鸡蛋清蛋白酶解肽的抗氧化活性

分别采用胃蛋白酶和碱性蛋白酶对鸡蛋清蛋白进行单酶和双酶水解,筛选得到水解度较高的鸡蛋清蛋白酶解产物Ⅰ(P-A)H,并对上述酶解产物依次进行超滤和树脂分离,得到高活性的组分ⅠF2。通过总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基(·OH)抗氧化评价体系,分析酶解产物Ⅰ(P-A)H和组分ⅠF2的抗氧化能力。结果表明:Ⅰ(P-A)H具有较强的总还原力和DPPH清除力以及显著的·OH清除能力;组分ⅠF2与酶解产物Ⅰ(P-A)H的抗氧化活性相比,其活性显著性提高。     

不同蛋白酶酶解河蚬产物的抗氧化活性研究

以河蚬为原料,采用Alcalase、Neutrase、Flavourzyme、Papain四种蛋白酶水解河蚬,考察不同酶酶解产物的抗氧化活性包括DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基(O-2·)清除能力、羟自由基(·OH)清除能力及还原力。研究发现,Alcalase2 h酶解产物DPPH自由基清除能力最佳,清除率为83.17%,Alcalase8 h酶解产物O-2·的清除率最高达到72.52%。Papain6 h酶解产物·OH清除效果最佳,清除率达83.86%,Papain 6 h酶解产物还原力最高,酶解产物OD700nm值为0.74。可见蛋白酶种类和酶解时间对河蚬酶解产物的抗氧化活性具有较大影响,且抗氧化活性指标不一样,不同的蛋白酶酶解河蚬产物的抗氧化活性也有较大差异。     

碱性蛋白酶酶解鸡蛋清抗氧化肽的分离纯化

用碱性蛋白酶水解蛋清制备酶解液,通过超滤、离子交换、凝胶层析等手段对鸡蛋清酶解液抗氧化肽进行分离纯化并用薄层层析检验其纯度。研究表明,鸡蛋清酶解液经超滤除去杂蛋白,经DEAE-52离子层析分离出5个组分,其中组分2的抗氧化活性最强,超氧阴离子半抑制(IC50)质量浓度为13.32mg/mL,纯化倍数为2.51,蛋白回收率为25.04%。组分2经Sephadex G-25葡聚糖凝胶进一步分离得3个组分,其中组分3超氧阴离子的清除活性最强,其IC50为5.63mg/mL,纯化倍数达到5.93,蛋白回收率为13.42%,经薄层层析检测为单点,说明蛋清抗氧化肽得到纯化。     

具有抗氧化活性乳清发酵物的组分分析

利用乳酸菌对乳清蛋白进行发酵,检测发酵物的抗氧化能力。以DPPH自由基清除率为指标,测得其对DPPH自由基清除率为66.95%,经5kDa超滤后,分级产物对DPPH自由基的清除率提高至79%。经Tricine-SDS-PAGE电泳分析可知,具有抗氧化活性的乳清肽相对分子量小于2kDa。对发酵产物的氨基酸分析发现,与抗氧化活性关系密切的疏水性氨基酸、芳香族氨基酸的含量占总含量的70.17%,表现出显著的抗氧化活性。同时,其营养成分丰富,富含人体所需的必需氨基酸,适宜作为功能性食品开发。     

鹿茸水提取物及其蛋白酶解物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

研究了鹿茸水提取物中非蛋白成分、粗蛋白酶解物及分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响．非蛋白成分和酶解物的分离分别采用HPLC法和超滤法．应用WST-8法检测各分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用高分辨质谱对非蛋白成分进行初步鉴定．结果显示,非蛋白成分对未经刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾细胞增殖的促进作用优于其分离组分,Fr．Ⅲ和Ⅳ对ConA诱导的脾淋巴细胞增殖有抑制作用,初步鉴定其为碱基和核苷酸的混合物．分子量大于10kDa的肽段,单独可刺激小鼠脾细胞增殖,且对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用．肽段分子量大小对其免疫调节活性影响较大,但并未呈现直接的相关性．肽的氨基酸组成、序列及构型等也是影响其活性的重要因素．     

不同酶水解泥鳅蛋白的特性研究

采用Alcalase 2.4 L、Protamex、Papain、PTN 6.0 S、Flavorzyme500 MG水解泥鳅蛋白,探讨了各种酶的酶解特性、产物营养组成和清除DPPH·活性的差异.结果表明,PTN 6.0 S和Papain酶解产物的蛋白质利用率、肽得率和水解度均较高.各酶解产物的谷氨酸、色氨酸、天冬氨酸的含量都很高;酶解产物中的氨基酸组成较原料泥鳅蛋白更接近FAO/WHO推荐的成人模式.各种酶均能降解泥鳅蛋白中分子量大于3000 Da的片断,产物中以分子量小于500 Da的肽段为主.Alacalase 2.4 L的酶解产物清除DPPH·的能力最强,其次为PTN 6.0 S酶解产物、Protamex酶解产物,而Flavorzyme 500 MG酶解产物清除DPPH·的能力最弱.     

五倍子醇提物的抗氧化活性

从还原力、清除DPPH自由基、清除超氧阴离子、清除羟自由基和抗脂质过氧化作用等方面研究了五倍子乙醇提取物的抗氧化活性,并同VC或VE进行比较。实验结果表明,五倍子提取物对以上测定方法均表现出明显的抗氧化活性,其抗氧化活性均随其浓度的增加而增强。五倍子提取物和VC(或VE)在同等浓度下,五倍子提取物的还原力和清除超氧阴离子的能力超过VC,清除DPPH自由基和清除羟自由基的能力低于VC,抗脂质过氧化的作用低于VE。五倍子醇提物有很高的抗氧化活性。     

林蛙脑蛋白酶解物抗氧化性研究

用木瓜蛋白酶对林蛙脑进行酶解,并以抗坏血酸为对照,测定林蛙脑蛋白酶解液清除DPPH.、羟自由基和过氧化氢的能力.结果表明:林蛙脑蛋白酶水解液对DPPH.、.OH和H2O2均具有清除作用,尤其对H2O2有较强的清除作用,且均随浓度增加而增强.林蛙脑蛋白酶解液在浓度达到25 mg/mL时,对DPPH.的清除率达67.8%;在浓度达到4 mg/mL时,对H2O2的清除率达91.62%;浓度在4 mg/mL时,对.OH的清除率为66.89%.这说明林蛙脑蛋白酶解液具有很好的抗氧化性.     

Purification and Identification of Antioxidant Peptides from the Scallop Skirts of Mimachlamys Nobilis

华贵栉孔扇贝裙边抗氧化活性肽的纯化与鉴定

王全富¹,王一帆¹,侯艳华¹ ,徐一凤¹,闫美宏¹,李昊远¹,刘远平²,李钰金³

（1哈尔滨工业大学（威海）,海洋科学与技术学院,山东 威海 264209,

2山东省海洋健康食品工程技术研究中心,山东 荣成 264300

3山东海洋功能食品发展联合实验室,山东 荣成 264300）

创新点说明：

1）本文利用含有丰富营养物质的加工副产物扇贝裙边进行了抗氧化活性肽的纯化相关研究。

2）本文利用多级纯化的方法与多种抗氧化活性评价方法测定了扇贝裙边抗氧化活性肽的分离与鉴定,最终获得了具有极高抗氧化能力的小分子生物活性肽。

3）本研究对于海洋生物活性肽的工业制备与实际生产开发与应用提供了重要的理论依据。

研究目的：

以华贵栉孔扇贝裙边为原料分离纯化得到抗氧化活性较高的生物活性肽。

研究方法：

利用5种蛋白酶酶解华贵栉孔扇贝裙边,筛选得到酶解液抗氧化能力最强的蛋白酶。以DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率与超氧阴离子自由基清除率为指标,利用超滤、凝胶柱层析、SDS-PAGE与反相高效液相色谱对扇贝裙边酶解液进行分离纯化,以获得高纯度抗氧化活性肽。利用质谱法鉴定最终纯化得到的抗氧化活性肽的分子量。

结果：

1）胰蛋白酶解扇贝裙边得到的酶解液的抗氧化活性最高,其DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率与超氧阴离子自由基清除率分别为75.6 %,79.5 %与76.7 %。

2）利用多级纯化得到的抗氧化活性肽命名为MNAP,其DPPH自由基清除率为85.7 %,质谱法测定MNAP的包含2个小肽,其分子量分别为2 855.6 Da与3 007.2 Da。

结论：

华贵栉孔扇贝裙边能够作为用于制备具有较强抗氧化能力的生物活性肽。

关键词：华贵栉孔扇贝;抗氧化活性肽;纯化;扇贝裙边;水解产物

     

栉孔扇贝裙边酶解物及其美拉德产物特性

以中性蛋白酶和木瓜蛋白酶为工具酶,制备栉孔扇贝裙边酶解物。研究了酶解物的水解度(DH)、肽分子质量分布、氨基酸组成、酶解物及美拉德产物清除DPPH自由基的能力。结果表明,加酶量3 000U/g,底物质量分数4%,酶解时间3h,经中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解获得的酶解物水解度分别达到了37.6%和19.2%。酶解物中的肽分子质量以3ku以下为主,其中木瓜蛋白酶水解产物占59.7%~67.6%,中性蛋白酶水解产物占64.5%~78.2%。随着酶解时间的延长,酶解物对DPPH的清除能力逐渐提高。经美拉德反应后,IC_(50)降低到酶解物的1/17~1/36,抗氧化能力显著提高。     

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根据《安徽建筑工业学院学报》２８８篇文章的引文数量、类型、语种的统计分析,从中看出《学报》作者利用专业文献的特点及规律,为图书情报部门做好文献服务工作提供了可靠的参考依据。     

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五种桉木制浆性能的比较

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