耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽抱杆菌HA06抗噬菌体菌株的选育

从耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽抱杆菌HA06的异常发酵液中分离到了2种噬菌体,将其命名为KB011、KB012。以枯草芽抱杆菌HA06为出发菌株,采用噬菌体、紫外线和MNNG复合诱变法选育出3株具有抗性的高产突变株,并对它们的遗传稳定性和发酵的酶活力进行了考察,结果表明,经7次传代,其中菌株RKS04、RKS016对噬菌体的抗性和发酵酶活力没有下降。     

乳制品生产过程中耐热菌分离鉴定与抑菌效果评价北大核心CSCD

通过对乳制品生产过程中微生物易污染点进行耐热菌菌株分离鉴定;同时利用低聚果糖、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为抑菌物质对耐热菌进行抑菌作用效果观察。结果表明,地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌等耐热芽孢菌为奶制品生产中优势污染菌;原料为耐热菌重要污染来源之一。抑菌物质对耐热菌生长有一定的抑制效果,组合添加抑菌物质抑菌效果更佳;对于不同的耐热菌,有针对性选择抑菌物质能起到较好的抑菌效果。     

乳制品生产过程中耐热菌分离鉴定与抑菌效果评价

通过对乳制品生产过程中微生物易污染点进行耐热菌菌株分离鉴定;同时利用低聚果糖、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌作为抑菌物质对耐热菌进行抑菌作用效果观察。结果表明,地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌等耐热芽孢菌为奶制品生产中优势污染菌;原料为耐热菌重要污染来源之一。抑菌物质对耐热菌生长有一定的抑制效果,组合添加抑菌物质抑菌效果更佳;对于不同的耐热菌,有针对性选择抑菌物质能起到较好的抑菌效果。     

乌拉尔甘草内生真菌的分离及其抑菌活性研究

研究乌拉尔甘草内生真菌及其次生代谢产物的抑菌活性,旨在获得有良好抑菌活性的菌株,寻找新型抗菌物质。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、单增李斯特菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、酿脓链球菌、屎肠球菌、粪肠球菌和白假丝酵母为试验菌株,用菌饼法及纸片法对分离的真菌及其次生代谢产物进行抑菌试验。从乌拉尔甘草中分离到46株内生真菌,其中34株内生真菌对指示菌表现出不同的抑菌活性,占总分离菌株的74%;20株内生真菌的发酵液对指示菌株也有一定的抑制作用,占总分离菌株的43%。乌拉尔甘草的内生真菌及其次生代谢产物中存在着丰富的抑菌天然活性物质,这可为新型抗菌物质提供资源。     

新疆圆柏叶内生菌的分离及其抑菌特性研究

对新疆圆柏叶内生菌进行分离,确定分离条件,分离纯化得到7 株菌株,采用打孔法对这7 株菌的发酵液进行抑菌实验。结果表明：其中两株菌的发酵液对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌呈现较强的抑菌活性。通过形态学观察和革兰氏染色,确定1 号菌株为革兰氏阳性球菌,2 号菌株为革兰氏阴性球菌,均无荚膜,无芽孢,不产酸,不产气,淀粉水解为阴性。     

罗布麻内生细菌的分离鉴定及抑菌活性

目的:研究罗布麻内生细菌及其抑菌活性,旨在深入开发新资源。方法:以红花罗布麻为研究对象,采用平板分离法从中分离内生细菌,利用牛津杯法对其发酵物进行抑菌活性研究,对有抑菌活性的菌株进行形态特征观察和16S rRNA序列同源性分析。结果:筛选出的D1菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌四株供试指示菌均有明显的抑制作用,D3菌株对藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌有一定的抑菌作用。结合菌株的形态学特征和16S rRNA序列同源性分析,将D1鉴定为假单胞菌,D3鉴定为菠萝泛菌。结论:罗布麻中蕴含着具有抑菌活性的内生细菌资源,可进一步的开发利用。     

贵州大方豆酱中优势细菌种群分析与分离鉴定

应用PCR-DGGE技术分析贵州大方县特色豆酱中细菌种群,并通过传统分离培养方法得到其主要优势菌株。PCR-DGGE指纹图谱在大方豆酱中共鉴定到食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）、肠杆菌（Enterobacteriaceae）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）等10种菌,其中主要优势菌是枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,其次为乳酸片球菌（Pediococcus sacidilactici）和短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）;并利用传统分离培养方法在大方豆酱中分离得到枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,以便后期研究。     

桶装胀罐番茄酱中腐败菌分离纯化及鉴定研究

从胀罐番茄酱中分离出12株菌,并对这12株菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定,得出在这12株菌株中有4株芽孢杆菌,3株酵母菌,3株链球菌,2株霉菌。经过反证实验得出导致番茄酱胀袋的主要微生物是芽孢杆菌,酵母菌和霉菌,并通过16S rDNA序列分析及构建系统发育树对优势菌群芽孢杆菌鉴定为4个种,分别为:枯草芽孢杆菌,短小芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌。确定了导致桶装番茄酱胀袋的腐败菌。     

桶装胀罐番茄酱中腐败菌分离纯化及鉴定研究

从胀罐番茄酱中分离出12株菌,并对这12株菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定,得出在这12株菌株中有4株芽孢杆菌,3株酵母菌,3株链球菌,2株霉菌。经过反证实验得出导致番茄酱胀袋的主要微生物是芽孢杆菌,酵母菌和霉菌,并通过16S rDNA序列分析及构建系统发育树对优势菌群芽孢杆菌鉴定为4个种,分别为:枯草芽孢杆菌,短小芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌。确定了导致桶装番茄酱胀袋的腐败菌。      

泡菜中产抗菌素的乳酸菌筛选和性能鉴定

主要是对自然发酵泡菜中的乳酸菌素产生菌株分离筛选、鉴定。采用TJA培养基初步筛选9株典型菌株进行抗菌素产生菌的筛选,供试菌为金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过抑菌实验,综合菌株的形态学特征、生理生化特征,筛选确定了2株细菌素产生菌菌株。     

新疆准噶尔铁线莲不同部位提取液抑菌活性初步研究

用水和70% 乙醇从准噶尔铁线莲不同部位中提取其活性成分,探讨其抑菌作用。结果表明：叶水提物的MIC 值分别为大肠杆菌5g/100mL,金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为3g/100mL、枯草杆菌为1g/100mL;叶醇提物的MIC 值分别为大肠杆菌3g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为0.5g/100mL、短小芽孢杆菌1g/100mL。茎水提物的MIC值分别为大肠杆菌10g/100mL,金黄色葡萄球菌7g/100mL、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为5g/100mL。茎醇提物的MIC 值分别为大肠杆菌7g/100mL,金黄色葡萄球菌5g/100mL,枯草杆菌、短小芽孢杆菌为3g/100mL。花水提物的MIC 值分别为大肠杆菌5g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为3g/100mL,短小芽孢杆菌1g/100mL。花醇提物的MIC 值分别为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为1g/100mL,枯草杆菌为0.5g/100mL。果实水提物的MIC 值分别为大肠杆菌、短小芽孢杆菌为5g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为3g/100mL;果实醇提物的MIC 值分别为大肠杆菌为3g/100mL,金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为1g/100mL。     

传统发酵黄豆酱中低营养菌株的筛选及产胞外酶特性分析

为了更好地研究北方地区传统黄豆酱中低营养菌株的分布及其功能特性,对采集于不同地区的黄豆酱样品进行低营养菌株的筛选、分离及纯化,并研究其产胞外酶特性。结果共分离出114 株低营养菌株,其中69 株产纤维素酶,81 株产淀粉酶,112 株产脂肪酶,72 株产β-葡萄糖苷酶,59 株产蛋白酶。通过16S rRNA基因序列分析对产酶活性高的代表菌株进行鉴定,鉴定出5 种类别菌株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）、萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeu）、阿萨尔基亚芽孢杆菌（Bacillus axarquiensis）。所筛选的产酶活性高的低营养菌株短小芽孢杆菌HS1-4和枯草芽孢杆菌HS5-13耐盐性高,对环境的抗耐性强,具有广阔的应用前景。     

Diversity of spore-forming bacteria and identification of Bacillus amyloliquefaciens as a species frequently associated with the ropy spoilage of bread

This study examines the diversity of spore-forming bacteria isolated from raw materials/bread using molecular methods along with a rapid and innovative technology, the FT-NIR spectroscopy. Microbiological analysis showed that 23% of semolina and 42% of other raw materials (including grain, brewer yeast, improvers) contained more than 100 spores/g and more than 50% of each kind of sample was contaminated at a level ranging from 1 to 100 spores/g. A high bacterial diversity characterized raw materials. In total 176 isolates were collected and characterized: 13 bacterial species belonging to Bacillus (10) and Paenibacillus (3) genera were identified by sequencing of 16S rRNA, gyrA or gyrB genes. The two closely related species Bacillus amyloliquefaciens (strain N45.1) and Bacillus subtilis (strain S63) were also analyzed by the spectroscopic technique FT-NIR. This analysis gave clear discrimination between the strains in the score plot obtained by the PCA and allowed to identify the spectral region 5600-4000 cm(-1) as the information-rich region for discrimination. B. amyloliquefaciens, possibly misidentified as B. subtilis in previous studies, was recognized as the most frequent species, found also in ropy bread. Moreover, the screening test for rope production indicated that mainly B. amyloliquefaciens, together with B. subtilis and Bacillus pumilus, could cause spoilage in bread, even if the last two species were represented by a low number of isolates. The Bacillus cereus group and Bacillus megaterium showed a lower percentage (30-70%) of isolates potentially able to cause the rope, but considering the high number of B. cereus group isolates detected in this study, this bacterial group should also be considered important in rope spoilage. In conclusion, results demonstrate that raw materials used to produce bread represent a rich source of spore-forming bacteria, therefore their microbiological quality should be monitored before use. Moreover, this study highlights for the first time the importance of the species B. amyloliquefaciens in rope spoilage and indicates that other species may also cause this alteration although strains of the same species may behave differently.     

牛栏山二锅头酒醅中芽孢杆菌分离鉴定及发酵风味分析

从牛栏山二锅头酒醅中分离筛选出5株产风味物质能力较好的芽孢杆菌,通过16SrDNA序列分析和构建系统发育树,5株细菌分别为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。分别对它们进行发酵风味分析,其发酵液经固相微萃取和GC-MS分析,并除去空白培养基中物质,地衣芽孢杆菌BL-1发酵液共检测得到14种风味物质,蜡样芽孢杆菌BC-1和短小芽孢杆菌BP-1发酵都得到12种风味物质,枯草芽孢杆菌BS-1好氧发酵共得到16种风味物质,枯草芽孢杆菌BS-2厌氧发酵共得到19种风味物质。除短小芽孢杆菌外,其他4株芽孢杆菌都含有较多数量的酯类化合物,且主要代谢风味物质都是3-羟基-2-丁酮,而短小芽孢杆菌BP-1则含有数量较多的烃类化合物,其主要风味物质是苯乙醇。     

腐败醋中微生物的分离鉴定及乳酸链球菌素对其抑制作用

从腐败醋中分离出84 株不同微生物菌株,通过对其形态学观察、革兰氏染色、16S rDNA测序,并与GenBank中已知序列进行比对,以及进一步测定16S～23S ITS,发现其由20 株解淀粉芽孢杆菌、12 株地衣芽孢杆菌、6 株芽孢杆菌属1NLA3E、12 株蜡样芽孢杆菌、4 株巨大芽孢杆菌、3 株短短芽孢杆菌、2 株短小芽孢杆菌、11 株凝结芽孢杆菌、12 株类芽孢杆菌、1 株耐酸乳酸菌、1 株产气荚膜梭菌组成。除耐酸乳酸菌外,均为革兰氏阳性芽孢杆菌。通过管碟法和比浊法测定了乳酸链球菌素（Nisin）对以上菌株的抑菌效价,显示Nisin对腐败醋中分离得到的微生物菌株均具有明显的抑菌或杀菌活性。     

红果龙葵水提液与乙醇提取液的抑菌作用

使用无菌蒸馏水和70% 乙醇从红果龙葵果实中提取活性成分并探讨其抑菌作用。结果表明,提取物对微生物有明显的抑制作用。水提液的最低抑菌质量浓度分别为大肠杆菌2mg/mL、金黄色葡萄球菌1mg/mL、枯草杆菌0.5mg/mL、短小芽孢杆菌3mg/mL、产气芽孢杆菌0.5mg/mL;乙醇提取液的最低抑菌质量浓度分别为大肠杆菌2mg/mL、金黄色葡萄球菌2mg/mL、枯草杆菌1mg/mL、短小芽孢杆菌5mg/mL、产气芽孢杆菌1mg/mL。     

北宗黄酒麦曲微生物的分离鉴定

利用梯度稀释法和划线纯化法对麦曲中的微生物进行分离纯化,得到7株细菌和5株真菌。通过形态学特征观察和分子生物学方法进行菌种鉴定,细菌分别为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、根际芽孢杆菌(Bacillus rhizosphaerae)、索诺拉沙漠芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)。真菌分别为米曲霉(Aspergillus oryzae)、黑曲霉(Aspergillus niger)、根菌属(Talaromyces radicus)、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、伞状犁头霉(Absidia corymbifera)。     

杜仲雄花正丁醇提取物抑菌活性研究

为探讨杜仲雄花正丁醇提取物的抑菌活性,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌、根霉、青霉和黑曲霉为供试菌种,采用打孔法和倍比稀释法,检测杜仲雄花正丁醇粗提物及经过硅胶柱分离得到的7种不同极性提取物对真菌和细菌的抑菌活性,并确定最小抑菌浓度(MIC),分析粗提物及7种分离产物的活性。结果显示,杜仲雄花正丁醇粗取物对金黄色葡萄球菌和炭疽杆菌具有较好的抑菌作用,MIC分别为0.007 8g/mL和0.015 6g/mL;杜仲雄花正丁醇粗提物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、根霉、黑曲霉和青霉没有抑制作用。然而经过硅胶柱进一步分离发现,经过分级提取的样品4和样品5对黑曲霉出现了抑制作用,对金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌、和枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性菌的抑制作用明显增强。说明杜仲雄花正丁醇粗提物经过硅胶柱的分离能够得到对不同菌株的特异抑菌物质,这为寻找不同菌种的抑菌活性物质提供了参考依据。     

清香型白酒酒醅发酵菌株分离鉴定及细菌群落结构分析

采用纯培养技术对清香型白酒酒醅中的乳酸菌和芽孢杆菌进行分离鉴定,同时通过Illumina MiSeq高通量测序技术解析清香型白酒酒醅细菌群落结构。结果表明,所有酒醅样品共分离得到13株乳酸菌,分别鉴定为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）4株、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）3株、短乳杆菌（Lactobacillus brevis）3株、粪肠球菌（Enterococcus faecium）2株以及希尔氏乳杆菌（Lactobacillus hilgardii）1株。从酒醅中分离得到的17株芽孢杆菌菌株分别鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）9株、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）2株、短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus）2株、澳洲芽孢杆菌（Bacillus australimaris）2株、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）1株以及蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）1株。Illumina MiSeq高通量测序技术结果显示,酒醅中优势菌门分别为厚壁菌门（Firmicutes）（97.96%）、放线菌门（Actinobacteria）（1.24%）和变形菌门（Proteobacteria）（0.76%）;优势细菌属为乳酸杆菌属（Lactobacillus）（97.42%）、栖热嗜油菌属（Thermoleophilum）（1.22%）和假单胞菌属（Pseudomonas）（0.72%）。