纺织品中白假丝酵母菌快速鉴定方法的研究

探讨一种快速、准确鉴定纺织品中白假丝酵母菌的方法。采用荧光定量PCR技术结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术,检测人工污染样品和自然污染样品中白假丝酵母菌。试验表明:4种常见假丝酵母菌均能特异性扩增,而其他几种非假丝酵母菌均未见特异扩增,该方法灵敏度可达40 CFU/mL;与传统检测方法相比,检测结果完全一致,而检测效率提高了3倍。认为:该方法将两种成熟应用的技术相结合,可操作性强,便于推广应用,能够快速、准确鉴定白假丝酵母菌。     

3种方法鉴定鸡肉粉中沙门氏菌的比对研究

目的采用3种方法对鸡肉粉中沙门氏菌进行检测。方法3份样品的前处理依据组织方提供的《作业指导书》进行,每瓶样品直接加入4.5 mL灭菌去离子水复溶,作为初始样本,后续实验依据GB4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》操作。鉴定分离出疑似菌后,加入了实时荧光定量PCR法、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法2种方法作为辅助检测,并用全自动微生物鉴定系统进行生化鉴定,再结合生化鉴定与血清学实验综合评判检测结果。结果使用3种鉴定方法在JS015、JS110、JS140样本中均检出沙门氏菌。结论本研究采用的实时荧光定量PCR法、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法2种方法均能快速准确鉴定出沙门菌,特别是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法和血清学分型配合使用,对沙门菌的快速鉴定有重要意义。     

西藏传统发酵牦牛酸奶中乳酒假丝酵母的分离鉴定与系统发育学分析

目的开发西藏传统发酵牦牛酸奶的微生物种质资源。方法对拉萨周边牧场的10份传统发酵牦牛酸奶样品进行乳酸菌的分离过程中得到6株酵母菌,通过常规形态特征、生化和基质解吸电离飞行时间质谱法(matrix desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)进行鉴定,对其质谱标识峰进行蛋白质水平同源性分析,采用ITS序列对其进行基因学比对。结果经生化和质谱鉴定分离的6株酵母为乳酒假丝酵母,分离酵母和已知乳酒假丝酵母通过ITS序列在GENEBANK比结果为命名有差异为马克斯克鲁维酵母,但乳酒假丝酵母可认定为其无性型变种。蛋白质同源分析结果表明6株分离菌与已知乳酒假丝酵母在蛋白质水平有一定差异,收集到其特征性蛋白质片段的标识峰12组。结论乳酒假丝酵母的分离与研究为西藏传统发酵牦牛酸奶中酵母菌的开发提供理论支撑。     

一种快速检测纺织品中沙门氏菌的方法

探讨纺织品中快速检测沙门氏菌的方法。应用了环介导等温扩增技术结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立纺织品中沙门氏菌的快速检测方法。沙门氏菌invA基因序列具有致病性菌株属特异性,根据其特点设计出一套沙门氏菌环介导等温引物。环介导等温扩增结果为可疑或阳性时,分离菌株,通过基质辅助技术快速鉴定结果。选择典型参考菌株做特异性试验;沙门氏菌菌液稀释成不同梯度做灵敏度试验。试验结果表明:该方法特异性好,灵敏度较高,检测限可达4.6CFU/mL。认为:该方法可用于快速检测纺织品中沙门氏菌。     

质谱法测定4种真菌毒素与载体蛋白偶联物的结合比

采用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOFMS)对由3种真菌毒素伏马菌素B1(FB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与两种载体蛋白卵清白蛋白(OVA)、血清白蛋白(BSA)分别偶联制备得到的4种小分子-载体蛋白偶联物FB1-OVA、FB1-BSA、OTA-BSA、DON-OVA的偶联结合比进行测定,并与紫外吸收光谱法进行比较。基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱法测得偶联物FB1-OVA、FB1-BSA、OTA-BSA、DON-OVA的结合比分别为5:1、11:1、3:1、0;紫外吸收光谱法测得OTA-BSA的结合比为4.4:1,DON-OVA的结合比为3.4:1,无法测定FB1-OVA、FB1-BSA结合比。     

沙门氏菌MALDI-TOF-MS检测方法的建立

建立利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对食品中沙门氏菌的快速检测方法.从食品中分离出可疑沙门氏菌,利用不同培养基分离纯化,通过MAIDI-TDF-MS法进行鉴定,并与其他检测方法比较.MALDI-TOF-MS对野生沙门氏菌株的鉴定结果与传统鉴定结果一致,说明本试验建立的方法对于沙门氏菌的鉴...     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在食源性致病菌鉴定中的研究进展

;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)具有高效、准确、检测速度快等优点。作为近年来发展的新型食源性致病菌鉴定技术,MALDI-TOF MS为食品病原微生物靶标性监测和食品安全事件应急检验提供了一种高效的鉴别技术参考。本文检索了近年来国内外MALDI-TOF MS技术在食源性致病菌检测中的相关研究,综述基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测原理及具体案例,在此基础上分别从参考菌株数据库建设、标准化程序规范等方面对MALDI-TOF MS在食源性致病菌检测领域的研究方向进行展望,以期为后续食品安全检测及快速监管提供技术支持。     

FAPAS乳粉中单核细胞增生李斯特菌能力验证结果分析与讨论

为了提升食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力,本实验室参加了FAPAS分析实验室能力验证机构组织的实验室能力验证,分别运用国标方法、分子生物学方法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对样品进行检测鉴定。结果表明,M224d02-A样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,M224d02-B样品检出英诺克李斯特菌,属于李斯特氏菌属。2个样品检验结果均取得满意结果。     

MALDI-TOF MS技术在肉品研究中的应用

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种新颖的质谱技术,其在生物大分子检测、微生物筛选鉴别等方面得到了广泛的应用。该技术可对肉制品中的蛋白、多肽等物质进行鉴定,并可从分子层面探讨肉在不同外界条件下品质变化的机理,故其在肉品科学研究中具有广阔的应用前景。介绍基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的基本原理,综述其在肉品品质分析等方面的应用,并对该技术在未来肉品科学研究中的前景进行了展望。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测与鉴定食品真菌的研究

目的对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测与鉴定常见食品真菌进行探索。方法对MALDI-TOF-MS检测食品真菌所用基质、基质与样品比例、上样方法等进行筛选,获得优化的实验条件,并对方法的重现性和实际应用进行研究。结果MALDI-TOF-MS分析不同属真菌所需的最适基质各异,红曲霉属与镰孢菌属最适基质均是MBT;曲霉属、青霉属与酵母菌的最适基质均是IAA;上样的最适基质/样品比例为1∶1;混合液滴干燥法为最佳上样方法。结论MALDI-TOF-MS直接分析真菌的方法稳定、重现性好。