蛤蟆油水溶性总蛋白对小鼠耐缺氧及抗氧化能力的影响

目的:研究蛤蟆油水溶性总蛋白对小鼠耐缺氧和抗氧化能力的影响。方法:记录小鼠在常压耐缺氧、亚硝酸中毒、急性脑缺血性缺氧实验中的存活时间,测定过氧化损伤模型中小鼠肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化。结果:蛤蟆油水溶性总蛋白可明显地延长亚硝酸中毒、急型脑缺血性缺氧所致小鼠存活时间,对小鼠常压耐缺氧的存活时间无明显的影响。蛤蟆油水溶性总蛋白能显著降低肝脏和血液中丙二醛(MDA)含量,提高肝脏和血液中超氧化物歧化酶(SOD)的活力。结论:说明了蛤蟆油水溶性总蛋白具有耐缺氧和抗氧化的作用。     

蛤蟆油非水溶性成分酶解物药理活性研究

目的:研究蛤蟆油非水溶性成分酶解物的抗疲劳、耐缺氧及降血脂作用。方法:测定小鼠体重、负重游泳时间、血乳酸含量(LAC)及常压耐缺氧时间;酶法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量等指标。结果:蛤蟆油非水溶性成分酶解物能显著延长受试小鼠常压缺氧下存活时间及负重游泳时间,显著降低其血乳酸含量(P<0.05);能显著降低大鼠TC、TG含量(P<0.05)。结论:蛤蟆油非水溶性成分酶解物具有抗疲劳、耐缺氧及降血脂的作用。     

哈蟆油水溶性总蛋白抗疲劳活性的研究

研究了哈蟆油水溶性总蛋白的抗疲劳药理活性。采用中性缓冲液浸提,硫酸铵沉淀法制备哈蟆油水溶性总蛋白。设立哈蟆油水溶性总蛋白低、中、高三个剂量组(0.075、0.15、0.30g/kg),同时设立空白对照组,小鼠灌胃给药30d。观察小鼠体重、负重游泳时间、尿素氮含量、肝糖原含量、血乳酸含量等指标的变化。实验结果表明,哈蟆油水溶性总蛋白可延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量,显著增加肝糖原含量,显著降低血乳酸含量,对小鼠的体重无明显影响。证明了哈蟆油水溶性总蛋白具有一定的抗疲劳作用。      

哈蟆油降血脂、耐缺氧和抗疲劳的功能研究

研究哈蟆油降血脂、耐缺氧和抗疲劳功能。运用酶法测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;观察小鼠常压耐缺氧存活时间及负重游泳时间,测定小鼠血乳酸含量。结果显示哈蟆油能显著降低大鼠TC和TG的含量;显著延长小鼠常压缺氧存活时间及负重游泳时间,显著降低其血乳酸含量。说明哈蟆油具有辅助降血脂、抗疲劳和耐缺氧功能。     

哈蟆油非水溶性成分酶解前后耐缺氧活性研究

比较研究哈蟆油非水溶性成分酶解前后的耐缺氧作用。设立哈蟆油非水溶性成分及其酶解物的低、中、高剂量组和空白对照组,连续灌胃30 d。测定小鼠的常压耐缺氧时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性缺氧存活时间。结果表明:与对照组比较,酶解前各剂量组的常压耐缺氧时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性缺氧存活时间均无显著性差异;酶解后各剂量组常压耐缺氧时间具有显著性差异,中、高剂量组亚硝酸钠中毒存活时间具有显著性差异,中剂量组急性脑缺血性缺氧存活时间具有显著性差异。哈蟆油非水溶性成分无耐缺氧作用,酶解后产物具有显著的耐缺氧作用。     

哈蟆油总蛋白提取工艺

确定哈蟆油主要有效成分哈蟆油蛋白的最佳提取工艺.以蛋白含量为评价指标,采用单因素考察法,筛选出最佳提取条件.哈蟆油蛋白的最佳提取工艺为:浸提液的pH值为6.5,料液比1:200,浸提时间12 h,浸提次数3次,浸提液含盐0.5mol/L.验证试验结果表明,最终哈蟆油总蛋白收率为41.27%.     

变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度影响的研究

研究了变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度的影响,以蛤蟆油粘度为评价指标,考察不同浓度的尿素、盐酸胍、β-巯基乙醇、SDS、Triton等变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度的影响。实验结果表明,当尿素、盐酸胍、β-巯基乙醇、Triton、SDS浓度分别为7mol/L、0.2mol/L、3%、2g/mL及8%时,具有最低粘度,其中盐酸胍的作用效果最佳。实验结果为进一步研究其有效成分、提取分离方法及药理活性奠定了基础。      

变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度影响的研究

研究了变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度的影响,以蛤蟆油粘度为评价指标,考察不同浓度的尿素、盐酸胍、β-巯基乙醇、SDS、Triton等变性剂及表面活性剂对蛤蟆油粘度的影响。实验结果表明,当尿素、盐酸胍、β-巯基乙醇、Triton、SDS浓度分别为7mol/L、0.2mol/L、3%、2g/mL及8%时,具有最低粘度,其中盐酸胍的作用效果最佳。实验结果为进一步研究其有效成分、提取分离方法及药理活性奠定了基础。     

泥蚶总蛋白抗疲劳作用研究

研究泥蚶总蛋白的抗疲劳作用及机制.将200只昆明小鼠随机分为5组,每组又随机分为4个亚组(n=10):泥蚶总蛋白(GPTG)高、中、低剂量组与空白对照组,GPTG高、中、低剂量组给药剂量分别为2g/kg BW,4g/kg BW,8g/kg BW,空白对照组给予为生理盐水.采用灌胃给药,30d后测定小鼠负重游泳时间及血清尿素氮(BUN)含量、血浆乳酸(BLA)浓度、血清乳酸脱氢酶(LDH)活性、血红蛋白(Hb)浓度、肝糖原与肌糖原含量等生化指标.泥蚶总蛋白可明显延长小鼠负重游泳时间,显著降低运动后小鼠的BUN含量和BLA水平,提高了Hb浓度、肝糖原与肌糖原水平及乳酸脱氢酶的活性.泥蚶总蛋白具有良好的抗疲劳作用.     

煎炸老油对小鼠耐缺氧能力与抗疲劳能力的影响

新鲜精炼菜籽油煎炸薯条3 d(60锅),检测煎炸过程中菜籽油的过氧化值、黏度和极性化合物含量,将煎炸老油按低(10 mL/(kg·d))、中(20 mL/(kg·d))、高(40 mL/(kg·d))剂量对小鼠进行灌胃,另设阴性对照组(10 mL/(kg·d)新鲜精炼菜籽油灌胃)和正常对照组(10mL/(kg·d)蒸馏水灌胃),灌胃4周后,测定各组小鼠体重、耐缺氧生存时间和游泳力竭时间,考察煎炸老油对小鼠耐缺氧能力与抗疲劳能力的影响。结果表明:新鲜精炼菜籽油经过反复煎炸后,随着煎炸时间的延长菜籽油的过氧化值先升高后降低,黏度和极性化合物含量升高,油脂品质发生劣变;各组小鼠的体重没有显著差异;阴性对照组与正常对照组在各个指标上都没有显著差异;与阴性对照组相比,低剂量组小鼠耐缺氧生存时间和游泳力竭时间都没有显著差异,而中、高剂量组小鼠耐缺氧生存时间和游泳力竭时间都显著下降(p 0. 05)。     

林蛙油提升雌激素的机制研究

研究林蛙油对正常大鼠和去势大鼠性器官及性激素水平的影响,探讨服用林蛙油提升大鼠血清雌激素的机制。制备去卵巢大鼠,随机分为去势对照组、去势+林蛙油组,正常大鼠随机分为正常对照组、正常+林蛙油组,对正常+林蛙油组和去势+林蛙油组的大鼠每日灌胃200 mg/kg林蛙油,连续灌胃4周。所有大鼠末次灌胃1 h后麻醉,腹主动脉取血,分离血清测定性激素6项指标,取子宫和卵巢(正常大鼠),称量湿重,进行病理组织学检查。结果表明正常大鼠服用林蛙油后,血清雌二醇、睾酮含量显著上升(P<0.05),卵巢病理检查发现,有排卵后黄体增多的现象。去势大鼠服用林蛙油后,血清睾酮、泌乳素含量显著上升(P<0.05),子宫病理检查发现,子宫内膜上皮细胞厚度显著增加(P<0.05)。结论:林蛙油具有一定的外源雌激素作用,但提升服用者雌激素的主要作用机制可能类似于促性腺激素作用机制。     

林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物促进脾细胞和巨噬细胞功能

用盐析法结合超声波破碎细胞处理技术,从林蛙油中提取蛋白,并用中性蛋白酶制备林蛙油蛋白酶水解物。通过小鼠脾淋巴细胞增殖实验、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2水平、巨噬细胞吞噬中性红实验及巨噬细胞体外释放NO实验,研究林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物对脾细胞和巨噬细胞功能的影响。研究结果发现,林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物均对脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫功能具有不同程度的促进作用,其中林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物显示较显著的促进作用（p<0.01）。其中性蛋白酶水解物可分别增强脾淋巴细胞增殖、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2、巨噬细胞吞噬功能及巨噬细胞产生NO功能达19.3%、104.8%、109.1%及34.9%。以上结果表明,林蛙油蛋白的中性蛋白酶水解物可显著提高脾淋巴细胞和巨噬细胞功能（p<0.01）。      

木瓜蛋白酶作用于林蛙油蛋白质水解功能特性的研究

本研究以林蛙油为底物,加酶水解,实验确定林蛙油水解最适宜的酶制剂为木瓜蛋白酶。与林蛙油相比,水解产物具有很好的溶解性,游离雌二醇含量随水解程度的增加而增加,粘度随水解程度的增加而降低。     

正交试验优化哈蟆油蛋白双酶法水解工艺

目的：考察双酶法制备哈蟆油蛋白的最佳工艺。方法：以哈蟆油为原料,采用柠檬酸浸提和水煎煮的方法提取哈蟆油蛋白,先后加入胃蛋白酶和碱性蛋白酶进行酶解,根据酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量分布,应用单因素和正交试验确定哈蟆油蛋白酶解的最佳条件。结果：最佳酶解条件为胃蛋白酶与底物比（m/m）1∶2 000、酶解时间2 h、碱性蛋白酶与底物比（m/m）1∶100、酶解时间6 h,酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量小于5 000所占的比例为94.85%,哈蟆油蛋白中蛋白质含量为49.85%。结论：胃蛋白酶与碱性蛋白酶结合使用可以有效地降低哈蟆油蛋白的相对分子质量,利于人体吸收。     

林蛙油及其酶解液抗氧化活性的研究

通过小鼠林蛙油喂养实验可以发现,林蛙油具有明显的提高超氧化物岐化酶、过氧化氢酶、谷光甘肽酶的活性,且1%酶解液可明显减少鼠体内的MDA、NO水平。所以,林蛙油有抗氧化作用。