食品饲料中含硫氨基酸测定方法的研究

本文介绍了食品饲料中含硫氨基酸的测定方法。重点讨论了预氧化水解离子交换色谱法一些主要影响因素和操作参数的确定、操作上的简化与改进，评价了方法的准确度与精密度，特别是与１９９１年八国２６个实验室的大型联合试验结果做了比较，并探讨了该法同时测定其它氨基酸的可能性。     

一种减肥胶囊中总黄酮测定前处理条件的研究

该试验以芦丁为对照品,采用分光光度法对一种减肥胶囊中总黄酮含量进行测定。通过对提取液浓度、超声时间、超声温度、洗脱速度等前处理条件进行优化,确定了最佳的样品前处理条件：用体积分数为60%的乙醇提取,70 ℃条件下超声40 min,甲醇洗脱速度为1滴/2～3 s。该试验操作简单,稳定性、精密度及准确性良好。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

高效液相色谱法测定酵母葡聚糖的前处理条件的研究及优化

酵母葡聚糖作为一种水不溶性多糖,其测定方法一直是研究中的一个难点,目前国内外尚没有酵母葡聚糖的标准测定方法。对酵母葡聚糖HPLC测定方法进行了研究,特别针对检测前样液的酸水解及前处理条件进行了深入的研究及优化,得出了最佳的酵母葡聚糖HPLC测定的前处理工艺,并采用葡聚糖标准品对本方法进行校正,形成了一种准确、方便、快捷的酵母葡聚糖HPLC测定方法。     

活性白土中塑化剂含量测定的前处理条件优化

采用溶剂提取活性白土中的3种塑化剂（DBP、DEHP、DINP）,提取液经SPE柱净化后,进气相色谱-质谱仪测定。以3种塑化剂的含量为考察指标,对活性白土中塑化剂含量测定的前处理条件进行了单因素实验和正交实验优化。结果表明,活性白土中塑化剂含量测定的最佳前处理条件为：甲醇饱和的正己烷溶液为提取溶剂,提取溶剂用量5 mL（活性白土1 g）,提取时间3 min,提取温度20 ℃。在最佳前处理条件下,活性白土中3种塑化剂DEHP、DINP、DBP的含量分别为3.621、0004、0.078 mg/kg。     

柱前衍生RP-HPLC测定杨树花中氨基酸含量

【摘要】目的 建立一种采用柱前衍生-反相高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法 以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生, 采用高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果 21种氨基酸线性范围为0.0019～2.7000 μmol?mL－1, R2均＞0.9990; 21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.25％～100.04%之间、RSD 为0.57％～2.73％(n=6), 水解氨基酸的平均加样回收率在90.21％～100.01％之间、RSD 为0.52％～2.32％(n=6)。结论 该方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽, 适合杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。     

柱前衍生化-HPLC测定罗非鱼中氨基酸的含量

广西是罗非鱼主产大区,对罗非鱼氨基酸测定,对实现罗非鱼的产业高值化有一定重要作用.建立反相高效液相色谱法测定罗非鱼肉中氨基酸含量的方法:采用XDB-C18色谱柱,以邻苯二甲醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)为柱前衍生化试剂,柱温35℃,流动相为醋酸钠缓冲液、甲醇、水及乙腈.18种氨基酸在40min内得到了较好的分离.测定了罗非鱼鱼肉氨基酸的组成和含量,结果表明,罗非鱼鱼肉中含有至少18种氨基酸,其中8种必需氨基酸总含量达到了49.96％,是一种优质的蛋白资源.     

反相高效液相色谱法检测奶粉中含硫氨基酸

目的：建立奶粉中含硫氨基酸反相高效液相色谱检测方法,为含硫氨基酸检测提供新思路。方法：用常规酸水解和氧化水解法水解奶粉,对水解条件和色谱分离和检测条件进行研究,用反相高效液相色谱法测定奶粉中的含硫氨基酸。结果：蛋氨酸(Met)、胱氨酸[(Cys)2]检出限分别为0.7、0.3μmol/L,定量检测范围均为10～300μmol/L,相关系数分别为0.9993、0.9992。经酸水解和氧化水解处理的奶粉,所测得的Met含量无显著差异,均为0.43g/100g,(Cys)2的含量则分别为0.06、0.14g/100g,差异显著。结论：奶粉中Met含量的高效液相色谱HPLC检测可选用酸水解或氧化水解中任一种前处理方法,(Cys)2含量的测定只能采用氧化法进行前处理。     

食品中滑石粉含量测定样品前处理方法的改进

对国标GB 5009.269—2016《食品中滑石粉的测定》火焰原子吸收光谱（FAAS）法中试样前处理湿消解法作了改进,将原湿消解法中的二次消解改为一次消解,并修改了测定结果的计算公式,使称取样品更加简便易行。采用改进后的消解方法处理面粉样品,测定其滑石粉的含量并做了加标回收实验。结果表明,与国标前处理湿消解法相比,样品前处理所用的时间从约11 h减少至约6 h,实验所耗用的器材及试剂量更少,而样品的加标回收率为100.3%,表明本次改进是可行的。此外,这种改进方法也可直接用于食品样品中滑石粉含量测定的微波消解方法。     

烟草中钾含量测定前处理方法的改进

为提高烟叶中钾的分析速度 ,对连续流动分析法中烟叶的前处理过程进行了改进。即用蒸馏水直接萃取烟草中的钾作为待测液 ,并与消化法分析结果进行了比较。结果表明 ,水提取法钾的回收率为 1 0 1 3%,变异系数小于 2 %,与消化法分析结果无明显差异 ,可以替代消化法进行烟叶中钾测定的前处理。     

氨基酸自动分析仪测定游离L-半胱氨酸

目的对比讨论含硫氨基酸的传统测定方法过甲酸氧化法,针对添加了L-半胱氨酸的保健食品,提出一个操作简便、计算准确的测定游离L-半胱氨酸含量的方法。方法称取试样用上机缓冲液超声溶解,微孔滤膜过滤,应用氨基酸自动分析仪分析,用Na型离子交换色谱柱分离,L-半胱氨酸标准品定量计算其含量。结果L-半胱氨酸浓度在0.3861~3.0648 mg/m L的范围内与峰面积的线性良好,相关系数r0.999。在80%、100%、120%添加水平下,L-半胱氨酸的平均回收率为97.2%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,适用于保健食品中游离L-半胱氨酸的含量测定。     

酸水解-全自动氨基酸分析仪测定方格星虫中氨基酸

目的:优化测定方格星虫氨基酸的实验条件。方法:研究以酸水解-全自动氨基酸分析仪分析法对海南东方方格星虫中18种氨基酸含量进行分析测定,为确保该实验结果的有效性与可行性,辅以线性关系,加标回收率实验,精密度实验,方法检出限的计算分析。结果:实验发现方格星虫样品中含有18种氨基酸,其中,鲜方格星虫中天门冬氨酸、精氨酸含量较高,分别为2.02%、1.26%,胱氨酸、色氨酸含量最低,分别为0.21%。方格星虫干中谷氨酸、精氨酸含量最高,分别为11.89%、7.94%,而胱氨酸、色氨酸含量最低,分别为0.45%、1.07%;结论:实验方案具备可操作性及数据有效性,仪器的精密度高,相对标准偏差在0.21%以下,检出限低,最低达到0.00000001 ng/kg,线性范围宽,且相关系数在0.9999以上,操作简便,结果令人满意。      

水解法与超声法检测保健品中支链氨基酸粉的支链氨基酸比对

目的 比较水解法与超声法测定保健品中支链氨基酸粉的支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)含量的分析方法。 方法 样品分别经水解法和超声法进行前处理后, 经Agilent Eclipse XDB-phenyl柱分离, 以甲醇和0.1%甲酸溶液为流动相, 梯度洗脱, 流速为0.4 mL/min, 柱温40 ℃, 采用液相色谱-质谱法检测。结果 亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸在0.01~0.05 mmol/L的浓度范围内, 线性关系良好, 相关系数r均大于0.99。样品经2种方法处理后, 都能够准确检测支链氨基酸的含量, 2种方法的实验结果比对的相对误差均<5%, 水解法处理的精密度相对标准偏差为4.0%~5.3%, 而超声方法的精密度相对标准偏差均小于5.0%。结论 与水解法相比, 超声法前处理方法操作简便, 分离效果明显, 更适用于提取保健食品中支链氨基酸粉。     

蓖麻饼粕提取氨基酸及酸水解法优化初探

以蓖麻饼粕为原料,采用酸水解法降解其中的蛋白质提取氨基酸并对氨基酸的组分进行了比较和分析。探讨了硫酸浓度、回流时间、料液比、提取方式对氨基酸提取率的影响。结果表明:氨基酸提取的最佳工艺条件为硫酸浓度为4mol/L,回流时间为6h,料液比为1∶6,提取方式为抽滤,氨基酸的提取率为55.692%,其中谷氨酸含量最高为18.5%。      

利用低值鱼生产氨基酸调味基料工艺的研究

介绍以低值鱼为原料,用生物酶解方法制备氨基酸调味基料的生产工艺。在实验过程中分别对酶用量、反应温度、反应时间等影响酶解的因素进行了研究,确定了酶解的最佳反应条件。     

氨基酸分析仪测定玉米浆中17种游离氨基酸的不确定度评定

依据GB/T 18246-2000,应用氨基酸分析仪测定了玉米浆中17种游离氨基酸含量。在此基础上,应用\     

全自动氨基酸分析仪测定酱油中游离氨基酸的不确定度评定

该实验评定了全自动氨基酸分析仪测定酱油中游离氨基酸的不确定度。参考 CNAS-GL 006—2019《化学分析中不确定度的评估指南》和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》中的规定与要求,分析游离氨基酸在测定过程中的各种不确定度来源。在包含因子k=2时,酱油中游离氨基酸的扩展不确定度范围为0.02～0.60 g/100 g。结果表明,影响不确定度的主要因素是仪器本身的不确定度和酱油重复性测量的不确定度。     

酶解鸡汤熬制过程中蛋白质和氨基酸的变化

利用木瓜蛋白酶适度酶解,进行常压和高压熬制,探讨鸡汤蛋白质和氨基酸的变化。结果显示:酶解鸡汤熬制过程中粗蛋白逐渐增加,30 min后呈显著性增加(p<0.05),常压熬制90 min、高压熬制30 min分别为0.848%、0.921%。可溶性蛋白逐渐增加,但常压熬制120 min仍然较低,仅为5.45 mg/g;高压熬制20 min的可溶性蛋白为6.546 mg/g,熬制70 min后高达8.372 mg/g。酶解鸡汤常压熬制过程中胶原蛋白呈显著增加(p<0.05),熬制120 min后仅为4.208%;高压熬制60 min后显著增加(p<0.05),熬制90 min后高达7.827%。酶解常压熬制和高压熬制鸡汤的氨基酸总量分别增加了13.64%、42.94%,苦味氨基酸分别增加了14.59%、53.95%。表明适度酶解和高压熬制能加快蛋白质类物质的溶出,缩短鸡汤熬制时间,但鸡汤苦味物质也有所增加。      

Estimation of correction factors to determine the true amino acid concentration of protein after a 24-hour hydrolysis

Although it has been acknowledged for a long time that a single period of hydrolysis, normally 21 to 24 h, is not the optimal time for most of the AA, a single period is routinely used due to time and cost constraints. As models to balance dairy rations for proteins are evolving toward balancing for AA, it becomes critical to improve the predictions of AA supply from digested proteins. Our objective was to develop correction factors that could systematically be applied to AA concentrations obtained after a 24-h hydrolysis of proteins to account for incomplete recovery and therefore determine their true AA composition. Thirteen substrates were selected to represent different types of proteins commonly used to estimate the supply of AA in ration formulation models: feed ingredients (grass silage, corn silage, soybean meal, canola meal, high-protein corn dried distillers grains, and wheat dried distillers grains plus solubles), 16-h rumen residues (soybean meal and canola meal), digesta (duodenal digesta and feces), and rumen microorganisms (fluid-associated bacteria, particle-associated bacteria and protozoa). Each protein was hydrolyzed in 6 N HCl for multiple hydrolysis times: 13 (2, 4, 8, 12, 18, 21, 24, 30, 48, 72, 96, 120, and 168 h) for feed ingredients, rumen residues, and digesta, and 9 (2, 4, 8, 18, 24, 30, 48, 96, and 168 h) for rumen microorganisms; all analyses were conducted in triplicate. Using nonlinear regression, the AA composition in the protein before the hydrolysis (A₀) was derived for each AA in each protein. Two ratios were calculated as potential correction factors: A₀/24-h concentration (A₀/24h) and the maximal concentration/24-h concentration (max/24h). Both ratios were tested to determine if the type of proteins was affecting them. The ratios A₀/24h were not affected by the type of proteins, whereas the ratios max/24h were also not affected by the type of proteins except for 3 nonessential AA (Ala, Glu, and Gly). In an attempt to propose correction factors, our results were combined with results from the literature reporting ratios A₀/24h, ratios max/24h, or the ratio of the AA composition calculated from gene structure/24 h. The correction factors proposed for individual AA varied from 1.02 (Asp) to 1.12 (Thr). For the essential AA, the highest ratios were obtained, as expected, for the branched-chain AA and Thr. Formulation programs balancing dairy rations for essential AA would need to acknowledge the incomplete recovery of AA when obtained from 24-h hydrolysis and include correction factors, specific for each AA, but the same across different types of proteins, to correctly estimate the true AA supply to dairy cows.     

全自动氨基酸分析仪测定支链氨基酸粉中牛磺酸的含量

目的建立全自动氨基酸分析仪测定支链氨基酸粉中牛磺酸。方法样品经上样缓冲液(pH 2.2)溶解提取,按照氨基酸分析仪设定的钠体系程序洗脱,用Na型离子交换色谱柱分离,与茚三酮反应液在135℃下反应,生成可在570 nm和440 nm检测到的蓝色物质,采用外标法定量。结果牛磺酸在4.1065~20.5326μg/mL浓度范围内有良好的线性,r~2=0.999,回收率为101.28%,RSD为2.1%,检出限为15 mg/100 g。结论该方法准确可靠,不需要剧毒衍生试剂,适用于支链氨基酸粉中牛磺酸的测定。