后,注射小鼠体内产生腹水,并将其用辛酸-硫酸铵和protein A柱子纯化出单克隆抗体。结果 用间接ELISA方法测定其效价为2.5×104,亲和力Ka为6.7×1010L/mol;以β-硫丹为竞争物,采用间接竞争ELISA法建立标准曲线,测得其IC50为16.2 ng/m L,LOD为2.1 ng/m L,定量检测线性范围为4.7~117.5 ng/m L,与其他5种结构类似物的交叉反应率高于10%。结论 本研究成功获得了抗环戊二烯类农药单克隆抗体,该抗体可实现果蔬中环戊二烯类农药的多残留快速检测。
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| 关 键 词： | 环戊二烯类农药；间接ELISA；单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2014-10-08 |
| 修稿时间： | 2014-11-07 |
Preparation and identification of monoclonal antibody against chlorinated cyclodiene pesticide |
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| XIAO Chen-gui,GU Da-Yong,DING Jing,YANG Xing-Xing,BI Si-Yuan,ZHU Hai,YUE Zhen-Feng and HOU Le-Xi. Preparation and identification of monoclonal antibody against chlorinated cyclodiene pesticide[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2014, 5(11): 3425-3430 |
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| Authors: | XIAO Chen-gui GU Da-Yong DING Jing YANG Xing-Xing BI Si-Yuan ZHU Hai YUE Zhen-Feng HOU Le-Xi |
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| Affiliation: | Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co Ltd,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chlorinated cyclodiene pesticides icELISA monoclonal antibody |
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