小叶榕叶水提物化学成分的分离和鉴定

目的研究小叶榕叶（Folium Fici Micr Ocarpae）水提物中的化学成分。方法采用硅胶柱层析、重结晶方法分离和纯化小叶榕叶水提物中的化学成分,综合运用质谱、红外光谱、氢谱、碳谱技术,对从小叶榕叶水提物中分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从小叶榕叶水提物的乙酸乙酯部位分离得到8个化合物：苯甲酸（Ⅰ）,1-（4-羟基-3,5-二甲氧基苯基）-乙酮（Ⅱ）,2-羟基苯甲酸（Ⅲ）,3-羟基-4-甲氧基苯甲酸（Ⅳ）,4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸（V）,4-羟基苯甲酸（Ⅵ）,红花菜豆（Ⅶ）,4-甲氧基-3,5-二羟基苯甲酸（Ⅷ）。结论首次证明小叶榕叶含有上述成分。     

辣椒叶醇提物的体外抗氧化活性

探讨辣椒叶抗氧化作用,采用乙醇提取辣椒叶醇提物,测定其总黄酮含量,并考察该提取物体外总抗氧化活性以及清除超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的能力。结果表明辣椒叶总黄酮含量为4.2%,醇提取物具有较强的体外抗氧化活性和清除自由基的活性。辣椒叶中含有黄酮以及抗氧化活性成分,具有明显抗氧化作用。     

狭叶荨麻醇提物的体外抗氧化及抗炎活性

为了开发利用狭叶荨麻资源,本研究以狭叶荨麻为原料,对其醇提物的体外抗氧化及抗炎活性进行了研究。在单因素试验的基础上,采用响应面法对提取条件进行了优化,得到最佳提取条件为提取时间114 min、料液比1:15、乙醇浓度为64%,所得醇提物得率(10.00±0.26)%,该狭叶荨麻醇提物中活性物质含量总酚(160.77±0.01)mg/g、总黄酮(366.85±0.05)mg/g、原花青素(7.81±0.01)mg/g、皂苷(516.76±0.04)mg/g、生物碱(2.01±0.02)mg/g。在优化条件下进行了提取,分别采用抗坏血酸(Vc)、双氯芬酸钠作抗氧化、抗炎阳性对照,对所得狭叶荨麻醇提物进行总还原力、清除DPPH·、清除·OH及抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性评价。该狭叶荨麻醇提物总还原力高于Vc,且量效关系比Vc更明显(p0.001),EC50为0.04 mg/m L;清除DPPH·、清除·OH活性比Vc好,IC50分别是0.02 mg/m L、1.87 mg/m L;抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性与双氯芬酸钠相近,IC50分别是2.43 mg/m L,0.31mg/m L。     

小叶榕叶水提物化学成分的分离和鉴定

目的 研究小叶榕叶(Folium Fici Microcarpae)水提物中的化学成分.方法 采用硅胶柱层析、重结晶方法分离和纯化小叶榕叶水提物中的化学成分,综合运用质谱,红外光谱、氢谱、碳谱技术,对从小叶榕叶水提物中分离得到的化合物进行结构鉴定.结果 从小叶榕叶水提物的乙酸乙酯部位分离得到8个化合物:苯甲酸(Ⅰ),1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)·乙酮(Ⅱ),2-羟基苯甲酸(Ⅲ),3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(Ⅳ),4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸(Ⅴ),4-羟基苯甲酸[Ⅵ),红花菜豆(Ⅶ),4-甲氧基-3,5-二羟基苯甲酸(Ⅷ).结论 首次证明小叶榕叶含有上述成分.     

卡亚茶水提物辅助调节血脂功能作用研究

目的:研究卡亚茶水提物的辅助降血脂作用。方法:将50只小鼠随机分成空白对照组(普通饲料)、阴性对照组(高脂饲料)和高、中、低剂量组(卡亚茶水提取物+高脂饲料),分笼喂养30d,测定小鼠体重、肝重、肝脏指数、血清总胆固醇(TC)、血清三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并观察肝脏组织病理学变化。结果:卡亚茶水提取物可缓解高脂饲料喂养小鼠体重、肝重和肝脏指数的增加,降低高脂小鼠肝组织中脂肪细胞量,中剂量组小鼠血清TC、TG和LDL-C显著低于阴性对照组(p<0.05),HDL-C显著高于阴性对照组(p<0.05)。结论:适当浓度的卡亚茶水提取物有辅助降血脂作用。     

茶多酚对采后龙眼果实的保鲜作用

用茶多酚对石硖龙眼进行处理,对其贮藏期间的各种与保鲜有关的表形和营养指标进行了测定。结果表明,不同浓度的茶多酚溶液均可提高龙眼果实贮藏期间的好果率、减缓果实失重、提高贮藏期间尤其贮藏后期果肉可溶性固形物的含量、延缓可滴定酸含量的变化,对龙眼果实在贮藏期间的总糖和VC的变化均产生良好的影响。与对照相比,经茶多酚溶液处理后,可滴定酸含量提高70%,还原糖含量提高16.49%,总糖含量提高29%,VC含量提高49.58%。     

黄秋葵水提物抗运动疲劳作用研究

目的:观察黄秋葵水提物对实验动物的抗疲劳效果。方法:制备黄秋葵全果水提物,测定提取物中功效成分含量,分别以4、8 g/kg体重/d灌胃21 d,通过小鼠跑台力竭实验和负重游泳力竭实验,结合疲劳相关的生化指标的测定,观察黄秋葵水提物的抗疲劳效果。结果:黄秋葵水提物中含多糖101.1 mg/g,总黄酮3.37 g/100 g,总氨基酸42.4 g/100 g,黄秋葵水提物可显著延长小鼠跑台力竭时间(P≤0.01),8 g/kg黄秋葵水提物还可显著延长负重游泳时间(P≤0.01),显著降低疲劳状态下血清尿素氮(BUN)和血清乳酸(LA)含量。结论:黄秋果具有良好的抗疲劳效果。     

荔枝、龙眼果肉及荔枝、龙眼多糖清除活性氧自由基的研究

利用过硫酸铵N,N,N’,N’-一四甲基乙二胺体系检测O2-•氧自由基的方法(AP-TEMED法),研究荔枝果肉、龙眼果肉对活性氧自由基O2-•的清除作用以及对龙眼多糖、荔枝多糖的抗脂质过氧化物的作用进行了测定。实验结果表明,两种水果果肉对活性氧具有较强的清除能力,而且龙眼果肉的清除作用比荔枝强,而荔枝多糖在清除自由基的作用呈正相关系,龙眼多糖在这方面能力比荔枝弱。     

酶法液化制取龙眼汁的研究

研究了利用纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶单一使用和复合使用时,对龙眼进行全果液化取汁的工艺效果以及有关工艺条件。研究发现单一使用纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶对龙眼进行全果液化时,果汁产率在酶用量为0.6%之前随酶用量的增加增幅较大,在酶用量为0.6%之后随酶用量的增加增幅较小。同时还发现纤维素酶、半纤维素酶对龙眼的液化效果较好,果胶酶对龙眼液化效果则很差。通过正交试验结果表明,纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶复合使用时,以半纤维素酶用量为0.6%,果胶酶用量为0.9%,纤维素酶用量为0.6%时,液化效果最佳。     

玫瑰茄水提物抗贫血作用的研究

初步探究玫瑰茄水提物的抗贫血作用机制。建立IDA大鼠模型,随机分成4组,对IDA大鼠灌胃低、中、高剂量的玫瑰茄水提物。30d后,解剖大鼠,取十二指肠和肝脏。利用Q-PCR和Westernblot技术分别检测试验大鼠十二指肠中二价金属转运体(DMT-1)、膜铁转运蛋白(FPN-1)、膜铁转运辅助蛋白(Hp)及其mRNA的表达量,肝脏铁调素(Hepcidin)及其mRNA的表达水平。结果表明,与低铁对照组比较,玫瑰茄水提物低、中剂量组对DMT-1、FPN-1、Hp表达量的下调幅度不超过9%,mRNA的表达水平则超过50%,低、中剂量均对Hp mRNA无显著性差异;高剂量组对DMT-1、FPN-1、Hp及其mRNA表达量的下调程度不一。低剂量组Hepcidin-25的表达量是低铁对照组的1.61倍;高剂量组的表达量则下调了65.79%;各剂量组均抑制了相关mRNA的表达。因此,玫瑰茄水提物通过提供有效成分促进机体铁的吸收,从而影响IDA大鼠的DMT-1、FPN-1、Hp、Hepcidin-25及其mRNA的表达,维持机体铁稳态。     

响应面优化酶法提取龙眼多糖工艺

对纤维素酶法提取龙眼果肉多糖(ELP)的工艺进行研究。以新鲜龙眼果肉为原料,考察不同酶种类对龙眼多糖提取得率的影响,选择纤维素酶用于酶法提取实验研究。采用单因素试验和响应面法对影响龙眼多糖得率的4个主要影响因素即纤维素酶添加量、酶解温度、酶解时间和液料比进行分析优化。结果表明：影响龙眼多糖得率的工艺因素按主次顺序排列为：纤维素酶添加量＞酶解温度＞酶解时间＞液料比;确定纤维素酶解龙眼多糖最佳工艺条件为纤维素酶添加量1.2%、液料比6:1(mL/g)、酶解温度45.0℃、酶解时间187.0min。在此最佳条件下,纤维素酶法提取龙眼多糖的得率为(12.23 ± 0.15)mg/g。本研究采用纤维素酶解提取工艺,相对于传统热水浸提法可显著提高龙眼多糖得率。     

龙眼核多酚提取工艺的正交试验优化及其分离纯化与结构表征

采用正交试验设计优化龙眼核多酚的提取条件。在单因素试验的基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取温度为自变量,以龙眼核多酚提取量为考察指标,经过四因素三水平正交试验得出龙眼核多酚提取的最佳工艺条件：乙醇体积分数40%、料液比1∶20（g/mL）、提取温度70 ℃、提取时间90 min。在该条件下龙眼核多酚提取量为36.15 mg/g。通过对4 种树脂静态吸附及解吸性能的比较,确定D3520型树脂为龙眼核多酚分离纯化的理想树脂,洗脱剂乙醇体积分数为40%时,树脂对多酚的解吸率最高。采用傅里叶变换离子回旋共振质谱（Fouriertransform ion cyclotron resonance mass spectrometry,FT-ICR-MS）对龙眼核多酚结构进行初步分析,结果表明,龙眼核多酚主要成分为以鞣花酸及其衍生物为主的小分子质量水解单宁。通过核磁共振、紫外光谱和红外光谱对FT-ICR-MS中2 种丰度很高的物质进行分析,确定其分别为鞣花酸和(S)-flavogallonic acid,后者为鞣花酸的衍生物。     

龙眼核提取物的体外抗氧化及抑菌活性研究

探讨龙眼核中不同极性部位的体外抗氧化和抑菌活性,并筛选其有效部位。以Folin-Ciocalteu比色法测定龙眼核95%乙醇提取物中4种不同极性萃取物的总酚含量,并利用ABTS法、DPPH法、邻苯三酚自氧化法、邻二氮菲—Fe2+氧化法测定评价各萃取物的抗氧化活性,同时采用牛津杯法测定比较4种萃取物的抑菌活性。结果表明:乙酸乙酯萃取物的总酚含量最高,达到(693.51±9.52)mg/g;在不同的自由基体系中,4种萃取物均对·O-2的清除作用最弱,但对清除ABTS·+、DPPH·、·OH均表现出较强的效果,龙眼核各萃取物抗氧化能力的结果为乙酸乙酯萃取物氯仿萃取物正丁醇萃取物水层剩余物;除水层对沙门氏菌和大肠杆菌均无明显抑制作用外,4种萃取物对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均具有不同强度的抑制作用,其中乙酸乙酯层的抑菌活性最为突出。由结果可推断乙酸乙酯萃取物含有丰富的多酚类物质,可作为一种天然的抗氧化剂和抑菌剂,具有很大的药用价值和应用前景。     

响应面试验优化龙眼肉多糖乙酰化工艺及其抗氧化活性

对龙眼肉多糖进行乙酰化修饰最佳工艺研究,采用乙酸酐法制备乙酰化龙眼肉多糖,以取代度为指标,采用响应面法对工艺条件进行优化,并研究乙酰化龙眼肉多糖的体外抗氧化活性。结果显示,龙眼肉多糖的最佳乙酰化条件为：乙酸酐-多糖物质的量比（投料比）10.2∶1、反应温度42 ℃、反应时间30 min。该工艺条件下龙眼肉多糖乙酰化取代度达到0.443。乙酰化龙眼肉多糖能够清除羟自由基、抑制脂质过氧化以及H2O2诱导的红细胞溶血,半数抑制浓度（IC50）分别为702.41、646.04 μg/mL和380.11 μg/mL,表现出比未修饰龙眼肉多糖更强的抗氧化活性。     

龙眼漆酶基因(DlLac)的克隆及表达分析

以‘石硖’龙眼为试材,采用RT-PCR结合RACE技术成功克隆一个龙眼漆酶基因全长c DNA序列,命名为Dl Lac,NCBI登录号为KY051551。Dl Lac基因序列全长1898 bp,编码576个氨基酸,NCBI比对结果显示其与荔枝漆酶氨基酸序列同源性最高,高达94%;进化树结果显示龙眼漆酶氨基酸序列与荔枝漆酶氨基酸序列具有高度同源性。氨基酸保守序列结果表明龙眼漆酶氨基酸序列含有漆酶的3个典型保守结构域,分别为:Cu-oxidase-3、Cu-oxidase和Cu-oxidase-2。结合龙眼果实在常温、低温贮藏条件下,果皮褐变与Dl Lac的表达关系,推测Dl Lac的上调表达可能对龙眼果皮褐变起促进作用。      

羧甲基化龙眼肉多糖制备工艺优化及其抗氧化、免疫活性

利用响应面法优化羧甲基化龙眼肉多糖制备工艺,并测定其体外抗氧化活性,同时建立小鼠免疫低下模型,对所得多糖进行体内免疫调节活性研究。以羧甲基取代度为指标,通过单因素试验对一氯乙酸(monochloroacetic acid,MCA)浓度、反应温度、反应时间进行分析,得到羧甲基化龙眼肉多糖最佳制备条件为MCA浓度1.2 mol/L、反应温度73℃、反应时间3.2 h,取代度可达1.053。抗氧化活性研究表明,在质量浓度为200~3 200μg/mL范围内,龙眼肉多糖(polysaccharide from Dimocarpus longan pulp,LYP)、羧甲基化龙眼肉多糖(crboxymethylated polysaccharide from Dimocarpus longan pulp,CM-LYP)的抗氧化能力与质量浓度呈剂量依赖关系,当剂量质量浓度达3 200μg/mL时,LYP、CM-LYP对羟自由基清除率分别为(42.35±5.67)%、(84.39±4.47)%,对超氧阴离子自由基的清除率分别为(51.91±5.34)%、(87.91±7.32)%,对脂质过氧化的抑制率分别为(67.91±5.72)%、(79.85±2.92)%、对H2O2诱导的红细胞溶血的抑制率分别为(47.23±3.5)%、(54.66±2.83)%,表明羧甲基的引入增强了龙眼肉多糖的抗氧化活性;体内免疫活性实验表明,羧甲基化龙眼肉多糖可提高免疫抑制小鼠的脾脏指数、促进血清溶血素形成、提高血清和脾脏中溶菌酶含量及调节Th1/Th2平衡,与修饰前龙眼肉多糖相比,羧甲基化龙眼肉多糖具有更好的免疫调节作用。     

龙眼果酒发酵工艺的优化及相关品质分析

目的 优化龙眼果酒的发酵工艺并对其相关品质进行分析。方法 通过单因素实验,考察发酵温度、糖度、酵母接种量及柠檬酸添加量对龙眼果酒的酒精度和感官品质的影响;采用正交实验对龙眼果酒的发酵工艺进行优化;通过食品分析方法与技术,测定最优发酵条件下的龙眼果酒的相关理化品质,评价其抗氧化活性,分析其挥发性风味成分。结果 龙眼果酒的最优发酵条件为：发酵温度26 ℃、糖度36 °Brix、酵母接种量0.04 g/g、柠檬酸添加量0.6 g/g;最优发酵条件下的龙眼果酒的酒精度为8.32%vol,pH值为3.32,总糖含量为16.68 g/L,还原糖含量为15.15 g/L,总酸含量为14.05 g/L,色泽为透亮的金黄色;最优发酵条件下的龙眼果酒具有良好的抗氧化活性,可有效清除ABTS和DPPH自由基并展现出较高的还原能力;最优发酵条件下的龙眼果酒中共检测到32种挥发性风味物质,其中醇类、酯类和酸类是主要成分,占总挥发性风味物质的99.39%。结论 最优发酵条件下的的龙眼果酒具有良好的感官性状、抗氧化活性及丰富的挥发性风味物质。研究为龙眼果酒的开发与生产提供实验基础与支撑。     

4种龙眼核提取物的总黄酮含量、体外抗菌活性与抗氧化活性

以聚酰胺吸附-硝酸铝显色法测定龙眼核水提取物、95%乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物等4种不同极性提取物的总黄酮含量,同时采用管碟法、最小抑菌浓度(MIC)法测定比较4种提取物的抗菌活性,并测定评价在二苯代苦肼自由基(DPPH自由基)体系、羟自由基体系、超氧阴离子自由基体系及抗脂质体过氧化体系中各提取物的抗氧化活性。结果表明：95%乙醇提取物的总黄酮含量最高,为(3.90±0.12)%,其抗菌活性也强于其他3种提取物,在质量浓度100mg/mL时,对大肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、白菜软腐菌、甘蓝黑腐菌7种菌的抑菌圈直径均达15mm以上,对各菌的MIC均≤100mg/mL;在不同的自由基体系中,4种提取物均对超氧阴离子自由基的清除作用相对较弱,但对清除DPPH自由基、清除羟自由基、抗脂质体过氧化均表现出较强的效果;以清除率达50%时所对应的样液质量浓度IC50作为指标比较发现4种提取物对3种自由基的的抗氧化作用由强到弱依次是水提取物、95%乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物,其中水提取物对这3种自由基的IC50分别为0.20、0.15、2.69mg/mL。可见,龙眼核的95%乙醇提取物适宜作为植物源抗菌剂,水提取物则适宜作为植物源抗氧化剂以深度开发利用。