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邻苯三酚自氧化法测定甲烷氧化菌素-铜配合物的超氧化物歧化酶活性
引用本文:陈林林,张 伟,王振兴,辛嘉英.邻苯三酚自氧化法测定甲烷氧化菌素-铜配合物的超氧化物歧化酶活性[J].食品安全质量检测技术,2017,8(9):3438-3444.
作者姓名:陈林林  张 伟  王振兴  辛嘉英
作者单位:哈尔滨商业大学省高校食品科学与工程重点实验室,哈尔滨商业大学省高校食品科学与工程重点实验室,哈尔滨商业大学省高校食品科学与工程重点实验室,哈尔滨商业大学省高校食品科学与工程重点实验室, 中国科学院兰州化学物理研究所 羰基合成与选择氧化国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(21573055)、哈尔滨市应用技术研究与开发项目(2014RFQXJ115)、哈尔滨商业大学研究生创新科研资金项目(YJSCX2017-461HSD)
摘    要:目的建立甲烷氧化菌素(methanobactin,Mb)-铜配合物(Mb-Cu)模拟超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的邻苯三酚自氧化体系分析方法。方法利用HP 20大孔树脂从甲基弯菌IMV301l发酵液中分离纯化得到Mb,制备Mb-Cu测定其具有的SOD活性,利用紫外光谱分析对SOD邻苯三酚测活法进行系统研究。考察缓冲液浓度、邻苯三酚浓度、Mb-Cu浓度、EDTA-Na_2浓度、pH值和温度等对Mb-Cu模拟SOD活性的影响。结果在Mb-Cu浓度为0.8 mg/L,Tris-HAC缓冲溶液为0.05 mol/L(其中缓冲溶液的pH值为8.2、EDTA-Na_2的浓度为2 mmol/L),邻苯三酚浓度为0.363 mmol/L,温度为20℃时,邻苯三酚的自氧化速率相对较低,此时Mb-Cu对超氧阴离子自由基(O_2~-.)的抑制率较高,以此建立Mb-Cu模拟SOD活性的邻苯三酚自氧化分析方法。发现Mb-Cu符合影响生物催化剂条件的一般规律,但比生物酶具有更高的热稳定性。结论Mb-Cu可作为清除O_2~-.的SOD模拟酶,本试验建立的分析条件是最佳反应体系。

关 键 词:甲烷氧化菌素    甲烷氧化菌素-铜配合物    超氧化物歧化酶    邻苯三酚自氧化法    超氧阴离子自由基
收稿时间:2017/6/29 0:00:00
修稿时间:2017/9/7 0:00:00

Determination of superoxide dismutase activity in methanobactin-copper complexes by pyrogallol autoxidation
CHEN Lin-Lin,ZHANG Wei,WANG Zheng-Xing and XIN Jia-Ying.Determination of superoxide dismutase activity in methanobactin-copper complexes by pyrogallol autoxidation[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2017,8(9):3438-3444.
Authors:CHEN Lin-Lin  ZHANG Wei  WANG Zheng-Xing and XIN Jia-Ying
Affiliation:Local Key Laboratory of Food Science and Engineering, Harbin University of Commerce,Local Key Laboratory of Food Science and Engineering, Harbin University of Commerce,Local Key Laboratory of Food Science and Engineering, Harbin University of Commerce and Local Key Laboratory of Food Science and Engineering, Harbin University of Commerce, State Key Laboratory of Oxo Synthesis & Selective Oxidation Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences
Abstract:
Keywords:methanobactin  methanobactin-copper complex  superoxide dismutase  pyrogallol autoxidation  superoxide anion radical
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