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响应面法优化产β-内酰胺酶菌Bacillus cereus B03的发酵条件
作者姓名:陈成  宁喜斌
作者单位:1. 上海海洋大学食品学院, 上海 201306;2. 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心, 上海 201306;3. 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海), 上海 201306;4. 国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海), 上海 201306
摘    要:为快速高效地提高菌株Bacillus cereus B03的产酶能力,采用响应面法对Bacillus cereus B03产β-内酰胺酶的发酵培养基进行优化。首先通过单因素实验研究了不同碳源及浓度、不同氮源及浓度、不同金属离子及浓度、氯化钠、磷酸氢二钾以及温度、pH、接种量、装液量对菌株产酶活力的影响,然后设计Plackett-Burman试验筛选出影响产酶的3个显著性因素:温度、pH、接种量。在此基础上,最后设计Box-Behnken中心组合试验确定最优产酶发酵条件。结果表明,最佳发酵培养基成分为葡萄糖20 g/L、酵母浸粉20 g/L、NaCl 2 g/L、MgSO4·7H2O 0.2 g/L,K2HPO4·3H2O 4 g/L,最佳产酶发酵条件为发酵温度37 ℃,pH为7.3,接种量3%,装液量50 mL/250 mL。在此优化条件下,该菌株产β-内酰胺酶的酶活力为113278.7 U/mL,为优化之前酶活(88792.7 U/mL)的1.28倍。本研究为进一步工业化开发利用性状稳定且高产β-内酰胺酶的菌株提供借鉴。

关 键 词:β-内酰胺酶   Plackett-Burman设计   响应面法   发酵条件优化
收稿时间:2019-08-08
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