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环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体的制备及鉴定
引用本文:肖陈贵,顾大勇,丁 晶,杨星星,毕思远,朱 海,岳振峰,侯乐锡. 环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 食品安全质量检测学报, 2014, 5(11): 3425-3430
作者姓名:肖陈贵  顾大勇  丁 晶  杨星星  毕思远  朱 海  岳振峰  侯乐锡
作者单位:深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院,广东省深圳市易瑞生物技术有限公司,深圳市检验检疫科学研究院,深圳市检验检疫科学研究院
基金项目:深圳市科技研发资金项目(JSGG20130624152620659,CXZZ20130322112111131)
摘    要:目的制备并鉴定环戊二烯类有机氯农药单克隆抗体。方法以环戊二烯类农药的特征部分为基础设计合成半抗原4-(4,5,6,7,8,8-六氯-3a,4,7,7a-四氢-4,7-亚甲基-1H-聚-1-氧)4-丁酮酸(CCD),并通过活泼酯法将其与载体蛋白BSA、OVA分别偶联制备免疫抗原CCD-BSA和包被抗原CCD-OVA;再经过动物免疫、细胞融合,筛选、克隆,得到1株能稳定分泌环戊二烯类农药抗体的单克隆细胞株。细胞株经扩大培养后,注射小鼠体内产生腹水,并将其用辛酸-硫酸铵和protein A柱子纯化出单克隆抗体。结果 用间接ELISA方法测定其效价为2.5×104,亲和力Ka为6.7×1010L/mol;以β-硫丹为竞争物,采用间接竞争ELISA法建立标准曲线,测得其IC50为16.2 ng/m L,LOD为2.1 ng/m L,定量检测线性范围为4.7~117.5 ng/m L,与其他5种结构类似物的交叉反应率高于10%。结论 本研究成功获得了抗环戊二烯类农药单克隆抗体,该抗体可实现果蔬中环戊二烯类农药的多残留快速检测。

关 键 词:环戊二烯类农药;间接ELISA;单克隆抗体
收稿时间:2014-10-08
修稿时间:2014-11-07

Preparation and identification of monoclonal antibody against chlorinated cyclodiene pesticide
XIAO Chen-gui,GU Da-Yong,DING Jing,YANG Xing-Xing,BI Si-Yuan,ZHU Hai,YUE Zhen-Feng and HOU Le-Xi. Preparation and identification of monoclonal antibody against chlorinated cyclodiene pesticide[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2014, 5(11): 3425-3430
Authors:XIAO Chen-gui  GU Da-Yong  DING Jing  YANG Xing-Xing  BI Si-Yuan  ZHU Hai  YUE Zhen-Feng  HOU Le-Xi
Affiliation:Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co Ltd,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen,Shenzhen Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen
Abstract:
Keywords:chlorinated cyclodiene pesticides   icELISA    monoclonal antibody
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