血清液离甲状腺素（FT4）双抗固相放射免疫分析方法的建立

利用双抗固化试管建立了检测血清中游离甲状腺素（ＦＴ４）的固相放射免疫分析方法。游离ＦＴ４和＾１２５Ｉ标记的ＦＴ４类似物竞争与包被管上的固化抗体结合。检测可以在２ｈ内完成。检测范围为０．１２￣７５ｐｍｏｌ／Ｌ。批内、批间平均变异系数分别为１．７％－４．４％和３．２％－９．１％。非特异性结合小于１％。该分析与商品ＦＴ４标记抗体ＲＩＡ分析药盒比较,线性回归斜率为１．０８,截距２．３,相关系数为０．８５。     

人胎盘催乳素（HPL）放射免疫分析试剂盒的研制

本试剂盒采用氯胺Ｔ法标记的＾１２５Ｉ－ＨＰＬ与ＨＰＬ（标准品或人血清中ＨＰＬ）竞争结合ＨＰＬ抗体，用ＤＰ－Ｒ免疫沉淀剂分离，用于直接测定人血清中的ＨＰＬ含量。经方法学鉴定，其灵敏度为０．００５ｍｇ／Ｌ；回收率为９２．７－１０６．３％；零管结合率为３０％－７０％；非牧民结合率小于５．０％；测量范围为０．１－１０．０ｍｇ／Ｌ；批内变异系数为３．４％－３．８％；批间变异系数为９．２－１０．６％；温育时间     

甲胎蛋白干血滤纸免疫放射分析试剂盒的研制

用氯胺Ｔ法制备＾１２５Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ，用ＡＦＰ ＭｃＡｂ包被试管，以全血作标准，建立了ＡＦＰ干血滤纸片免疫放射分析方法。该方法灵敏度为７．２μｇ／Ｌ，批内变异系数为５．１－１０．０％，批间变异系数为４．７％－８．６％，正常参考值≤１０μｇ／Ｌ，与血清ＡＦＰ免疫分析方法比较，相关系数ｒ＝０．９７９。     

99Tcm改良亚锡法标记肝癌片段抗体的研究

将传统亚锡法加以改进，采用亚锡－葡庚糖酸钠还原剂进行肝癌片段抗体ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２的＾９９Ｔｃ＾ｍ标记，整个标记过程可在１．５ｈ内完成。Ｗｈａｔｍａｎ３ＭＭ纸层析法测得最佳标记率为８４．２％，标记物室温放置２４ｈ的解离率〈５％，标记物在抗体和ＥＤＴＡ摩尔比为１：１００００的ＥＤＴＡ介质中解离率低，而在抗体和Ｌ－半胱氨酸摩尔比为１：６２５的Ｌ－半胱氨酸介质中解离率约为１０％。活细胞放射免疫结合     

人促甲状腺激素生物素—亲和素系统免疫放射分析法的建立

报道将ＢＡＳ引入双们点夹心ＩＲＭＡ，建立了人血清ＴＳＨ固相试管双位点夹心ＢＡＳ－ＩＲＭＡ。该法批内ＣＶ为１．４％－８．３％，批间ＣＶＯ ６．１％－８．４％，最小检出量为０．０４ｍＩＵ／Ｌ，平均回收率为１００．１６％，灵敏度约是同条件下ＩＲＭＡ的３倍；与ＩＲＭＡ对比测定２０份病人血管ＴＳＨ样品，经统计学处理，两者测定结果呈良好相关性。     

~（99m）Tc直接法标记鼠／人嵌合抗体ccM_4及在动物体内分布研究和初步临床应用

ＳｎＣｌ２还原９９ｍＴｃＯ４后与２－巯基乙醇还原的ｃｃＭ４混合标记．薄层层析测定标记率为９８％．ｃｃＭ４嵌合抗体标记前后免疫活性没有明显变化（Ｐ＞０．０５）。动物体内分布实验结果显示：注射９９ｍＴｃ－ｃｃＭ４后１２ｈ．其放射性主要分布在肾（８．１７±１．０９ＩＤ％／ｇ）．肝（６．９４±１．７９ＩＤ％／ｇ）和血液（４．０３±１．０ＩＤ％／ｇ）；荷瘤裸鼠实验显示，１２５Ｉ－ｃｃＭ４瘤体内聚集量最多。９９ｍＴｃ－ｃｃＭ４初步应用于１０例胃癌患者．     

小鼠免疫器官（胸腺、脾脏和淋巴结）成克隆基质祖细胞辐射敏感性的研究

用体外液体单层培养技术研究了小鼠胸腺、脾脏和淋巴结成克隆性基质祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）的辐射敏感性：胸腺ＣＦＵ－Ｆ的Ｄ０值为２．３Ｇｙ，ｎ值为１．５，脾脏为２．８Ｇｙ和１．２，雨淋巴结的则为２．７Ｇｙ及１．４。脾致密型ＣＦＵ－Ｆ亚群的Ｄ０值为２．１Ｇｙ，ｎ＝１．５；而松散型ＣＦＵ－Ｆ亚群的Ｄ０＝４．４Ｇｙ，ｎ＝１．２。这为大剂量辐射损伤混输基质细胞以提高受体免疫造血功能，提供了实验依据。     

血清降钙素放射免疫分析

采用氯胺Ｔ法对人降钙素（ｈＣＴ，以下简称ＣＴ）进行＾１２５Ｉ标记，用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱分离纯化，得到比活度〉９．５ＴＢｑ／ｇ、放化纯度〉９５％，与过量抗体结合率为（８５－９１）％的＾１２５Ｉ－ＣＴ。建立了稳定的冻干系列标准及简便、快速的分析方法。标准曲线范围为８．８－３５１ｐｍｏｌ／Ｌ，在该范围内测定人血清的平均回收率为（５１．５－１０２．０）％，高浓度血清的稀释相关系数为ｒｘ＝０．９９３     

5-羟色胺与多巴胺系统相互作用的研究

２β－甲酯基－３β－（４－碘苯基）托烷（β－ＣＩＴ）与多巴胺转运蛋白（ＤＡＴ）、５－羟色胺转运蛋白（５－ＨＴＴ）亲和力几乎相等，因此可用５－ＨＴ重摄取抑制氯米帕明来研究５－ＨＴ系统与ＤＡ系统间的相互作用。用过氧乙酸氧化碘标记法制备＾１２５Ｉ－ＣＩＴ。用不同剂量盐酸氯米帕明（０．２５、０．５、１、１．５、２、２．５ｍｇ）研究对＾１２５Ｉ－β－ＣＩＴ脑内结合的影响，及同一剂量盐酸氯米帕明（１ｍｇ／０．     

HPLC对^99Tc^m发生器洗脱液中高锝酸盐的分析和测定

利用反相ＨＰＬＣ对凝胶型＾９９Ｍｏ－＾９９Ｔｃ＾ｍ发生器洗脱液中高锝酸盐进行了分析鉴定和含量测定，并与液闪法测量结果进行了比较。在实验条件下，ＴｃＯ４＾－的ＨＰＬＣ色谱峰的保贸时间为（３．００±０．０５）ｍｉｎ，其峰高与浓度呈线性关系。方法ＴｃＯ４＾－的检测限为１．５×１０＾－８ｍｏｌ／ｌ化学回收率为９５％－１０５％，方法还可用于＾９９Ｔｃ＾ｍ标记放射性药物中高锝酸盐的检测。     

A solid phase radioimmunoassay for free triiodothyronine in serum：assay development and validation

A solid phase radioimmunoassay for free triiodothyronine in serum was developed based on double-antibody coated tubes.The method was turned out to be reliable with good repoducibitlity,higher sensitivity and easy performance,The measurable range of FT3 in serum was 1.2 to 38 pmol/L.The mean coefficients of variation within and between assays were 1.79%-3.18%and 4.72%-.931%,respectively,The FT3 concentrations in euthyroid serum as determined by this method were 2.8 to 7.8pmol/L.The FT3 values determined by this new method correlated well with those measured by a commerical radioimmunoassay (r=0.853).     

游离前列腺特异抗原免疫放射分析方法的建立

采用双抗体夹心法,利用两株前列腺特异抗原（Prostate Specific Antigen,PSA）的单克隆抗体（抗游离前列腺特异抗原F-PSA和抗血清中总前列腺特异抗原T—PSA）,建立了定量测定血清中F-PSA含量的免疫放射分析方法。该方法的最小检测限为0．04μg／L,批内变异系数≤4．0％,批间变异系数≤10．5％,平均回收率为102．7％。该法与CIS公司生产的放免试剂盒比对的相关方程为y=0．9651x-0．0011,相关系数r=0．9964。本研究建立的F-PSA免疫放射分析方法灵敏度高,定量分析效果较好,适用于临床诊断。     

糖类抗原CA19-9免疫放射分析法的建立

采用两株CA19-9单克隆抗体,一株用于125I标记、另一株包被于试管作为固相抗体,用血清稀释CA19-9抗原,制备标准品,建立了CA19-9双位点夹心免疫放射分析方法（IRMA）。分析采用两步法,本方法最小检测限为2.0 U/mL,批内、批间变异系数分别为 6.4%~9.5%和6.0%~12.6%,样品添加实验结果显示,回收率为88.1%~106.1%,血清样品倍比稀释后测定,测定值和稀释度的相关系数为0.990。CA19-9浓度至11800 U/mL时测定未见“弯钩”效应。69例健康人血清样品测定值为0.3~29.6 U/mL（ ±s 为7.4±5.8 U/mL）,和法国CIS公司的CA19-9免疫放射分析药盒同时测定84例人血清样品,二者测定值相关方程为y=1.32x-17.6,相关系数r=0.896。相似文献   

固相包被技术及应用

对免疫分析中的生物分子包被固相载体技术做了系统的研究,并探索其在免疫分析中的应用。采用物理吸附法和多聚赖氨酸活化管化学连接方法对多克隆抗体和单克隆抗体在聚苯乙烯试管上的固定方法进行了研究,并用商品化的免疫分析试剂盒对研究的方法进行了评估。采用物理吸附方法包被的试管稳定性较好,应用于TSH和CA125免疫放射分析,技术指标均达到国家暂行标准。采用活化管技术包被的试管在应用某些具体的免疫分析试剂盒时,部分技术指标高于核行业标准,但需进一步的实验。     

单克隆抗体Lym—1的^90Y预标记法研究

以ＤＯＴＡ类双功能螯合剂（ＤＯＴＡ－Ｐｅｐｔｉｄｅ）为联接剂，采用先把＾９０Ｙ标记到联接剂上，经纯化后再与单克隆抗体偶联的＾９０Ｙ预标记方法，使放射性得率大于３０％，并确定了标记产物的分析方法。结果表明使用＾９０Ｙ预标记方法把＾９０Ｙ标记到单克隆抗体上的过程是合理的，最终产品的放射化学纯度经ＨＰＬＣ和ＴＬＣ测定均大于９５％，相对于＾１２５Ｉ－ｌｙｍ－１的免疫活性经体外细胞结合法测定都大于１００％。     

游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法。其灵敏度为0.90pmol/L,标准曲线范围0.9～45.0pmol/L,批内变异系数3.1%～8.1%,批间变异系数4.9%～10.6%。测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5～11.1pmol/L,均值为5.1±2.0pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7～37.3pmol/L,均值为20.5±7.1pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9～3.8pmol/L,均值为2.0±0.9pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4～8.5pmol/L,均值为6.0±2.5pmol/L。通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(RIA)的测定结果有良好的相关性。应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。     

白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2.63%～5.28%和2.40%～4.26%;回收率为95.0%～106.4%;高浓度Alb样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.997 4。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒的研制

以聚苯乙烯小球为固相载体,在小球表面包被一层基因工程制备的乙型肝炎核心抗原(HBcAg),以125I标记的乙型肝炎核心抗体(125I-Anti-HBc)作为标记物,采用固相放射免疫竞争法研制成乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒(Anti-HBc-RIA)。本试剂盒的灵敏度为0.8NCU/mL,批内变异系数<9.9%,批间变异系数<13.8%,回收率为92.6%～109.2%。正常参考值为0～2.0NCU/mL。     

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%～6.48%和4.61%～13.1%,回收率为95.8%～117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别＜0.05%和＜0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y＝1.10x-0.207,相关系数r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y＝1.00x+0.191,相关系数r＝0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

β2-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

以β₂-微球蛋白（β₂-MG）抗体包被微孔板，四甲基联苯胺（TMB）为底物，用辣根过氧化物酶标记β₂-MG，建立了β₂-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒，并对该方法进行了方法学分析。结果显示：本方法分析灵敏度为0.15 mg/L，批内、批间变异系数分别为4.1％～11.2%和14.1％～16.0％，回收率为93.3%～115.9%，高浓度β₂-MG样品系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数为r=0.997 4。特异性结果显示：本试剂盒与铁蛋白基本无交叉反应，与白蛋白及甲胎蛋白在浓度分别低于10 mg/L及5 mg/L时有交叉反应，但反应很小。与放射免疫分析法（RIA）同时测定人血清样品，方法间有良好的相关性，相关方程为y_ELIA=1.006x_RIA+0.406，r=0.900(n=59)。以上参数均符合临床免疫分析的要求。本试剂盒操作简便、快速，适用于临床检测和科研应用。