食品及临床样本中沙门菌多重耐药相关基因的研究

目的 了解从食品及临床样本中分离的沙门菌整合子以及产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌分布,以及不同耐药基因与多重耐药之间的关系。方法 利用K-B法进行产ESBL菌表型确证试验;通过聚合酶链式反应方法,对产超广谱β-内酰胺酶沙门菌相关耐药基因(bla_TEM、bla_SHV、bla_CTX)以及可移动元件—整合子基因进行扩增,对整合子可变区扩增产物进行基因测序,分析携带耐药基因盒。结果 共分离309株沙门菌,138株来自食品(禽类96株,生猪肉19株,水产品23株),171株来自临床样本。309株沙门菌耐药率达78.3%,多重耐药率达41.1%,其中禽类耐药率占比最高。共检出56株产ESBL菌,其中35株携带产ESBL菌相关耐药基因(bla _TEM基因型15株,bla_CTX基因型10株,bla _TEM与bla _CTX双基因型10株),未检出bla _SHV基因。检出98株Ⅰ类整合子阳性菌,阳性率为31.7%。其中54株携带...     

2021年贵州省食源性疾病主动监测分离沙门菌耐药及分型特征

目的 了解2021年贵州省食源性疾病主动监测分离沙门菌的血清型、耐药和分子分型特征。方法 对全省2021年食源性疾病主动监测腹泻病例中分离的164株沙门菌采用玻片凝集法进行血清学分型,采用微量肉汤稀释法测定菌株对14种抗生素的最小抑菌浓度（MIC）值,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型。结果 164株沙门菌可分为25种血清型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌（76,46.34%）、肠炎沙门菌（25,15.24%）和爪哇安纳沙门菌（15,9.15%）。164株沙门菌耐药率为100%,多重耐药率达86.59%;其中对氨苄西林、四环素和萘啶酸耐药率较高,分别为95.12%（156/164）、78.05%（128/164）和63.41%（104/164）。72株鼠伤寒沙门菌PFGE聚类分析后共分为58种指纹图谱,24株肠炎沙门菌有12种指纹图谱,15株爪哇安纳沙门菌有3种指纹图谱。结论 贵州省腹泻患者沙门菌血清型种类较多,多重耐药现象严重,PFGE指纹图谱表现出遗传多样性。应加强对沙门菌的耐药监测,尤其是优势血清型鼠伤寒沙门菌的临床用药。     

2017—2020年江苏省无锡市沙门菌的血清型与耐药性研究

目的 分析2017—2020年江苏省无锡市沙门菌报告病例的血清型特点和抗生素耐药性流行特征及变化趋势。方法 收集分离自 2017—2020年无锡市食源性疾病哨点监测医院腹泻病例（住院和门诊患者）标本中的216株沙门菌菌株,采用玻片凝集法对216株菌进行血清型鉴定及分析,并采用微量肉汤稀释法检测沙门菌对13种抗生素的药物敏感性。结果 216株沙门菌分为42种血清型,优势血清型分别为肠炎沙门菌28.70%（62/216）占比,鼠伤寒沙门菌26.39%（57/216）。耐药性分析结果显示,216株沙门菌对美洛培南、阿米卡星、阿奇霉素和头孢他啶高度敏感,高敏菌株占比均高于90%;所有沙门菌对氨苄西林的耐药率最高,达到68.06%,对美洛培南的耐药率最低,仅0.46%;沙门菌在2017—2020年对氨苄西林的耐药率呈逐年增高的趋势,且每年沙门菌分离株对氨苄西林耐药性最高;共130株菌株产生了多重耐药性（60.19%）,耐药菌株数最多的耐药谱为AMP-TET-STR,占比5.56%（12/216）,优势耐药谱不明显。结论 无锡市沙门菌的流行血清型以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,且沙门菌耐药性形势严峻,应该尽快建立高效的管控机制, 加强药敏监测, 优化治疗方案, 避免抗生素滥用。     

2021年广西腹泻病人来源的鼠伤寒沙门菌及其单相变种比较分析

目的 通过研究比较2021年广西壮族自治区腹泻病人来源的鼠伤寒沙门菌及其单相变体1，4，［5］，12∶i∶-（S.1，4，［5］，12∶i∶-）流行特征与耐药情况，更好地了解鼠伤寒沙门菌及其单相变体多重耐药克隆的流行病学及其在传播的潜力。方法 对来自病例监测分离的276株鼠伤寒沙门菌用血清凝集方法进行第一次分型，当第二项鞭毛抗原诱导三次后依然不凝集，再用多重PCR的方法进行第二次分型，用微量肉汤稀释法进行药敏试验。结果 经多重PCR确认为鼠伤寒沙门菌单相变体的有201株（72.8%），鼠伤寒沙门菌75株。鼠伤寒沙门菌对磺胺类药物、氯霉素的耐药率显著高于鼠伤寒沙门菌单相变体（P<0.05）。鼠伤寒沙门菌单相变体对氨苄西林、头孢噻肟、萘啶酸、庆大霉素、四环素5种抗生素的耐药率显著高于鼠伤寒沙门菌（P<0.05）。两种沙门菌对3类及以上抗生素耐药率达到79%以上，共同多重优势耐药谱为耐氨苄西林、氯霉素、甲氧苄啶/磺胺甲唑和四环素。结论 鼠伤寒沙门菌单相变体已经超过鼠伤寒沙门菌成为广西壮族自治区腹泻病人中最优势的血清型。两种沙门菌耐药情况不容乐观，特别是多重耐药菌株的快速增加。需要有针对性地加强对食源性鼠伤寒沙门菌和鼠伤寒沙门菌单相变体进行耐药监测，揭示其耐药性的潜在决定因素，并展开有效的干预措施。     

北京市批发市场鸡肉中沙门菌血清型和耐药特征研究

目的 了解北京市批发市场零售鸡肉中沙门菌分离株的血清型分布和耐药性特征。方法 针对2014—2015年北京市丰台区3个大型批发市场零售鸡肉中分离的135株沙门菌,使用Luminex血清分型试剂盒和传统血清凝集方法进行血清学鉴定,按照Enterobase数据库推荐条件进行多位点序列分型,采用药敏鉴定板测定菌株对12类25种抗菌药物的敏感性,使用PCR方法检测10种可移动黏菌素耐药基因（mcr）和3种NDM型碳青霉烯酶基因（blaNDM）的携带情况。结果135株沙门菌共检出6种血清群,D1和B为主要血清群;20种血清型,Enteritidis、Indiana和Thompson为优势血清型,占比分别为50.4%、15.6%和8.1%;21种ST型,血清型与ST型具有较好对应。91.9%的菌株为耐药株,菌株对萘啶酸、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和四环素4种药物耐药率最高,多重耐药菌株占全部菌株的71.1%,最高可对10类18种抗菌药物耐药;对8类及以上药物耐药的17株菌株中,16株为Indiana血清型;不同包装方式、不同季节和不同批发市场来源菌株,高重耐药菌株占比具有一定差别。所有菌株均为mc...     

赣州市食源性腹泻患者分离沙门菌耐药性和分子分型特征研究

目的 了解赣州市食源性沙门菌耐药性和分子分型特征,建立赣州市食源性沙门菌耐药性和分子指纹图谱数据库,为临床合理用药和食源性沙门菌病的暴发溯源提供科学依据。方法 对赣州市2020—2022年食源性疾病主动监测中分离的136株沙门菌进行血清分型、药物敏感性试验、全基因组测序（WGS）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）,并进行耐药基因注释和图谱聚类分析。结果 赣州市食源性沙门菌对STR耐药率最高（83.09%）,其次为TET（78.68%）和AMP（76.47%）;多重耐药菌株占76.47%,耐药谱型广泛,主要流行耐药谱型为AMP-TET-CHL-STR-SXT;WGS预测出7种类别共61种耐药基因,以氨基糖苷类耐药基因携带率（99.19%）最高,大环内酯类（8.87%）最低;136株沙门菌以鼠伤寒变种和鼠伤寒为优势血清型,经PFGE分子分型分为98种带型。结论 赣州市食源性沙门菌耐药状况严重,耐药基因携带率高且基因型多样,PFGE分子型别呈多态性,优势血清型别可能引起暴发流行,应加强监测和研究。     

2016—2020年辽宁省沙门菌耐药性及分子分型研究

目的 分析辽宁省2016—2020年食源性疾病监测中沙门菌分离株的耐药情况及分子分型特征,为沙门菌引起感染性腹泻的防控、临床抗生素使用提供可靠科学依据。方法 对辽宁省2016—2020年临床腹泻病例分离的90株沙门菌进行血清学鉴定,应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型,采用BioNumeries 7.6软件对菌株间的相似度进行聚类分析,采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性检测。结果 90株沙门菌分为13种血清型,以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主。PFGE聚类分析得到54种带型,各带型间相似度为51.4%～100%,每种带型包含1～10株菌,同一血清型菌株的PFGE带型相似度较高,且存在多次聚集现象。药敏结果显示90株沙门菌呈现36种耐药谱,氨苄西林耐药率最高（66.7%,60/90）,其次为萘啶酸（62.2%,56/90）,头孢西丁全部敏感。多重耐药率达48.9%(44/90),其中鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌多重耐药率分别为87.5%和45.8%。结论 辽宁省沙门菌引起腹泻病例呈散发态势,菌株多重耐药趋势明显,且耐药率较高,耐药谱广泛,应进一步加强分子溯源及耐药性监测。     

2006—2021年温州地区沙门菌感染流行病学特征分析

目的 分析2006—2021年温州地区沙门菌感染流行病学特征,为沙门菌感染的防控提供科学依据。方法 对沙门菌进行鉴定确认和血清学分型,并对流行病学特征进行深入分析。结果 2006—2021年在温州地区42 300份食源性疾病腹泻患者中,共分离出沙门菌1 232株,总分离率为2.91%,共鉴定出90个血清型（14个血清群）,其中菌群以O：4（B）、O：9（D1）、O：3,10（E1）、O：8（C2-C3）、O：7（C1）为主;血清型以鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伦敦沙门菌和德尔卑沙门菌为主;18～60岁、61岁以上和小于２岁婴幼儿是感染的主要人群;春、夏、秋季易感,具有明显的季节性;5～11月是食源性沙门菌检出的高峰期。结论 温州地区沙门菌感染在季节分布、人群分布等方面具有明显的流行病学特征,应该继续加强食源性疾病监测,进一步提高食品安全隐患的早期识别、预警与防控能力。     

一种基于PCR技术的沙门氏菌血清分型试剂盒与传统血清分型方法比较

目的 评估一种基于PCR技术的沙门氏菌快速血清分型试剂盒效用,并与传统血清学分型鉴定方法进行对比,为研究人员提供一种更高效、简便的沙门氏菌血清学鉴定分型方法。方法 从本实验室菌株库中选取59株沙门氏菌,分别采用沙门氏菌血清分型PCR试剂盒和传统血清凝集法对所有菌株进行分型鉴定,比对两种分型方法的符合率。结果 59株沙门氏菌均通过传统血清凝集方法完成分型,分型率100%。59株菌株均通过沙门氏菌血清分型PCR试剂盒成功分型,分型率100%,两种方法鉴定沙门血清型符合率100%。结论 沙门氏菌血清分型PCR试剂盒能达到较高的分型率,大大缩短检测时间,减少常规血清分型的工作量及昂贵的血清消耗,节约成本,可以作为一种沙门氏菌快速血清分型方法进行应用。     

Antimicrobial resistant genes associated with Salmonella from retail meats and street foods

We examined the antimicrobial resistance of Salmonella isolates from 300 meat products (raw beef, chicken meat and street foods). A total of 88 non-duplicate Salmonella from 66 (22.0%) retail meat and 22 (7.5%) street food samples were recovered and 11 serovars were identified. Among the 88 Salmonella isolates, the highest resistance was to tetracycline (73.8%), followed by sulfonamide (63.6%), streptomycin (57.9%), nalidixic acid (44.3%), trimethoprim–sulfamethoxazole (19.3%), ampicillin (17.0%), chloramphenicol (10.2%), cephalotin (8.0%), kanamycin (6.8%), ciprofloxacin (2.2%) gentamycin (2.2%), cefoxitin (2.2%), amoxicillin–clavulanate (1.0%) and amikacin (1.0%). Sixty-seven percent of the isolates (59/88) were multidrug resistant (MDR). Ten out of 17 resistance genes (bla_TEM-1, strA, strB, aadA, sulI, sulII, tetA, tetB, floR, cmlA) were detected. Twelve of the 59 MDR Salmonella isolates from serovars Typhimurium (6), Newport (3), Agona (1), Albany (1) and Weltevreden (1) had class 1 integrons. The gene cassettes identified were dfrA1, dfrV, dfrA12, aadA2, sul1 genes and an open reading frame orfC of unknown function. Four integron-positive isolates could transfer resistance phenotypes to the recipient strain, E. coli J53 via conjugation. These data revealed that the Salmonella isolates recovered from the retail meats and cooked street foods were resistant to multiple antimicrobials, which can be transmitted to humans through food products. The occurrence of mobile genetic elements such as integrons reiterates the roles of food of animal origins as a reservoir of MDR Salmonella.     

2015—2021年湖州市食品中沙门菌污染与分子分型研究

目的 了解湖州市市售食品中沙门菌的污染状况,为预防与控制食源性疾病的发生提供依据。方法 采集2015—2021年5类1 463份样品按照GB 4789.4—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》对沙门菌进行检验,对分离到的沙门菌进行血清分型、抗生素敏感试验和脉冲场凝胶电泳分子分型（PFGE）检测,结果用Excel、SPSS 19.0进行统计分析。结果 2015—2021年共检测5类1 463份食品样品,检出沙门菌菌株47株,总检出率为3.21%(47/1 463)。不同食品类别中生畜肉检出率最高,为6.61%(23/348)。共检出19种血清型的沙门菌,其中优势血清型为鼠伤寒沙门菌。不同食品中检出的沙门菌血清型有差别。对2019—2021年分离到的20株沙门菌进行药敏试验和PFGE检测,结果显示分离株对氨苄西林和四环素耐药性较强,耐药率分别为70%(14/20)和60%(12/20)。分子分型显示,经Xba I酶切后,19株沙门菌产生11个PFGE带型,多态性较高。结论 2015—2021年湖州市市售5类食品中均有检出沙门菌,其中两类为即食食品（中式凉拌菜和散装熟肉制...     

Molecular characterization and antibiotic resistance profiling of Campylobacter isolated from cattle in Polish slaughterhouses

A total of 812 samples from bovine hides and the corresponding carcasses collected at the slaughterhouse level in the eastern part of Poland were examined for the presence of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli. Recovered isolates were confirmed using species-specific PCR, characterized by the presence of 11 putative virulence genes and antimicrobial susceptibility was determined using a microbroth dilution method. Furthermore, the genotypic relatedness of the isolates was determined by PFGE profiling and virulence pattern cluster analysis. The prevalence of Campylobacter was 25.6% and 2.7% in bovine hide and carcass samples, respectively. The presence of virulence markers varied between C. jejuni and C. coli species however, the majority of strains possessed the cadF, flhA, flaA genes, irrespective of the bacterial species and origin. The lower number of the strains was positive for the invasive associated markers – virB11 and wlaN. Antibiotic profiling showed that campylobacters were most frequently resistant to quinolones and fluoroquinolones (nalidixic acid and ciprofloxacin, 38.3% of each, respectively) followed by streptomycin (24.3%) and tetracycline (20.9%). Resistance to erythromycin and gentamicin was demonstrated in 4.3% and 2.6% of strains, respectively. Comparisons of the PFGE and virulence marker profiles of the isolates reflected the high genetic diversity of Campylobacter tested. Moreover, a poor correlation between the PFGE type, pathogenic gene marker and antimicrobial resistance patterns was observed.     

Prevalence and antimicrobial resistance of Salmonella in retail foods in northern China

A total of 387 retail meat, seafood and milk powder samples were collected from nine cities in northern China in 2005 and screened for the presence of Salmonella. Salmonella strains isolated were subjected to serotyping and antimicrobial susceptibility testing. Salmonella was isolated from 81 (20.9%, 81/387) samples and classified into 23 serotypes. The isolates were frequently resistant to sulfamethoxazole (86.4%), sulfamethoxazole/trimethoprim (48.1%), nalidixic acid (30.9%), tetracycline (19.8%), carboxybenzylpenicillin (17.3%), amoxicillin (17.3%) and ampicillin (16.0%). The multiple resistance (resistance to ≥ 3 antibiotics) was found in 29.6% (n = 24) isolates. Additionally, 4 isolates from chicken displayed the ACSSuTNx profile, resistant to ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, sulfonamide, tetracycline and nalidixic acid, in particular, strain HBS084 showing the resistance to as many as 20 antibiotics. Salmonella from chicken showed the higher frequency of antimicrobial resistance. Our findings indicate that in northern China food products of animal origin can be a source of exposure for consumers to multiresistant Salmonella strains.     

奶粉中沙门菌的检测能力验证研究

目的 通过组织实施奶粉中沙门菌的能力验证,对国内实验室的沙门菌检测能力进行分析和评价。方法 采用人工污染的方式制备奶粉中沙门菌能力验证样品,即菌种复苏、增菌后配制成菌悬液加入配制好的复原牛乳中混匀分装,进行冷冻干燥;对制备好的样品进行均匀性检验和稳定性检验。本次能力验证设计3组不同的能力验证样品,每个实验室随机发送2个样品,将各参加实验室提交的检测结果与指定值比较,评定各参加实验室的测试结果为满意或不满意（假阴性或假阳性）。结果 全国共337家实验室参加该项沙门菌的检测能力验证,有满意结果的实验室323家,满意率为95.8%,有不满意（假阴性和假阳性）结果的实验室14家,占比为4.2%。共向实验室发送674个样品,658个结果满意,满意率为97.6%;16个样品结果不满意（假阴性或假阳性）,占比为2.4%。结论 采用不同组别的样品随机编号且随机发样的方式,取得了良好的考核效果;本次人工污染方式制备的能力验证样品,充分考虑了目标菌、类似干扰菌和背景菌,制备的样品与实际样品一致性较好,考核效果良好。能力验证评价结果表明,全国参加考核的实验室奶粉中沙门菌检测能力总体较好,少部分实验室的检测能...     

Inhibition of Salmonella Enteritidis by cerein 8A, EDTA and sodium lactate

The ability of the bacteriocin cerein 8A to inhibit Salmonella Enteritidis in combination with EDTA and sodium lactate was investigated. Salmonella Enteritidis was incubated with combinations of cerein 8A (3200 AU/mL) and EDTA (20, 50, 100 mmol/L) or sodium lactate (200 mmol/L). All treatments caused a significant reduction in the OD₆₀₀ values of Salmonella Enteritidis cultures. The addition of cerein 8A plus EDTA resulted in higher inhibition in comparison with the bacteriocin alone; the greater the concentration of EDTA, the greater the inhibitory effect. The combination of cerein 8A plus 100 mmol/L EDTA results in a more efficient treatment to reduce the number of viable cells of Salmonella Enteritidis. The combination of cerein 8A plus sodium lactate also showed significant inhibition of the indicator organism. Transmission electron microscopy showed damaged cell walls and loss of protoplasmic material in treated cells. The cells of Salmonella Enteritidis treated with cerein 8A plus EDTA appeared more injured. The bacteriocin cerein 8A may be useful to inhibit Gram-negative bacteria, with enhanced effect in combination with chelating agents. Control of Salmonella Enteritidis, a Gram-negative bacterium constantly linked to food outbreaks, addresses an important aspect of food safety.     

实时荧光PCR检测弯曲菌感染病例的粪便和肛拭子样本

目的 通过对3起弯曲菌暴发事件中粪便和肛拭子样本采用实时荧光PCR和培养法检测结果的比较,为实验室快速有效地应对此类事件奠定基础。方法 收集3起弯曲菌感染暴发事件中病例的生物样本;使用过滤培养法进行弯曲菌培养检测,分别使用原始样本、增菌24 h和增菌48 h样本提取DNA进行弯曲菌实时荧光PCR检测;使用Kappa检验对实时荧光PCR检测结果和培养法结果进行一致性分析。结果 原始样本、增菌24 h和增菌48 h实时荧光PCR检测灵敏度分别为90.91%、97.22%和100%,特异度分别为75.00%、84.00%和78.95%,与培养法结果一致性分析的Kappa值分别为0.643、0.813和0.785。结论 实时荧光PCR检测与培养法结合使用是弯曲菌暴发事件处置的有效实验室检测方法。     

快速检测技术在食源性沙门氏菌检测中的应用研究进展

沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的食源性致病菌,能导致人食物中毒,引发胃肠炎、败血症等疾病,严重时危及生命。建立快速、准确的沙门氏菌检测方法是预防和控制沙门氏菌疾病的关键,发展快速灵敏的检测方法对于保障食品质量与安全具有重要意义。本文通过对免疫学检测技术、分子生物学技术和生物传感器检测技术等在食源性沙门氏菌的检测方面的应用进行综合分析,阐明各种食源性沙门氏菌快速检测技术的原理、优缺点及研究进展,为优化食源性沙门氏菌快速检测方法提供参考。     

沙门菌分子血清分型的鉴定方法与研究进展

综述沙门菌分子血清分型的鉴定方法与研究进展。介绍了沙门菌编码3种抗原（O、H、Vi）的相关基因及其表达机制,阐述了以血清型特异性标记基因为靶点进行沙门菌分子血清分型鉴定的方法及应用进展。本文回顾了沙门菌血清分型的鉴定方法及研究进展,为进一步开展沙门菌分子血清型鉴定研究奠定了基础。     

Evaluation of the effect of defrosting practices of ground beef on the heat tolerance of Listeria monocytogenes and Salmonella Enteritidis

The effect of common defrosting practices of ground beef, including (i) defrosting in the refrigerator (5 °C for 15 h), (ii) defrosting at room temperature (25 °C for 12 h) and (iii) defrosting in the microwave, on the heat tolerance of artificially inoculated Listeria monocytogenes and Salmonella Enteritidis, was studied. The thermal inactivation of S. Enteritidis was not, overall, affected by defrosting practices. In contrast, defrosting at room temperature resulted, overall, in an increased heat tolerance of L. monocytogenes compared to the rest tested defrosting practices. Inactivation kinetics of the two pathogens for the different defrosting practices were determined by fitting the data to the Weibull model. The δ parameter of the Weibull model (heat challenge time (min) required for the first 1-log reduction) for S. Enteritidis and for defrosting at 25 °C, microwave defrosting, defrosting at 5 °C and for the control (fresh ground beef inoculated with the pathogens just before the heat challenge trials) was 1.13, 1.62, 1.60 and 0.96, respectively, while the corresponding values for L. monocytogenes were 20.13, 10.82, 9.95 and 9.47, respectively. The findings of this study should be useful in risk assessments and in developing food handling guidelines for the consumers.     

2015—2020年宜宾市肉类食品沙门菌血清型及分子分型研究

目的 研究宜宾市肉类食品中沙门菌分离株的血清型和分子分型特征,分析沙门菌污染的危险因素。方法 收集2015—2020年宜宾市辖区(县)肉类食品沙门菌分离株29株,进行血清型鉴定和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型分析,并就地域、物种来源和售卖方式对沙门菌血清群检出构成比的影响进行多因素Logistic回归分析。结果 29株沙门菌分离株共检出14种血清型(分属4个群),主要优势血清型为鼠伤寒沙门菌、吉韦沙门菌和肠炎沙门菌。聚类分析显示PFGE分子分型为18种带型。肠炎沙门菌带型相似度100%,来自同一传染链;吉韦沙门菌有2种带型,鼠伤寒沙门菌有4种带型,相似度较差;多因素Logistic分析显示,影响D群沙门菌检出的主要危险因素为地域分布(OR=1.053,P<0.05);影响E群沙门菌检出的主要危险因素为物种来源(OR=3.887,P<0.05)和地域分布(OR=1.227,P<0.05)。结论 监管部门应从家禽养殖地地域来源和肉类物种来源两个方面加强宜宾市肉类食品安全监督。