海参精囊水提物对模型小鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨海参精囊水提物对模型小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响及相关蛋白的表达情况。方法昆明种小鼠72只随机分为6组,除正常空白组用生理盐水外其他各组均腹腔注射环磷酰胺(CP,28mg/kg),每天1次,连续5 d,复制睾丸生精障碍小鼠模型;同时治疗组每天灌胃不同剂量的药物1次,连续4周。用TUNEL法检测各组小鼠睾丸生精细胞的凋亡情况;用免疫组化的方法检测Bcl-2和Bax的表达,并与模型组进行比较。结果海参精囊水提物能够抑制小鼠睾丸生精细胞的凋亡,使Bcl-2的表达增加,Bax的表达降低,与模型组比较有统计学意义(P0.05、0.01)。结论海参精囊水提物对环磷酰胺所致生精障碍模型小鼠的生精细胞凋亡有一定的抑制作用,其作用可能与调控Bcl-2和Bax的表达有关。     

外源性硫化氢对大鼠精索静脉曲张生精功能损伤的保护作用

目的探讨外源性硫化氢对大鼠精索静脉曲张(VC)生精功能损伤的保护作用。方法选取成年雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型组和外源性硫化氢组。外源性硫化氢组在VC模型成功建立基础上注射外源性H_2S[20 mg/(kg·d)]。采用HE染色观察睾丸组织病理改变;测定睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化(SOD)含量;采用原位缺口末端标记检测细胞凋亡指数;免疫组化检测睾丸组织中Bax和Caspase-3的表达情况;RT-PCR检测Bax和Caspase-3 mRNA表达水平。结果模型组可见各级生精细胞排列紊乱且广泛脱落等表现,Bax及Caspase-3表达、氧化应激水平和凋亡指数明显高于假手术组;与模型组比较,外源性硫化氢组Bax、Caspase-3表达水平及氧化应激水平和凋亡指数明显降低,各组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论外源性硫化氢可减轻氧化应激水平和抑制凋亡,从而对VC睾丸生精功能发挥保护作用。     

六味地黄汤抑制大鼠生精细胞凋亡及其促进精子发生

用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型,用六味地黄汤灌胃治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮分别为对照和阳性对照,TUNEL法检测实验各组大鼠睾丸生精细胞的凋亡情况,计数实验各组大鼠精子数量,考察实验各组大鼠精子的质量.结果表明,六味地黄汤各治疗组、阳性对照组大鼠的精子数量、精子爬高均与模型组有显著性差异(P<0.01),各治疗组大鼠的精子质量(活力)也显著优于模型组;各实验组大鼠睾丸凋亡的生精细胞明显少于模型组.由此显示,六味地黄汤复方可显著抑制大鼠睾丸生精细胞的凋亡,对生精障碍大鼠有显著的促进生精作用,并可显著提高大鼠精子的质量.     

葡萄籽原花青素对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞TM4细胞凋亡的影响

目的:研究葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对顺铂(cisdichlorodiamineplatinum (Ⅱ),cDDP)诱导小鼠睾丸支持细胞(TM4)细胞凋亡、细胞凋亡形态及凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法:体外培养正常TM4细胞,将实验细胞分为空白对照组、cDDP组(0.014 mg/mL)、GSPE(0.005 mg/mL)+cDDP组(0.014 mg/mL)、GSPE组(0.005 mg/mL)。流式细胞检测法测定GSPE对cDDP诱导TM4细胞凋亡率的影响,Hoechst染液染色法测定TM4细胞凋亡的形态学变化,Western blot蛋白免疫印迹法测定凋亡相关基因蛋白表达情况。结果:cDDP可显著增加TM4细胞凋亡,显著降低TM4细胞Bcl-2表达量以及处于酶原状态Pro-caspase3表达量,而明显增加TM4细胞Bax表达量,同时增加处于激活状态的Caspase-3表达量。GSPE可明显降低cDDP诱导的TM4细胞凋亡,降低Bax以及Caspase-3表达量,增加Bcl-2和Pro-caspase3表达...     

赤芝富硒蛋白对肝癌HepG2细胞的抑制作用

探究赤芝富硒蛋白对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、周期分布、侵袭、迁移能力的影响。选取人肝癌HepG2细胞,分为空白组、药物对照组、无硒赤芝蛋白组、低、中、高浓度组,检测六组细胞生物学行为及Bcl-2、Bax、caspase3表达。结果显示,高浓度组细胞增殖率低于其他各组,凋亡率高于其他各组,G1期细胞比例为58.66%,高于其他各组。高浓度组细胞侵袭、迁移数分别为28.21、29.66,低于其他各组(p0.05)。高浓度组细胞Bcl-2、caspase3表达分别为0.98、1.01,均低于其他各组;Bax表达为1.03,高于其他各组(p0.05)。使用赤芝富硒蛋白进行干预,能够影响肝癌细胞增殖、凋亡,阻滞细胞周期,抑制侵袭、迁移能力,调控Bcl-2、Bax、caspase3表达,说明赤芝富硒蛋白能够调控肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力,抑制肝癌HepG2细胞的发展和扩散,为肝癌的临床治疗提供一定的理论依据。     

甘草甜素调节U14宫颈癌小鼠免疫功能及诱导凋亡的作用

为探讨甘草甜素调节U14 宫颈癌小鼠免疫功能及诱导凋亡作用,将U14宫颈癌小鼠随机分为模型组、甘草甜素低、中、高剂量组（25、50、100 mg/kg）及环磷酰胺组（25 mg/kg）,另设正常组,每组10只;灌胃给药,1次/d,共21 d。测量各组小鼠瘤体积（最大直径）、瘤质量,计算胸腺指数、脾脏指数,TUNEL法检测细胞凋亡指数,实时定量PCR法检测Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA表达,Western Blot法检测p-PI3K、p-AKT蛋白表达等指标。结果发现,与模型组比较,甘草甜素低、中、高剂量组小鼠瘤体积（最大直径）及瘤质量显著降低（P<0.05或P<0.01）,抑瘤率分别为15.68%、25.41%和38.38%;与模型组比较,甘草甜素低、中、高剂量组小鼠胸腺指数、脾脏指数、IL-2、IFN-γ、TNF-α含量、凋亡指数、Caspase-3及Bax mRNA表达显著增加（P<0.05或P<0.01）,而Bcl-2 mRNA及p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著降低（P<0.05或P<0.01）。上述结果表明,甘草甜素具有抑制U14宫颈癌小鼠肿瘤生长的作用,该作用与改善免疫功能及诱导凋亡作用有关。     

饮用酒和食用酒精暴露诱导小鼠肝脏组织的损伤效应

探究饮用酒和食用酒精暴露诱导小鼠肝脏组织损伤的损伤效应及可能的分子机制。将30只雄性C57BL/6 J小鼠随机分为对照组、饮用酒处理组和食用酒精处理组,每组10只,灌胃结束后,检测各组小鼠肝脏组织中氧化应激(ROS、MDA、SOD)、自噬反应(LC3B、Beclin-1)和细胞凋亡(Bax、Bcl-2、P53)等相关因子表达。结果显示,与对照组相比,饮用酒处理组的活性氧自由基ROS活性增加,过氧化氢酶MDA水平上调,超氧化物歧化酶SOD水平降低;自噬相关因子Beclin-1和LC3B的表达增加;同时,抗凋亡基因Bcl-2表达降低,促凋亡基因Bax表达增加,Bax/Bcl-2的比值上调,抑癌基因P53的表达呈上升趋势;食用酒精处理组呈现相同的变化,且趋势更明显。结果表明,饮用酒暴露可能通过刺激小鼠肝脏组织氧化应激的发生,进而引起细胞自噬和凋亡;与饮用酒相比,食用酒精对小鼠肝脏组织的损害效应更为明显,提示饮用酒中某些物质可能对小鼠肝脏组织起到一定的保护作用。     

草苁蓉环烯醚萜苷对肝癌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

观察二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌组织的病理变化，探讨草苁蓉环烯醚萜苷（IGBR）对细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。将Wistar大鼠分为对照组、模型组、5-FU组及IGBR组。除对照组，各组大鼠第1天给予200 mg/kg DEN腹腔注射1次，而后给予饮用体积分数0.05%的DEN水溶液；5-FU组大鼠腹腔注射25 mg/kg 5-FU每周3次；IGBR组大鼠灌胃500 mg/kg IGBR每日1次。实验第12、20、28周末，分批处死动物，观察肝脏病理变化及细胞凋亡，免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果表明，与对照组比较，模型组细胞凋亡显著增加，胞质呈棕黄色，凋亡的肝细胞皱缩、核固缩及核仁消失；与模型组比较，5-FU组与IGBR组凋亡显著增多，差异有统计学意义（P <0.05），但两组间无显著差异（P >0.05）；Bax和Bcl-2阳性细胞主要分布于不典型增生灶和癌灶中，表达于胞浆；与模型组比较，5-FU组和IGBR组Bax表达明显增强，而Bcl-2表达明显减弱，差异有统计学意义（P <0.05），两组间无显著差异（P P>0.05）；模型组、5-FU组与IGBR组中Bax表达和Bcl-2表达均呈负相关（P <0.05）。IGBR可诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞增值，其机制可能与Bax蛋白增多和Bcl-2蛋白减少有关。     

淫羊藿生物碱对环磷酰胺引起的雄鼠生殖系统损伤的保护作用

目的:研究淫羊藿生物碱对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的保护机制。方法:首先，取40只昆明种雄性小鼠，随机分为空白组、淫羊藿生物碱低、中、高剂量组，考察淫羊藿生物碱对雄性小鼠是否具有生殖毒性；其次，另选40只昆明种雄性小鼠，注射环磷酰胺进行造模，并随机分为环磷酰胺组、环磷酰胺-生物碱低、中、高剂量组。造模成功后，除环磷酰胺组外，各剂量组小鼠灌胃给药30 d。末次给药后处死小鼠，测定不同组别小鼠附睾、睾丸及精子质量等相关指标。检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、睾酮和Bcl-2/Bax蛋白的含量。结果:淫羊藿生物碱对雄性小鼠没有生殖毒性作用。注射环磷酰胺后精子质量和睾丸活性明显下降，小鼠睾丸组织受损严重，证明造模成功。与环磷酰胺组比较，淫羊藿各剂量组给药后，小鼠附睾系数、睾丸系数得到显著提高（P<0.05），精子数量增加、精子活率增加、精子畸形率减少、睾丸组织中SOD活性增强、MDA含量降低、睾酮水平升高、Bcl-2/Bax蛋白的比值升高（P<0.05）。通过睾丸组织切片观察发现，睾丸组织损伤减轻。结论:淫羊藿生物碱对雄性小鼠生殖系统具有一定的保护作用。     

藏红花水提取物抑制人卵巢癌细胞HO-8910的增殖作用

本文研究了藏红花水提取物抑制HO-8910人卵巢癌细胞的增殖作用。将实验分为细胞组、藏红花水提物低剂量组（0.4 mg/L）、中剂量组（0.8 mg/L）、高剂量组（1.0 mg/L）,HO-8910细胞培养成功后,分别用不同浓度的藏红花水提物进行处理,检测卵巢癌细胞的增殖能力及细胞外调节蛋白激酶（ERK）、Bcl-2、Bax蛋白的含量。结果表明,在实验浓度范围内,随着藏红花水提物浓度的提高,卵巢癌细胞的增长率明显受到抑制,其中,高剂量组作用时,24 h、48 h、72 h的增殖率分别为14.13%、12.15%、和11.16%,显著低于其他各实验组（p<0.05）;另外,高剂量组藏红花水提物作用后,其对卵巢癌细胞的凋亡率以及对癌细胞侵袭能力的抑制率分别为20.11%和64.24%,其ERK、Bcl-2、Bax蛋白表达量分别为0.61、0.48和0.95,与其他实验组均具有显著性差异（p<0.05）。说明藏红花水提取物能够明显抑制卵巢癌细胞活性,降低卵巢癌细胞增殖能力及侵袭能力,其作用机制可能与ERK信号通路有关。     

苦荞茶多糖诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的线粒体机制

目的：从线粒体调控机制的角度探讨苦荞茶多糖（tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP）对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法：应用水提醇沉法结合超声辅助技术提取的TBTP处理A549细胞,分为空白对照组和不同质量浓度TBTP处理组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡水平,采用DHE和Mito SOX染色检测细胞和线粒体活性氧簇水平,采用JC-1染色检测线粒体膜电位变化,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、Bcl-2、剪切型半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、细胞色素c的水平。结果：TBTP呈剂量和时间依赖性抑制A549细胞增殖。TBTP处理A549细胞24 h可呈剂量依赖性地促进细胞凋亡。TBTP处理能够显著增加A549细胞和线粒体内活性氧水平,降低线粒体膜电位;同时,TBTP能够增加促凋亡蛋白Bax和剪切型Caspase-3的表达、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进A549细胞线粒体细胞色素c外流。结论：TBTP能够促进活性氧簇生成、降低线粒体膜电位,进而抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。     

破壁油菜花粉的抗氧化及抗衰老作用

目的:探讨破壁油菜花粉对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的抗氧化及抗衰老作用。方法:将48只小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、破壁油菜花粉高（560 mg/kg）、中（280 mg/kg）、低（140 mg/kg）组及V_C组。空白对照组每日腹腔注射生理盐水，其余各组每日腹腔注射D-半乳糖（120 mg/kg）诱导衰老模型，同时药物组灌胃高、中、低剂量破壁油菜花粉混悬液及V_C溶液，每周称重，连续6周后取小鼠的肝、脾、肾、胸腺称取脏器质量并计算脏器指数；生化法测定血清及肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的含量；HE染色观察衰老小鼠肝脏形态的改变；Western Blot检测衰老小鼠肝脏组织中Bax、Sirt1、p53蛋白表达。结果:与衰老模型组相比，破壁油菜花粉中、高剂量组能显著提高衰老小鼠体质量、胸腺、肝脏、脾、肾脏的脏器指数（P<0.05，P<0.01），显著升高小鼠血清及肝脏内SOD、CAT、GSH-Px含量，降低MDA含量（P<0.05，P<0.01），同时可以改善肝细胞肿大，使得肝脏组织中细胞凋亡蛋白Bax、促衰老蛋白p53的表达降低，抗衰老蛋白Sirt1的表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论:破壁油菜花粉可通过抗氧化，对抗细胞凋亡，调节衰老蛋白含量改善机体衰老。     

野生山核桃油对去卵巢大鼠抗氧化能力与海马细胞凋亡的影响

目的：观察野生核桃油对机体抗氧化能力及海马细胞凋亡的影响。方法：以去卵巢大鼠为老年动物模型,每日灌胃给予野生山核桃油(2.4、1.2、0.6g/kg),用放免法(RIA)检测血清雌二醇(E2)的含量;用生化法测定海马匀浆液总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)的水平;免疫组化观察海马齿状回Bcl-2与Bax的表达;Hoechst染色观察海马齿状回细胞的凋亡水平。结果：与青年鼠比较,去卵巢大鼠E2水平明显下降(P＜0.01),核桃油干预组大鼠随核桃油剂量增加血清T-SOD 活性明显增加;MDA含量均显著降低,海马齿状回细胞Bcl-2表达增加,Bax表达下降。海马齿状回细胞凋亡减少。结论：野生山核桃油能减少去卵巢大鼠海马细胞的凋亡,对海马细胞有保护作用,其作用机制可能与提高机体的抗氧化能力、调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达有关。     

枸杞多糖对顺铂诱导人胚肾细胞凋亡的影响

目的：研究枸杞多糖(LBP)对顺铂(CDDP)所致人胚肾细胞(HEK293)凋亡的影响,并探讨其可能机理。方法：体外培养HEK293,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法观察LBP对CDDP诱导HEK293细胞生长的影响,流式细胞仪检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡率的变化：Western blotting检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果：LBP能够拮抗CDDP诱发的细胞毒性,并且随着质量浓度的不同而产生变化。 流式细胞仪检测表明随着LBP质量浓度的增加,细胞凋亡率随之减少;Western blotting表明,加入LBP后能够使Bax基因的表达减少而Bcl-2基因的表达增加。结论：LBP对CDDP诱导人胚肾细胞凋亡有抑制的作用,其作用机理可能与其下调Bax及上调Bcl-2蛋白表达有关。     

桦木酸对T-2毒素诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨桦木酸(betulinic acid,BA)对T-2毒素致小鼠肝脏损伤的保护作用及其分子机制.方法:选取60只成年雄性昆明小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、4?mg/kg?mb?T-2毒素组、0.25?mg/kg?mb?BA+T-2组、0.5?mg/kg?mb?BA+T-2组、1?mg/kg?mb?BA+T...     

葡萄籽原花青素对顺铂诱导人胚肾细胞凋亡的拮抗作用

目的： 探讨葡萄籽原花青素（ g r a p e s e e d p r o a n t h o c y a n i d i n , G S P E ） 对顺铂（cis-diamminedichloroplatinum,CDDP）诱导人胚肾细胞HEK293凋亡及相关凋亡基因的影响,并探讨可能的机制。方法：体外培养正常HEK293细胞,噻唑蓝法测定GSPE、CDDP分别对HEK293细胞生长的影响以及GSPE对CDDP诱导HEK293细胞毒性的保护作用,流式细胞仪测定GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡率的变化,Western blotting测定GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果：GSPE对CDDP所致HEK293细胞毒性具有拮抗作用,可减轻CDDP所致HEK293细胞凋亡,减弱Bax表达、增强Bcl-2表达。结论：GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡具有拮抗作用,其机制可能与GSPE降低促凋亡基因Bax,升高抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

羊肚菌多糖抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和诱导细胞凋亡研究

以黑脉羊肚菌多糖为原料,研究羊肚菌多糖对人乳腺癌细胞MDA-MB-231（以下简称MDA）增殖和凋亡的影响。结果表明：在无细胞毒性范围内,羊肚菌多糖能显著抑制人乳腺癌细胞MDA的增殖,半数有效浓度（median effective concentration,EC50）值为0.096 mg/mL,同时人乳腺癌细胞MDA表现出多种细胞凋亡的形态学变化。免疫印迹检测实验结果显示,羊肚菌多糖能抑制B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达,促进Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达,同时增加Bax/Bcl-2蛋白表达比值,并呈现出剂量依赖效应。说明羊肚菌多糖能抑制人乳腺癌细胞MDA增殖,促进细胞凋亡。     

Regulation of apoptosis in the atresia of dominant bovine follicles of the first follicular wave following ovulation

During atresia of bovine follicles, granulosa cells are lost through the controlled form of cell death, apoptosis. The purpose of this study was to characterize the regulation of apoptotic death of granulosa cells in dominant bovine follicles during the first wave of follicular development. Dominant follicles were collected from Holstein heifers on days 4, 6 or 8 of the first follicular wave (n = 5/day). Regulation of apoptosis in granulosa cells was examined by annexin V and propidium iodide staining; measurement of relative levels of mRNA encoding Bcl-2, Bcl-xL and Bax; and activity of caspase-3, -8 and -9. Steady-state levels of mRNA encoding four oxidative stress-response proteins were determined. Compared with day 4, the incidence of apoptotic and nonviable granulosa cells tended to increase on day 6, and numbers of nonviable cells were higher on day 8. The ratios of relative levels of mRNA encoding Bcl-2 to Bax and Bcl-xL to Bax were higher on day 6 than days 4 and 8. Activity of caspases-3 and -9 in granulosa cells did not change among the 3 days, while caspase-8 activity decreased on day 8 compared with days 4 and 6. Amounts of GSHPx, MnSOD and Cu/ZnSOD mRNA in granulosa cells were higher on day 8 than day 6. In theca interna, amounts of Cu/ZnSOD mRNA decreased between days 4 and 6. From the decreased production of estradiol and increased numbers of apoptotic and nonviable granulosa cells, we conclude that atresia of the dominant follicle is initiated between days 4 and 6 of the first follicular wave. However, apoptosis of granulosa cells does not appear to be initiated by changes in expression of oxidative stress-response proteins.