乳源锌螯合肽酶解制备及其螯合特性分析

为研究乳源锌螯合肽酶解制备最佳工艺条件及其螯合特性,从而为促锌吸收活性物质的研究提供基础,以牛乳酪蛋白为原料,以锌螯合率为指标,确定胰蛋白酶酶解制备锌螯合肽的最佳工艺条件,并对最优条件下酶解物的分子质量分布及氨基酸组成进行测定,同时通过傅里叶变换红外扫描和紫外扫描手段对酶解物和肽锌复合物进行结构表征对比分析。结果显示,最佳酶解条件为时间3 h,温度50℃,p H 8. 5,底物质量浓度为70 g/L,加酶量0. 6%(质量分数)。最佳条件下,酶解物的锌螯合率为87. 78%,分子肽分子质量小,人体必需氨基酸含量丰富。螯合前后光谱存在明显差异,Zn~(2+)与羧基等进行了配位结合。乳源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,实验结果为补锌剂的生产应用奠定了基础。     

复合氨基酸与锌的螯合研究

使用中性蛋白酶对鱼蛋白粉进行酶解,以酶解后得到的氨基酸与锌离子标准溶液螯合制备复合氨基酸锌,并对制备过程反应液的p H、摩尔比、反应时间等条件对螯合反应的影响进行了研究。结果表明:在反应液p H为6、氨基酸与锌的摩尔比为3∶1、反应时间为40 min,所得的螯合率为83.58%。并用红外光谱鉴定了产品。     

酶法制备花生源锌螯合肽工艺

分别采用碱性蛋白酶(alcalase)、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶对花生蛋白进行水解,结果表明,胰蛋白酶是制备花生源锌螯合肽的最佳水解酶。基于螯合率,对胰蛋白酶酶解花生蛋白工艺条件进行优化,通过正交试验确定最佳反应条件为:底物浓度3%、酶解温度50℃、pH 6、酶解时间2 h。在该条件下,螯合率为52.71%。研究表明花生源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,为新型补锌剂开发提供理论依据。     

紫菜酶解产物锌螯合-α-葡萄糖苷酶抑制剂活性肽的研究

研究紫菜酶解α-葡萄糖苷酶抑制活性肽与锌螯合反应的条件,并对锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽的胃肠消化稳定性进行评价。对条斑紫菜在一定条件下进行内切与外切蛋白酶的复合酶解获得具备α-葡萄糖苷酶高抑制活性的多肽,采用超滤纳滤双膜组合分离后旋转蒸发浓缩冻干,获得的多肽质量浓度为1 mg/mL时对0.5 mg/mL的α-葡萄糖苷酶抑制率达68%;利用α-葡萄糖苷酶抑制活性肽与锌溶液反应进行螯合条件优化,螯合的最佳条件为：时间1.5 h,pH 4.5,温度37 ℃,质量浓度6 mg/mL,得到的锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽溶液螯合度为25.6%,螯合后对α-葡萄糖苷酶抑制活性提高到79.8%;建立体外胃肠消化模型,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,评价制备的锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽的胃肠消化耐受性,结果表明：经过不同酶与底物比、时间胃消化后α-葡萄糖苷酶抑制活性下降均在7%左右,十二指肠消化后,抑制活性下降均在5%以内,具有良好的胃肠消化稳定活性。     

壳聚糖对锌离子和铜离子的吸附特性与比较研究

研究了壳聚糖对锌(Ⅱ)离子和铜(Ⅱ)离子的吸附动力学、吸附等温线及pH、壳聚糖脱乙酰度、温度等因素对壳聚糖吸附的影响。结果表明,壳聚糖对锌(Ⅱ)离子和铜(Ⅱ)离子的吸附行为符合Lang-muir模型,壳聚糖对锌(Ⅱ)离子和铜(Ⅱ)离子吸附规律均遵从单分子层吸附规律。温度、pH值和脱乙酰度对吸附量有显著影响,随温度的升高,壳聚糖对锌(Ⅱ)离子和铜(Ⅱ)离子吸附量增加;在pH2～6范围内,壳聚糖对锌(Ⅱ)离子和铜(Ⅱ)离子吸附随pH值的增大而增大;脱乙酰基程度高的吸附量较大。     

蓝圆鲹蛋白酶解物的螯合矿物离子活性研究

以蓝圆鲹为原料,采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对其进行水解,研究酶解产物与钙、亚铁、锌离子的螯合活性。结果表明:蓝圆鲹经胰蛋白酶水解,水解度为23.14%时其产物具有较高螯合铁、锌离子的活性,其螯合率分别高达96.63%和94.28%;蓝圆鲹经木瓜蛋白酶水解,水解度为22.00%时,其产物具有较高螯合钙离子的活性,其螯合率高达96.78%;同时研究表明上述两种酶解物还具有较好的抗氧化活性,其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼半抑制浓度值分别为3.74 mg/m L和3.64 mg/m L。此外,氨基酸分析表明蓝圆鲹高螯合矿物离子活性的酶解物中天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸含量较高。     

二次回归正交旋转组合优化罗非鱼下脚料酶解液螯合锌的工艺条件

以罗非鱼下脚料酶解液为原料,在单因素的基础上,用二次回归正交旋转组合方法优化其与硫酸锌的螯合条件,结果显示,在配位比2.70∶1、温度71.3℃、时间15min、pH6.86条件下,酶解液与硫酸锌的螯合率可达到87.56％ 各个因素对螯合率影响大小的顺序是:配位比＞pH＞温度＞时间.     

复合肽螯合锌有效螯合率测定方法研究—凝胶过滤色谱络合滴定法

本文通过模拟动物胃肠道内pH的环境来处理螯合物样品,使螯合物样品中的非络合态以及较小结合力的络合态金属元素以离子状态存在,再通过凝胶过滤法对螯合态和游离态的金属离子进行分离,测定各组分中金属元素的含量,即可计算出样品有效螯合率。具体测定方法为:样品溶解处理时pH调至3.0,离心后的上清液pH调回中性,上柱洗脱时碱性洗脱液为pH 9.0的Clark-lubs缓冲液,酸性洗脱液为pH 2.0HCl溶液。该方法得到的结果变异系数在2%2.5%之间,精密度较好。     

二次回归正交旋转组合优化罗非鱼下脚料酶解液螯合锌的工艺条件

以罗非鱼下脚料酶解液为原料,在单因素的基础上,用二次回归正交旋转组合方法优化其与硫酸锌的螯合条件,结果显示,在配位比2.70∶1、温度71.3℃、时间15min、pH6.86条件下,酶解液与硫酸锌的螯合率可达到87.56%。各个因素对螯合率影响大小的顺序是:配位比>pH>温度>时间。      

金属离子含量对酶脱墨效果的影响

研究了脱墨浆中添加Fe3 、Ca2 、Mg2 、Cu2 、Al3 、Mn2 、NH4 等离子的无机盐对酶脱墨效果的影响。结果表明,外加金属离子对酶脱墨效果均会产生不利影响,其中Al3 、Mg2 、Cu2 等对酶的脱墨行为有抑制作用,对纸浆中残余油墨含量的影响大小次序为Al3 >Mg2 >Cu2 ;Fe3 、Mn2 、Ca2 、NH4 对酶脱墨有催化或激活作用,外加金属离子促进酶脱墨作用的大小次序是Fe3 >Mn2 >Ca2 >NH4 ,但Fe3 对纸浆白度很不利。在Mn2 用量0.6%、NH4 用量0.2%、Ca2 用量1.2%时,会使酶脱墨效果得到改善。酶脱墨浆经过螯合剂处理,其白度和残余油墨含量都有很大改善,白度比未经螯合处理的酶脱墨浆高近10个百分点,残余油墨含量低60 mm2/g左右。     

锌对枸杞提取物抗氧化活性的影响

针对天然提取物单独使用时其抗氧化活性不及人工合成抗氧化物强的问题,以氯化锌、葡萄糖酸锌、乙酸锌为原料与65%乙醇为溶剂超声波法提取的枸杞提取物进行络合反应,制备成复合物,采用油脂氧化法、β-胡萝卜素漂白法、清除DPPH自由基以及清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)4种方法评价复合物和枸杞提取物的抗氧化活性,通过比较其抗氧化性,考察金属元素锌存在下对枸杞提取物抗氧化性能的影响。由于抗氧化机理的不同,锌离子的存在对枸杞提取物的抗氧化活性均有一定影响,其中乙酸锌与枸杞提取物络合产物(LZn2-AR)清除DPPH自由基、O2－ ·的能力最强,当络合物质量浓度为800mg/L时对DPPH自由基清除率可达85%,对O2－ ·清除率可达20%;葡萄糖酸锌与枸杞提取物络合物(LZn3-AR)的抗油脂氧化能力最强;氯化锌与枸杞提取物络合物具(LZn1-AR)有抗β-胡萝卜素氧化的能力;利用可见-紫外光谱分析可知,氯化锌、葡萄糖酸锌、乙酸锌与枸杞提取物制备成的络合物均出现新的吸收峰,表明均形成新物质。     

牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化及部分酶学性质

取新鲜牛肝,经匀浆、缓冲液抽提、正丁醇脱脂、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得了电泳纯的牛肝谷氨酸脱氢酶（glutamate dehydrogenase,GDH）。经过纯化后的结果：GDH的酶比活力为306.06 U/mg,纯化倍数为93.60 倍,酶活回收率为23.12%。GDH的分子质量为380.2 kD,亚基分子质量约为61.7 kD。酶学性质研究结果表明：GDH的最适反应温度为50 ℃,在温度为30 ℃以下时较稳定;最适反应pH值为8.2,该酶对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NADH）的Km值为0.696 mmol/L。甲醇、乙醇、异丙醇、Cd2+、Co2+、Ca2+、Ag+、Pb2+、Zn2+、Cu2+对该酶具有抑制作用,低浓度Ba2+、Mg2+、K+、Li+与乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA）对其具有一定的激活作用。     

牛肝醇提物体外抗氧化及对果蝇学习记忆行为的影响

本文研究了牛肝醇提物对羟基自由基(OH),超氧阴离子(02-)、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH·)的清除作用,结果表明牛肝醇提物具有明显的体外抗氧化活性.经果蝇的学习记忆性实验研究表明牛肝醇提物也具有增强果蝇学习记忆的功能.     

“鸡皮糙”山药过氧化物酶的酶学特性

对"鸡皮糙"山药中过氧化物酶(POD)酶学特性进行了较为系统的研究。结果表明,"鸡皮糙"山药过氧化物酶的最适pH为4.0,最适温度为35℃,在60℃以下有良好的稳定性;该酶与不同底物结合能力的强弱依次为:绿原酸>愈创木酚>焦性没食子酸>邻苯二酚>没食子酸;Ca2+、Fe2+、Ba2+、Mg2+对该酶有激活作用,K+、Mn2+、Na+对该酶有抑制作用;抗坏血酸、L-半胱氨酸、植酸、草酸、柠檬酸、EDTA-2Na、NaHSO3等褐变抑制剂对酶活力均有不同程度的抑制作用,其中抗坏血酸和L-半胱氨酸抑制效果最好。     

水溶性有机溶剂对鸡肝酯酶酶活力的影响

从新鲜鸡肝中提取出鸡肝酯酶,并研究水溶性有机溶剂对鸡肝酯酶酶活力的影响。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、乙二醇-甲醚、乙二醇-乙醚在低体积分数时对鸡肝酯酶酶活力有激活作用,高体积分数使其失活。乙二醇-甲醚能够较好的保持鸡肝酯酶活力,当体积分数达到50%时,相对酶活力仍保持93%。丙酮和1,4-二氧六环对鸡肝酯酶主要表现为失活作用,当体积分数达到10%时,相对酶活力低于80%。     

苏氨酸锌对糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用

目的：观察苏氨酸锌对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝脏的抗氧化性、肝功能等相关指标的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用尾静脉注射链脲佐菌素法复制糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病对照组,二甲基双胍阳性对照组,苏氨酸锌低、中、高剂量组,另设同龄大鼠为正常对照组。检测并比较各组肝脏匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肝脏指数以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总蛋白(TP)等指标。结果：高剂量的苏氨酸锌对糖尿病大鼠的MDA、NO、SOD、GSH-Px、肝脏指数等指标有显著性改善作用(P＜0.05),并对ALT、AST、 AST/ALT、TP有一定的改善作用。结论：苏氨酸锌对糖尿病大鼠肝脏氧化损伤、肝功能有一定的保护作用。     

榅桲果实中生物碱粗提物的抑菌作用研究

经过定性实验确定榅桲中含生物碱,用分光光度法测定榅桲果实总生物碱含量为1.2%。又对榅桲果实生物碱粗提物对几种常见菌株进行体外抑菌实验。结果表明,榅桲果实生物碱粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用,但对黑曲霉、根霉、青霉和酵母菌的抑制效果不太明显。     

改型斜发沸石去除废水中锌离子的研究

文章研究了天然斜发沸石对锌离子的去除效果,及其改型和吸附条件的影响.研究了初始浓度和流速对吸附的影响,以及温度对洗脱的影响.通过实验测定铵型斜发沸石对锌离子的平均交换容量为29.94 mmol/100 g沸石.用Langmuir吸附等温方程拟合了吸附等温数据,结果表明其具有很好的拟合精度.依据热力学平衡原理,计算出该过程的热力学参数,如焓、吉布斯自由能和熵变.研究表明铵型斜发沸石吸附锌离子的过程为自发的吸热反应,高温有利于铵型斜发沸石对锌离子的吸附.     

蓝莓酒泥粗提物的制备及其生物活性

采用超声波辅助酶法提取制备蓝莓酒泥粗提物,研究粗提物的制备工艺并分析粗提物的抗氧化性及其对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞生长的影响。通过单因素试验和正交试验优化制备工艺,检测粗提物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、•OH的清除能力,并通过四甲基偶氮唑蓝增殖实验、Hoechst33258荧光染色、流式细胞术研究其对HSC-T6细胞增殖与凋亡的影响。结果表明：制备蓝莓酒泥粗提物的最佳超声条件为超声功率500 W、料液比1∶20（g/mL）、超声时间50 min、提取温度60 ℃,在此条件下多糖和花色苷的提取量分别为14.24 mg/g和6.13 mg/g。所制备的蓝莓酒泥粗提物对DPPH自由基和•OH具有一定的清除效果,并可显著抑制HSC-T6细胞增殖、诱导HSC-T6细胞凋亡,且在一定的质量浓度范围内,呈现出剂量-时间效应关系,表明蓝莓酒泥粗提物具有良好的抗氧化活性,并对HSC-T6细胞生长具有明显的抑制作用,具有潜在的抗肝纤维化能力。通过诱导HSC-T6细胞凋亡是蓝莓酒泥粗提物抑制细胞生长的作用途径之一。     

锌离子在啤酒酿造中的作用与控制

啤酒中锌离子来源于麦芽、大米、酿造用水、酒花。Zn^2 在啤酒酿造过程中可起到催化荆作用，与氨基酸结合形成Zn-氨基酸螯合物。在啤酒酿造过程中，可激活酶提高酶的作用；促进糖化、发酵；促进蛋白质合成及其稳定性；缓解某金属离子的毒性作用，促进挥发物质的产生和双乙酰的还原，缩短发酵时间，提高啤酒质量；但含量过量会使啤酒非生物稳定性降低，影响啤酒质量。通过对糖化过程和发酵过程的控制，可降低醪液pH值。加入少量小麦芽，加入适量ZnCl2，ZnSO4及酵母营养盐等，可实现对Zn^2 的有效控制，达到最佳酿造浓度。