CPP(酷蛋白磷酸肽)新生产工艺研究

本文研究了高N／P(摩尔比)CPP的生产工艺。采用纳滤工艺生产所得CPP的N／P(摩尔比)为24-32，灰份含量在6％左右；N(氮)和P(磷)的得率分别为86．43％和99．60％。Sephadex—G15凝胶层析和HPLC分析结果表明纳滤能透过部分的氨基酸和短肽，从而改善CPP产品质量。     

中、高N/P(摩尔比)酪蛋白磷酸肽的生产工艺研究

确定了中、高N／P(摩尔比)CPP(酪蛋白磷酸肽)的生产工艺。采用纳滤工艺生产所得CPP的N／P(摩尔比)为24～32，灰分含量在6％左右；N(氮)和P(磷)的得率分别为86.43％和99．60％，Sephadex-G15凝胶层析和HPLC分析结果表明：纳滤能透过部分的氨基酸和短肽，从而改善CPP产品质量。用乙醇提取工艺生产所得CPP的N／P(摩尔比)为19-24，灰分含量为6．79％。该工艺的副产品NPP的灰分含量也很低，为4．42％。     

离子交换法制备酪蛋白磷酸肽

分别用阴离子树脂和阳离子树脂对酪蛋白磷酸肽（CaseinPhosphopeptide,简称CPP）初级品N/P(摩尔比r为7.52)进行纯化.采用阴离子树脂纯化CPP的回收率为P98.71％;N82.78％;高纯度CPP产品的r(N/P)为5.44.对阳离子树脂纯化CPP做了初步探讨,研究了不同pH对纯化效果的影响.在pH5.0的最优条件下,回收率P为81.85％,N为53.80％,r(N/P)为4.67.与阴离子树脂纯化CPP的过程相比,用阳离子树脂纯化CPP时,树脂在使用前无需转型处理,洗脱条件简单,从而大大地缩短了操作时间,并且提高了产品的浓度.     

生物活性肽—酪蛋白磷酸肽（CPP）的研制

摸索了2709碱性蛋白酶水解酪蛋白制备CPP的最佳工艺条件：底物浓度10%、用酶量1500u/g反应温度45℃、pH10.5、反应时间150min。采用选择沉淀法分离CPP,在pH4.5添加1.1?Cl2(w/v)和50%（v/v)乙醇,室温沉淀4h ,得到CPP产品的N/P、得率分别为6.39%和13.94%。     

酪蛋白磷酸肽新工艺及其体外功能性质

用Alcalase水解酪蛋白,用TNBS法监测酪蛋白的水解度(DH),运用纳滤技术改善产品质量;同时还研究了不同rN/rP(摩尔比)的CPP(酪蛋白磷酸肽)结合钙离子和亚铁离子的能力.结果表明,用Alcalase酶可以使酪蛋白的水解度(DH)达到16%～20%,TNBS法可以明显减少碱的引入,从而降低CPP产品的灰分含量.截留相对分子质量为150的纳滤膜可以适当的降低CPP产品的rN/rP,改善产品质量,而且能达到80%的总氮回收率;在DH为20%左右,rP基本上没有损失.该工艺适合于工业化生产较高rN/rP的CPP产品.rN/rP较低的CPP结合钙的能力好于rN/rP较高的CPP产品;CPP也可以抑制亚铁离子的沉淀.     

生物活性肽——酪蛋白磷酸肽(CPP)的研制

摸索了 2 70 9碱性蛋白酶水解酪蛋白制备CPP的最佳工艺条件 :底物浓度 1 0 %、用酶量 1 50 0U/g底物、反应温度 45℃、pH1 0 5、反应时间 1 50min。采用选择淀淀法分离CPP ,在pH 4 .5添加 1 1 ?Cl2 (w/v)和50 % (v/v)乙醇 ,室温沉淀 4h,得到CPP产品的N/P、得率分别为 6 39和 1 3 94%。     

两种酪蛋白磷酸肽阻止钙沉淀形成的比较研究

酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPP)是以牛乳酪蛋白为原料,含有成簇的磷酸丝氨酸的生物活性肽。本文通过比较两种不同氮磷摩尔比(N/P)的CPP样品抑制钙离子形成沉淀的功能以及pH值、温度和CPP浓度对其的影响,并与柠檬酸和木糖醇的协同作用进行比较研究。结果表明:CPP浓度是CPP作用效果的主要影响因素,pH值对CPP影响较大,其次是柠檬酸和木糖醇的添加。温度对CPP作用效果几乎没有影响;柠檬酸和木糖醇与两种CPP之间都有一定的协同作用并且两种CPP与柠檬酸的协同作用效果接近。且浓度越高,效果越好。在抑制金属离子沉淀,pH、CPP浓度和木糖醇协同作用上CPPⅡ的作用效果较好,但温度对其两者都没有影响。两种CPP样品都具有良好的功能性质,但氮磷摩尔比(N/P)低的CPPⅡ性质更优。本试验为我国研究开发富含CPP的功能性食品以及营养保健食品提供理论基础。     

Fe3O4@ZrO2磁纳米粒子在酪蛋白磷酸肽富集中的应用

本实验将制备好的Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子作为载体,对经胰蛋白酶消化后的酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptides,CPP）进行高效地选择性富集。实验以CPP的N/P（摩尔比）以及磁纳米粒子吸附量为评价指标,进行单因素实验以便选取较优的实验因素,分析酪蛋白水解度、吸附pH、吸附时间、吸附温度及肽溶液初始浓度这五个因素对Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子选择性吸附CPP的能力的影响,优化CPP富集的技术参数。结果表明,磁性材料最佳富集工艺系数为:酪蛋白的水解度为22%,反应pH=4.5,吸附温度为30 ℃,吸附时间为50 min,肽溶液初始浓度为50 mg/mL;在此条件下,可得到N/P（摩尔比）为4.87的CPP,磁纳米粒子的吸附量为94.37 mg/g,且用NaOH(pH13)溶液进行解析,CPP的洗脱率可达95%以上。综上,Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子呈现出优异的选择性富集CPP的潜力,对高质量高纯度CPP 的生产具有重要的指导意义。     

酪蛋白磷酸肽(CPP)持钙功能的研究

对用不同酶解工艺制得的CPP阻止磷酸钙沉淀的效果进行了测定和比较,在微碱性条件下,添加量相同时总的趋势是N/P值较小的CPP阻止磷酸钙沉淀形成的效果好于N/P值较大的CPP。同一产品的浓度越大阻止磷酸钙沉淀的效果越好,200×10-6的CPP 4可使溶液中的钙在1 h的反应时间内几乎不沉淀。     

酪蛋白磷酸肽(CPP)持钙功能的研究

本文对用不同酶解工艺制得的CPP阻止磷酸钙沉淀的效果进行了测定和比较,在微碱性条件下,添加量相同时总的趋势是N/P值较小的CPP阻止磷酸钙沉淀形成的效果好于N/P值较大的CPP。同一产品的浓度越大阻止磷酸钙沉淀的效果越好,200ppm的CPP4可使溶液中的钙在1小时的反应时间内几乎不沉淀。     

不同酪蛋白磷酸肽产品理化性质与持钙能力的相关性分析

为探究酪蛋白磷酸肽（CPP）产品性质对其持钙能力的影响，以市面上常见的7种酪蛋白磷酸肽产品为研究对象，测定了酪蛋白磷酸肽含量、氮磷含量及氮磷比（N/P）、分子量分布、氨基酸组成，并对其理化性质与持钙能力进行相关性分析。结果表明，7种产品的酪蛋白磷酸肽含量及N/P结果分别在1.30%~18.50%和12.70~46.80之间，氨基酸含量为70.50~901.00 mg/g，且主要以脯氨酸为主，分子量分布则集中在5000 Da以下（除7号样品）。以不同添加量（0.05、0.1、0.2 g/L）将7种酪蛋白磷酸肽产品加入到模拟反应体系中测定其持钙能力，发现1、2和6号产品的持钙能力较强，7号样品的持钙能力最差。将上述结果进行主成分分析（R1=0.674，R2=0.167），结果表明酪蛋白磷酸肽产品的分子量分布、氨基酸含量以及酪蛋白磷酸肽的含量与其持钙能力强弱存在一定的关联。进一步进行相关性分析发现，分子量>10 kDa的组分含量与酪蛋白磷酸肽样品的持钙能力强弱呈现极显著的负相关性（相关系数?0.985~?0.975，P<0.01），而分子量分布类似且异亮氨酸（相关系数0.766~0.768，P<0.05）和苯丙氨酸（相关系数0.758~0.759，P<0.05）含量较高的CPP样品中则表现更强的持钙能力。本研究为评价和提高酪蛋白磷酸肽产品质量提供了一定的理论依据。     

一株食源性单增李斯特菌镉、砷耐受基因的测序分析

酪蛋白磷酸肽（casein phosphopeptides,CPP）是以牛乳酪蛋白为原料,含有成簇的磷酸丝氨酸的生物活性肽。本文通过比较两种不同氮磷摩尔比（N/P）的CPP样品抑制钙离子形成沉淀的功能以及pH值、温度和CPP浓度对其的影响,并与柠檬酸和木糖醇的协同作用进行比较研究。结果表明：CPP浓度是CPP作用效果的主要影响因素,pH值对CPP影响较大,其次是柠檬酸和木糖醇的添加。温度对CPP作用效果几乎没有影响;柠檬酸和木糖醇与两种CPP之间都有一定的协同作用并且两种CPP与柠檬酸的协同作用效果接近。且浓度越高,效果越好。在抑制金属离子沉淀,pH、CPP浓度和木糖醇协同作用上CPPⅡ的作用效果较好,但温度对其两者都没有影响。两种CPP样品都具有良好的功能性质,但氮磷摩尔比（N/P）低的CPPⅡ性质更优。本试验为我国研究开发富含CPP的功能性食品以及营养保健食品提供理论基础。     

风干武昌鱼中鲜味肽的分离纯化及二级结构分析

采用电子舌测定鲜味,超纳滤、反相高效液相色谱从风干武昌鱼中分离纯化出纯度均一的鲜味肽,基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪、氨基酸自动分析仪、傅里叶变换红外光谱测定鲜味肽的分子质量、氨基酸组成和二级结构,探讨鲜味肽结构与风味的关系。结果显示：从风干武昌鱼中纯化得到了一种鲜味较强的肽P2a-2,其分子质量为1 304.59 Da。P2a-2的鲜味氨基酸谷氨酸（21.97%）、甘氨酸（10.67%）和丙氨酸（9.51%）比例较高,且助味氨基酸组氨酸的比例最高（27.54%）,β-转角为主要的二级结构（90.16%）,推断P2a-2呈现较佳鲜味与其高含量的鲜味氨基酸和β-转角相关。     

鳀鱼蒸煮液膜浓缩工艺研究及风味物质分析

采用微滤(MF)、超滤(UF)、纳滤(NF)组合膜浓缩技术进行鳀鱼蒸煮液营养风味物质的高效冷浓缩。结果表明:无机陶瓷微滤膜通量较高、浓缩时间较短,MF-NF工艺的蛋白质和氨基酸回收率分别为70.74%和39.83%～46.64%。MF截留液的蛋白质浓度提高3.30倍,腥味增强。NF截留液的氨基酸浓度提高2.71倍,其中谷氨酸和天冬氨酸含量分别增加了3.36倍和6.72倍,鱼腥味基本消失,蒸煮液的风味有效改善。MF-NF工艺比MF-UF-NF工艺经济简便可行,适合于鳀鱼蒸煮液船上浓缩。     

Cactus pear peel snacks prepared by instant pressure drop texturing: Effect of process variables on bioactive compounds and functional properties

Cactus pear (Opuntia ficus-indica) has a growing interest from both food manufacturers and consumers due to its medicinal and functional traits. Peel is a major waste from cactus pear juice industry accounting for about 38?% of the fruit weight. New concept of snacks preparation has been developed using instant controlled pressure drop (Détente instantanée controlee, DIC) techniques that provide a texturing stage between initial and final hot air drying stages. In this study, the application of DIC of cactus pear peel (CPP) was performed to be used as starch-free snacks with functional attributes. DIC resulted in high crispness CPP snacks with improved structural and nutritional attributes as well as high relative expansion ratio (up to 21 times). DIC expanded CPP snacks exhibited cutting force (3.34 N) that was much lower than untreated CPP (19.41 N). It is worth noting that optimized DIC treatment (P?=?0.6 MPa for t?=?15 s) allowed more availability of phenolic compounds and β-carotene by 83 and 551?%, respectively. In addition, antioxidant activity was increased up to 53?%. Results showed that steam pressure had significant effect on fat and alcohol insoluble solids (AIS) contents, wherein the correlation coefficients revealed critical relationships between structural and biochemical availabilities. Therefore, DIC could be used as an innovative technology to value this by-product leading to manufacture of crispy CPP snacks with high nutritious quality. There was a significant difference among the DIC treated and untreated CPP in respect to sensory properties, DIC treated CPP at operation conditions of saturated steam pressure?=?0.6 MPa and processing time?=?15 had the highest acceptability.     

膜分离与醇沉技术纯化猴头菇粗多糖的比较

研究膜分离和醇沉两种技术对猴头菇粗多糖分离效果及其抗氧化活性的影响。以猴头菇子实体为原料,通过热水浸提后分别用醇沉、纳滤、纳滤＋醇沉、微滤＋纳滤、微滤＋纳滤＋醇沉5 种方法得到猴头菇粗多糖,分别记为A-He P、B-He P、C-He P、D-He P和E-He P。比较5 种方法对猴头菇粗多糖的分离纯化效果、理化性质和抗氧化活性的差异。结果表明,微滤＋纳滤技术分离纯化效果较好,其粗多糖得率为10.08%,纯度为43.01%,提取液中80.34%的多糖得到保留。经傅里叶变换红外光谱分析,5 种工艺处理获得的粗多糖样品均具有典型的吡喃型葡聚糖和β-型糖苷键吸收峰。5 种处理获得的粗多糖样品中均含一定量的蛋白质,且B-He P的蛋白质量分数高于C-He P,说明微滤处理可以除去部分蛋白而提高多糖的纯度。还原力、·OH、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除结果表明,5 种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,且D-He P的抗氧化能力最佳。     

酪蛋白磷酸肽的体外功能试验

对不同级别的酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptide,以下简称CPP）促进钙吸收的体外功能性质进行了研究,测定了CPP的结合钙量、CPP阻止磷酸钙沉淀形成的效果及持钙能力.结果表明CPP对钙的结合量随温度的升高而减少,随pH值的升高而增加;CPP对阻止磷酸钙沉淀的作用随温度升高和溶液钙磷比增加而下降;随氮磷摩尔比降低,CPP阻止磷酸钙沉淀形成的最低有效浓度下降;对于不同的钙磷比,CPP的氮磷摩尔比越小,保持在溶液中的钙量越多,但每摩尔磷保持钙的摩尔数随氮磷摩尔比的降低而降低.