不同产地地参中17种氨基酸的测定与分析

以全国6 个产地地参为研究对象,建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生,超高效液相色谱法同时测定地参中17 种氨基酸含量的方法,并对不同产地地参中氨基酸类成分进行分析评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mmX150mm,1.7 μm)分离,流动相为0.1 mol/L乙酸钠-80％乙腈溶液梯度洗脱(冰...     

柱前衍生-RP-HPLC法测定蜂王幼虫冻干粉中16种氨基酸含量

目的:建立柱前衍生-反相高效液相色谱同时测定蜂王幼虫冻干粉中16种氨基酸含量的方法,并测定29批蜂王幼虫冻干粉中水解氨基酸含量。方法:以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析,以乙腈-水(4∶1)溶液和0.03 mmol/L醋酸钠-乙腈(355-15,ph=6.5)进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,在254 nm波长处测定氨基酸含量。结果:氨基酸在0.0625~1.2500 mmol/L范围内具有良好的线性关系(r≥0.9974),平均平均回收率在94.97%~99.50%之间;检出限为0.0005~0.0015 mmol/L,定量限为0.0075~0.0240 mmol/L。结论:该方法简便易行、准确性高、稳定性好,适于蜂王幼虫冻干粉中氨基酸定量检测。     

超高效液相色谱法检测食用植物油中的苯并(a)芘

建立了超高效液相色谱法测定食用植物油中苯并(a)芘的方法.实验采用固相萃取方法提取样品中的苯并(a)芘,用ACQUITY UPLC(R) BEH C(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.02mol/L的乙腈-水(体积比为80:20)为流动相,流速0.3 mL/min,柱温25℃,二极管阵列检测器在波长296 nm进行检测.测定在3 min内完成,样品分析的相对标准偏差为2.65%,加标回收率在96.6%-104.8%之间.     

HPLC测定不同方法提取的山黧豆中β-ODAP

利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生试剂,建立了测定山黧豆中毒素β-Ν-草酰基-α,β-二氨基丙酸(简称β-ODAP)及其无毒性的异构体α-N-草酰基α,β-二氨基丙酸(简称α-ODAP)的恒组分洗脱高效液相色谱方法。并优化了流动相的pH、乙腈含量以及柱温。得出最佳色谱条件为:C18,250 mm×46 mm,5μm;流动相∶乙腈/溶液A(17∶83,体积比;溶液A的配比是K2HPO4:二甲基甲酰胺:水为0.03 mol∶10 mL∶990 mL,并用冰醋酸调pH为5.5);流速1.0 mL/min;检测波长360 nm;柱温28℃。利用该方法比较了水提取法、30%乙醇提取法及0.2 mol/L高氯酸提取法的优缺点。结果发现:水提取法和0.2 mol/L高氯酸提取法效果相当,水提取法和30%乙醇提取法均耗时长,需要24 h,而耗时长会不可避免的导致β-ODAP向α-ODAP的转换,且30%乙醇提取法不如水提法和高氯酸提取法效果好。而0.2 mol/L高氯酸提取法耗时短,只需要在0℃～4℃下提取1 h。     

山杏内种皮磷脂类化合物提取与测定

以山杏内种皮为原料,采用超声波辅助萃取法提取磷脂类化合物,并利用高效液相色谱法分离测定含量。以总磷脂得率为评价指标,通过单因素试验和正交试验优化超声波辅助萃取条件。结果表明,以正己烷-乙醇(1∶1,体积比)为提取溶剂,料液比为1∶15(g/mL),超声功率为450 W,超声时间为50 min最优,在此条件下,山杏内种皮总磷脂含量为0.091 2%。高效液相色谱-紫外检测器法测定磷脂含量,采用ZORBAX Rx-SIL型硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇(15∶85,体积比),流速1.0 mL/min,柱温35℃,进样量20μL,测得山杏内种皮中磷脂酰乙醇胺(PE)含量为0.393 4 mg/g。     

RP-HPLC法测定酸牛奶中纳他霉素含量

目的:建立测定酸牛奶中纳他霉素含量的反相高效液相色谱法。样品用甲醇萃取并沉淀蛋白质后进样,用ODS-2(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,流速为1.0mL/min,流动相:0.053mol/L乙酸铵与0.025mol/L氯化铵的缓冲液∶乙腈为70∶30(体积比)1L 5mL四氢呋喃,紫外检测波长302nm,RSD为0115%(n=10),标准曲线r=0.9962,平均回收率分别为96.5%。结论:本法具有操作简单、快速测定、灵敏度高、专属性好和准确性好等优点。     

胖大海中氨基酸的含量测定及多元化统计分析

目的:测定胖大海中氨基酸的含量,实现对不同产地胖大海的质量评价。方法:胖大海以6 mol/L盐酸于140 ℃水解2 h,以邻苯二甲醛/9-芴甲氧羰酰氯(OPA/FMOC)为衍生化试剂进行柱前衍生,用反相高效液相色谱法测定23种氨基酸的含量;对不同产地胖大海中氨基酸的含量进行综合评价。采用Agilent Advance Bio AAA色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7 μm),以10 mmol/L磷酸氢二钠+10 mmol/L硼酸钠缓冲液(用盐酸调节pH值至8.2)为流动相A,甲醇-乙腈-水(45:45:10)为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40 ℃,检测波长338、262 nm,进样量1 μL。利用聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法对不同产地胖大海中的氨基酸进行综合评价。结果:含量测定方法学验证结果良好。通过聚类分析可将样品分为3类,结合主成分分析法、偏最小二乘法判别分析发现其中7种不同氨基酸因产地不同导致的差异。结论:研究所建立的氨基酸含量测定方法可以用于胖大海中氨基酸的定量分析,通过主成分分析法、聚类分析及偏最小二乘法可用于区分不同产地胖大海氨基酸的成分差异,为胖大海中的氨基酸评价及资源的开发提供理论基础。     

猕猴桃中甲基硫菌灵和异菌脲HPLC测定方法研究

建立高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)同时测定猕猴桃中甲基硫菌灵和异菌脲两种农药的含量。猕猴桃样品用乙腈涡旋提取,采用反相高效液相色谱法测定,色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,进样体积20μL,流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液=(60∶40),采用等度洗脱模式。结果表明,甲基硫菌灵和异菌脲分别在0.204μg/m L~10.2μg/mL和0.210μg/m L~10.5μg/mL范围内线性关系良好,方法的专属性和准确度良好,能够用于检测猕猴桃样品中上述两种农药的残留。     

RP-HPLC测定阿奇霉素缓释阴道栓的含量

目的 建立RP-HPLC测定阿奇霉素缓释阴道栓的含量.方法 用C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)柱,以乙腈-磷酸氢二钾溶液(0.02 mol/L)-磷酸二氢钾溶液(0.07 mol/L)溶液(60∶25∶15)为流动相,柱温40℃,流速1.2 mL/min,检测波长215 nm.结果 阿奇霉素的线性范围为60～800 μg/mL,r=0.999 8;低、中、高3种浓度的平均回收率分别为101.4%,99.1%,101.2%.结论 本方法简便、灵敏、准确.     

HPLC法测定不同产地黑豆皮中表儿茶素的含量

建立黑豆皮中表儿茶素的含量测定方法,测定5个不同产地黑豆皮中表儿茶素的含量。采用HPLC法测定黑豆皮中表儿茶素的含量,色谱柱:Phenomenex Luna Su C18柱(250×4.60 mm,5μm);流动相:A相为体积比为1.0%磷酸水溶液,B相为乙腈∶水(体积比为80∶20),进行梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:280 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果得出,表儿茶素标准曲线回归方程为:Y=6×106X-14 292(r=0.999 8),在0.154 95μg~1.549 5μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.7%、100.2%、103.9%,不同产地黑豆皮中表儿茶素含量范围为1.27 mg/g～4.18 mg/g。所用方法简便、准确,可用于不同产地黑豆皮的质量控制。     

湖北贝母与浙贝母的成分及理化性质对比分析

本文综合对比了同产区同生长周期湖北贝母与浙贝母的总酚、总黄酮、游离氨基酸、微量元素、核苷与核碱基等成分组成及其抗氧化性能、溶解度、溶胀度和糊化特性等理化性质。与湖北贝母相比,浙贝母成熟鳞茎具有较优的抗氧化活性及较高的总酚、总黄酮、DPPH值、FRAP值和ABTS值。另一方面,湖北贝母成熟鳞茎中的核苷、核碱基以及氨基酸总含量显著高于浙贝母(P<0.05),并且湖北贝母成熟鳞茎对人体必需微量元素的累积能力显著优于浙贝母(P<0.05)。DSC数据显示浙贝母鳞茎粉末具有较低的T₀、T_p、T_c值和较高相变焓值ΔH,结合其高直链淀粉含量,推测浙贝母成熟鳞茎淀粉分子双螺旋结构比湖北贝母更加紧密有序。总之,湖北贝母与浙贝母成熟鳞茎的成分含量和理化性质之间存在较大差异,本研究可为贝母在功能食品中的加工应用提供参考。     

浙贝母花-宁海白枇杷花保健饮料的研制及其止咳作用

以浙贝母花和宁海白枇杷花为原料,研制保健饮料并评价其止咳功能。通过正交设计,确定浙贝母花最佳提取工艺为加12倍量水,提取时间2 h,提取3次;宁海白枇杷花最佳提取工艺为加9倍量水,提取时间1.5 h,提取1次。通过正交设计和感官品质评价,确定保健饮料的最佳配方为:浙贝母花提取液160 g/L,宁海白枇杷花提取物40 g/L,木糖醇40 g/L、柠檬酸0.5 g/L、蜂蜜35 g/L和果胶3 g/L。经测定,饮料中总生物碱含量为0.12 mg/mL,总黄酮含量为0.40 mg/mL,各项指标均符合相关规定。采用小鼠氨水引咳实验和豚鼠枸橼酸引咳实验对产品的止咳功能进行评价,表明其有显著的止咳作用(p<0.05)。该饮料保健性能突出、风味独特、质量符合相关标准,可用于咳嗽类疾病的辅助治疗。     

柱前衍生-HPLC法测定五指毛桃中16种游离氨基酸含量

目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法同时测定不同产地、不同叶形五指毛桃Ficus hirta Vahl根中16种氨基酸含量,评价其质量差异。方法:采用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,采用Ultimate Amino Acid色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以0.1 mol/L乙酸钠-乙腈为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温为40 ℃,检测波长为254 nm。结果:9个产地12份五指毛桃根中16种氨基酸线性关系良好,相关系数均大于0.9992,平均加样回收率介于98.1%~105.9%之间,RSD为0.67%~2.11%,L-天门冬氨酸、L-谷氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、L-甲硫氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-苯丙氨酸和L-赖氨酸的平均含量分别为3.308、3.424、2.750、2.978、1.302、4.549、2.778、3.989、3.818、1.327、3.732、0.395、2.925、4.549、2.873、3.305 mg/g。产地为漳州卫生职业学院的四种叶形五指毛桃根中氨基酸总含量由高到低为,三指浅裂>七指深裂>五指深裂>全缘;其余8个产地的五指毛桃根中16种氨基酸总含量也存在差异,含量最高的为广西钦州灵山县,其次为广东河源源城区源南镇,含量最低的为福建漳州龙海区程溪镇。结论:该方法能使16种氨基酸很好地进行分离,可靠准确,且加样回收率较高,可作为五指毛桃根中氨基酸含量的测定方法,并可以用氨基酸含量来评价五指毛桃质量。     

PITC柱前衍生反相高效液相色谱法测定维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量

建立反相高效液相色谱法检测维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量的分析方法。维生素功能性饮料中的L-赖氨酸和牛磺酸通过苯异硫氰酸酯(PITC)柱前衍生,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯胺基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经RP-HPLC梯度洗脱后检测维生素功能饮料中L-赖氨酸盐酸盐和牛磺酸的含量。使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150mm 5-Micron),流动相A为0.1mol/L的乙酸钠溶液,流动相B为乙腈;流速为1.0mL/min;检测波长为254nm;柱温27℃;进样量20μL。牛磺酸和L-赖氨酸在线性范围内相关系数r0.999,回收率大于97.6,日内RSD分别为0.54%和0.46%(n=6)。结果表明本方法操作性强、灵敏度高,适用于维生素功能饮料中牛磺酸和L-赖氨酸的检测。     

超高效液相色谱法测定特殊医学用途婴儿配方食品中的19种游离氨基酸和牛磺酸

建立超高效液相色谱法同时测定特殊医学用途婴儿配方食品中19种游离氨基酸和牛磺酸的分析方法.样品经a-淀粉酶酶解,调pH值沉淀蛋白等杂质净化,采用6-氨基哇啉基-N-羟基-琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生试剂,以甲酸.甲酸铵缓冲液(20mmol/L,pH2.25)为流动相A、甲酸-甲酸铵缓冲液(20mmol/L,pH3.00...     

四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析

建立四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析方法,探讨不同配伍对氨基酸类指纹图谱的影响。采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生法,以精氨酸为参照物。色谱柱Kromasil C-18(250×4.6 mm×5μm);流动相A为乙腈,B为N,N-二甲基甲酰胺-0.025 mol/L醋酸钠(1:100,用36%乙酸调pH=6.0),梯度系统;柱温40℃;检测波长360 nm;流速1.0 mL/min;进样量10μL;分析时间70 min。结果共标出17个共有峰,鉴定出13种对人体有益的氨基酸成分。10批样品的相似度均大于0.97。对整方氨基酸指纹图谱的影响从大到小依次是当归、熟地黄、白芍、川芎。所建立的氨基酸类成分指纹图谱特征性强,可作为四物汤质量控制的手段之一,并可为中药复方配伍化学成分变化研究提供一定参考。     

柠檬酸提取贝肉中镉及其提取液中氨基酸组成分析

以马氏珠母贝匀浆液为原料,利用柠檬酸络合提取马氏珠母贝匀浆液中的重金属镉,考查柠檬酸溶液浓度、溶液pH、料液比和反应时间对镉提取率的影响,优化镉的提取条件,并分析提取液中氨基酸组成,通过化学评分和必需氨基酸指数对其蛋白质的营养价值进行评价。结果表明,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液中的镉具有很好的提取效果,在最佳提取条件下,即柠檬酸溶液的浓度为0.08mol/L、pH 4.0、料液比1∶10(m∶V)、提取时间4h,柠檬酸对马氏珠母贝匀浆液镉的提取率达到92.2%。马氏珠母贝肉脱镉后所得的柠檬酸提取液中总氨基酸含量为2 940mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为51.7%,蛋白质的EAAI为78.06;马氏珠母贝肉总氨基酸含量为13 120.0mg/100g,必需氨基酸占总氨基酸的百分含量为32.4%,蛋白质的EAAI为69.98,表明马氏珠母贝肉以及柠檬酸提取液均富含蛋白质、必需氨基酸,且必需氨基酸组成比较均衡。     

3种干燥方式对浙贝母淀粉结构与功能特性的影响

研究了不同干燥方式对浙贝母淀粉结构与功能特性的影响。采用真空冷冻干燥、热风干燥和红外热风干燥处理浙贝母鳞茎,用酶法提取淀粉,进行基本组分（水分、蛋白质、总淀粉、直链淀粉和支链淀粉）和理化性质（溶解度、膨胀度、冻融稳定性、透明度、凝沉性和老化值）测定,并进行SEM、LS粒度分布、FTIR、XRD、DSC分析。真空冷冻干燥组淀粉质量分数最高,对淀粉颗粒的损害最小,抗凝沉性最强;红外热风干燥组粒度体积与表面积占比最大,溶解度最低,凝沉性、结晶度最高,冻融稳定性最佳;3种干燥方式中淀粉膨胀度与透明度无显著差异,真空冷冻干燥更适合于浙贝母淀粉资源的利用与产品开发。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定新疆特色食品馕中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HCLP)测定新疆特色食品馕中17种氨基酸含量的检测方法。方法通过优化酸水解参数,并以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯为衍生试剂,用乙腈为流动相A,水为流动相B,磷酸盐缓冲液溶液为流动相C进行梯度洗脱,柱温37℃条件下用AccQ-Tag色谱柱(3.9 mm×150 mm, 4μm)进行分离,采用反相-高效液色谱法荧光检测器(激发波长250 nm、发射波长395 nm)进行测定。结果当取样量为100 mg、水解液加入体积为10 mL、水解温度为115℃、水解时间为24 h时,水解效果最好。17种氨基酸线性回归方程的相关系数在0.9985以上(n=3),检出限为0.011~0.058mg/L,回收率为81.6%~116.2%,相对标准偏差为0.41%~6.94%(n=3)。结论该方法操作简单、灵敏度高、线性关系和回收率好,适用于新疆特色食品馕中氨基酸含量的测定。