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相似文献
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1.
为建立用于花生致敏蛋白Ara h 1快速、灵敏、特异检测的双抗体夹心ELISA法,以Ara h 1鼠源单抗(mAb)为捕获抗体,以Ara h 1兔源多抗(pAb)为检测抗体,通过棋盘法优化抗体工作浓度建立方法,并对方法的灵敏度、特异性、准确度、稳定性等检测特性进行鉴定。结果表明,双抗体夹心ELISA法的mAb和pAb最佳工作浓度分别为1∶10 000稀释和1∶8 000稀释;ELISA标准曲线线性范围为4~256ng/mL,检测限为4.16ng/mL;样品添加回收试验的平均回收率为85.9%~94.5%,且该方法与其他常见致敏蛋白无交叉反应;并能在4℃条件下避光密封保存90d内保持检测结果稳定。说明所建立的双抗体夹心ELISA法灵敏特异、准确稳定,能够用于花生致敏蛋白Ara h 1的快速筛查。  相似文献   

2.
为了快速高效地检测转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆,本研究利用已制备的CP4-EPSPS蛋白免疫实验动物,获得5株CP4-EPSPS蛋白鼠单克隆抗体及3份羊抗血清,建立了CP4-EPSPS蛋白双抗夹心酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法,同时利用该方法对结荚期的Cp4 epsps转基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子进行定量检测。结果显示,最佳检测条件为捕获抗体1D12,工作浓度1.25 μg/mL,包被酶标板,4 ℃静置过夜,检测样品20 ℃孵育45 min,检测抗体8092,工作浓度2.5 μg/mL,20 ℃孵育30 min;CP4-EPSPS蛋白在模拟大豆环境中最低检测限为3.6 ng/mL,检测范围为7.5~125 ng/mL;重复性变异系数小于15%。利用上述检测条件,在转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子中均检测到CP4-EPSPS蛋白的表达,且各组织部位表达量差异显著,其中CP4-EPSPS蛋白在叶片中表达量最高,茎、种子、根中CP4-EPSPS蛋白表达量逐渐降低。  相似文献   

3.
为快速、准确地测定水牛初乳中IgG活性质量浓度,建立了双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)。结果表明,IgG活性质量浓度的对数值与吸光值存在很好的线性关系,其标准曲线方程式为γ=-0.2907x2+2.0819x+0.8689,相关系数R2=0.9937,线性范围在7.8~1000ng/mL,平均回收率在84.40%~96.71%之间,灵敏度高、重现性好,可用于水牛初乳及其制品中IgG活性质量浓度的检测。   相似文献   

4.
为快速、准确地测定水牛初乳中IgG活性质量浓度,建立了双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)。结果表明,IgG活性质量浓度的对数值与吸光值存在很好的线性关系,其标准曲线方程式为γ=-0.2907x2+2.0819x+0.8689,相关系数R2=0.9937,线性范围在7.8~1000ng/mL,平均回收率在84.40%~96.71%之间,灵敏度高、重现性好,可用于水牛初乳及其制品中IgG活性质量浓度的检测。  相似文献   

5.
目的 建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin, OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法 确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果 反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体, 1:5000 (V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5~200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%~4.58%和6.06%~12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%~130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,...  相似文献   

6.
以两种水凝胶型硅胶和3种干凝胶型硅胶为研究对象,通过不同水平的硅胶(0、50、300、1000mg/L)处理,做中试试验,比较不同类型硅胶对啤酒中混浊活性蛋白质和泡沫活性蛋白质的影响。试验结果表明,5种硅胶不同水平处理及不同硅胶之间对啤酒中混浊性蛋白存在极显著影响(p<0.01)。其中,干凝胶型硅胶比水凝胶型硅胶能更好地去除啤酒中混浊活性蛋白。在H-16、A-100和X-12使用量较低时,泡沫活性蛋白略有增加;在上述物质使用量高的情况下泡沫活性蛋白降低。在D-300和BG-5处理条件下,泡沫活性蛋白含量降低;除BG-5外,其它4种硅胶处理对泡沫活性蛋白均无显著影响(p<0.05)。用杜肯(Duncan)新复极差法分析中试试验数据,硅胶处理对混浊活性蛋白存在极显著影响(p<0.01),泡沫活性蛋白虽略有下降,但差异不显著。  相似文献   

7.
以前报道了以多克隆抗体为基础的酶联免疫吸附法(ELISA)测定泡沫性蛋白及混浊活性蛋白,与啤酒中泡沫活性蛋白对应的几种单克隆抗体的研究,使我们研发了一种通过sandwich-ELISA方法用单克隆抗体检测泡沫活性蛋白成为可能.与我们先前的ELISA方法相比,新的方法显示出了以下的优点泡沫活性蛋白的检测极限得到了很大的提高,泡沫活性蛋白的含量与啤酒泡沫的附着力有更高的相关性,此系统被用于酿造过程中泡沫活性蛋白的评价.  相似文献   

8.
志贺氏菌(Shigella)通称痢疾杆菌,是一类具有传染性强和危害严重的革兰阴性食源性致病菌,广泛污染各类动物源性食品.该研究将志贺氏菌经0.5%福尔马林溶液灭活后,多次免疫雌性大耳兔获得抗志贺氏菌多克隆抗体,以抗志贺氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标...  相似文献   

9.
以灭活重组基因工程菌EHEC O157Δler/stx(p BR322::stx1/2B::eae)免疫新西兰大耳白兔获得的兔多抗作为捕获抗体,以针对出血性大肠杆菌O157主要毒力因子的特异性单抗2H9为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法并绘制标准曲线用于食品中出血性大肠杆菌O157的定量分析。标准曲线线性方程为y=0.3479x-0.4121,R2=0.9862。该ELISA的重复性变异系数小于5%,稳定性良好。应用该方法测得出血性大肠杆菌O157∶H7 EDL933的最小检出限为103cfu/m L。食品样品接种实验表明:牛肉或猪肉样品接种量为0.08 cfu/g,增菌8 h后可以检出阳性反应;蔬菜和牛奶样品接种量为0.12 cfu/g(m L),增菌10 h后可以检出阳性反应。   相似文献   

10.
付臣 《啤酒科技》2006,(4):79-81,83
以前报道了以多克隆抗体为基础的酶联免疫吸附法(ELISA)测定泡沫性蛋白及混浊活性蛋白,与啤酒中泡沫活性蛋白对应的几种单克隆抗体的研究,使我们研发了一种通过sandwich-ELISA方法用单克隆抗体检测泡沫活性蛋白成为可能。与我们先前的ELISA方法相比,新的方法显示出了以下的优点:泡沫活性蛋白的检测极限得到了很大的提高,泡沫活性蛋白的含量与啤酒泡沫的附着力有更高的相关性,此系统被用于酿造过程中泡沫活性蛋白的评价。  相似文献   

11.
The aim of this paper is to understand the consumer's attitude towards alcohol free beers in Italy by using a quantitative concept analysis. The method uses conjoint analysis with consumers of Italian beer, living in different geographical areas. Results show that packaging (RI = 56.24%) is the main attribute considered, followed by price, flavour, claims and colour. As far as part‐worths are concerned, glass and twist‐off caps are the utilities that most increase the preference. They are followed by malty and fruity characters, a price of less than 0.80 Euros, a remarkable body and intended for young adults. In contrast, plastics, a price of over 1.25 Euros, organic raw materials and imports showed the greatest negative impact on preference. These findings can be used as a base for new product development and for media communication purposes.  相似文献   

12.
13.
采用双向电泳结合基质辅助激光解吸/ 电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术分析确定引起啤酒混浊的蛋白组分。结果表明,仅有少量的蛋白组分参与啤酒混浊的形成。聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现MW 40kD 左右,25~29kD 和6.5~17kD 作为啤酒混浊蛋白组分,可能主要来自麦芽中的水溶蛋白,小部分来自麦芽醇溶蛋白。双向电泳分析证实了大部分的麦芽蛋白在酿造过程中发生降解和变性,并结合质谱技术鉴定得到BTI-CMe、germin E(Hordeum vulgare)和 protein Z 3 种组分可以抵抗酿造过程的热变性和水解作用,将成为啤酒混浊形成重要的促进因子。  相似文献   

14.
贾娟  王德良 《酿酒》2011,38(5):27-30
啤酒中包含多种大麦蛋白,制麦和酿造过程中受到化学方式或酶的修饰,影响最终的啤酒浑浊稳定性。从啤酒中分离出的浑浊活性蛋白主要来自大麦储藏蛋白或大麦醇溶蛋白(Hordeum vulgare L.),这些蛋白有富含脯氨酸,由许多不同分子量的片段组成。尽管对啤酒浑浊的研究时间较长,但是对于其特性方面的有待进一步确认。  相似文献   

15.
电化学法测定壳聚糖粗制品中壳聚糖含量   总被引:1,自引:0,他引:1  
在pH为5.0时,六次甲基四胺缓冲液中偶氮氯膦Ⅲ能与壳聚糖生成一种复合物,该复合物可使偶氮氯膦Ⅲ在-0.158V处的还原波峰电流降低。在选定的最佳条件下,用线扫极谱法测定了其峰电流的降低值与壳聚糖的浓度在2.5~30 mg/L的范围内呈线性关系,线性回归方程为Δip(nA)=-193.1+62.40CCTS(mg/L),相关系数0.997,检出限0.5 mg/L。由此建立了一种快速、简便测定壳聚糖的方法。  相似文献   

16.
17.
《LWT》2002,35(3):265-271
Amino acid analysis, electrophoretic separation and Fourier transform-infrared spectra (FT-IR) were used to determine and characterize proteins and amino acids in two types of beer: with a high content of proteins (Beer 1) and with a low content of proteins (Beer 2). The concentration of total proteins, albumin and of most studied amino acids in Beer 1 were significantly higher than in Beer 2 (P<0.05-0.0005). Thirty-six rats were divided in three groups, each 12. The rats of the control group were fed basal diet (BD) only and the BD of the two experimental groups (Beer 1 and Beer 2) was supplemented with lyophilized, polyphenol-free Beer 1 and Beer 2, respectively. Before and after completion of the 4 w feeding period the total cholesterol (TC), LDL-cholesterol (LDL-C), HDL-cholesterol, triglycerides (TG), lipid peroxides (LP) and total radical-trapping antioxidative potential (TRAP) in all three groups were examined. In Beer1 group a significant decrease in the level of TC, LDL-C and TG was registered (P<0.05, 0.05 and 0.005, respectively). No differences in the level of LP and TRAP in all three groups were found. This investigation proves that beer with high protein and essential amino acid concentrations does affect the plasma lipids level in rats.  相似文献   

18.
建立河鲀毒素的荧光微球免疫层析检测方法。基于抗体亲和位点保护标记方法制备抗河鲀毒素抗体偶联荧光微球,方法简单稳定,所有结合分离步骤均在亲和柱中完成,避免了亲和位点被破坏而且荧光信号更强,将检测灵敏度提高至原来的8倍左右。所建立的河鲀毒素检测方法IC50为18.4 ng/m L,线性范围为2~200 ng/m L(y=-0.15ln x+0.95,R2=0.98)。检测河鲀样本的最低检出限为10μg/kg,平均相对标准偏差小于25%(n=6)。该方法适用于热加工样品的检测,整个检测过程仅需15 min,且无需使用大型设备,为河鲀餐前速测提供了一定技术手段。  相似文献   

19.
小麦面筋蛋白质酶解产物用作啤酒发泡蛋白的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
为改善啤酒的泡沫性能,作者分别采用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶以及碱性蛋白酶对小麦面筋蛋白进行适度酶解改性,并对其产物用作啤酒发泡蛋白的可行性进行了研究.结果表明,经适度酶解作用后,小麦面筋蛋白在pH 4.5条件下溶解性和泡沫性能得到显著改善(P<0.05),且小麦面筋蛋白酶解产物在啤酒环境中热稳定性较好,经30 min的热处理,含100 mg/L小麦面筋蛋白酶解产物的啤酒浊度与加热前相比增加不显著(p>0.05).小麦面筋蛋白胃蛋白酶酶解产物和碱性蛋白酶酶解产物对啤酒初始泡持性的改善效果都较好,但胃蛋白酶酶解产物对酵母蛋白酶A作用较敏感,对纯生啤酒货架期内泡持性的改善效果不太理想,而碱性蛋白酶酶解产物可明显改善纯生啤酒货架期内的泡沫稳定性.  相似文献   

20.
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