蛋白酶抑制剂对纯生啤酒泡沫稳定性的影响

在纯生啤酒中加入灵芝真菌蛋白酶A抑制剂，可明显提高纯生啤酒的泡沫稳定性，对其感官指标、理化指标等都不会产生影响。（孙悟）     

蛋白酶抑制剂对纯生啤酒泡沫稳定性影响

纯生啤酒因未经巴氏灭菌而残留一些酶类,其中具有活性的蛋白酶A及非活性的蛋白酶A前驱物的存在会直接或间接地破坏纯生啤酒的泡沫蛋白,从而使纯生啤酒的泡沫稳定性降低。通常情况下,纯生啤酒中PrA的含量为10^-3TU～10^-5TU。纯生啤酒中蛋白酶A的含量与泡沫稳定性之间有着直接的关系,蛋白酶A及其前驱物的总量决定着降解成品啤酒中泡沫蛋白的综合能力。当蛋白酶A的含量大于10^-4TU时,纯生啤酒的泡沫稳定性就会受到较大的影响。本实验采用热水抽提、乙醇分级沉淀等步骤从灵芝真菌中分离提取一种特异性的蛋白酶抑制剂,用于抑制纯生啤酒中PTA的活性。实验表明,一定条件下,抑制率达75％。在成品纯生啤酒中添加适量的蛋白酶A抑制剂可使纯生啤酒的泡沫稳定性明显提高。     

酿酒酵母蛋白酶A作用机理及影响因素研究综述

蛋白酶A是酿酒酵母体内一种重要的蛋白酶,参与液泡中多种酶的加工和成熟.它分泌到细胞外,会破坏纯生啤酒的泡沫蛋白,是影响纯生啤酒泡沫稳定性的主要因素之一.本文从蛋白酶A的基本特性、形成及作用机制、活性的检测以及改变或降低纯生啤酒中蛋白酶A活性的途径等方面叙述了蛋白酶A的研究进展,为纯生啤酒泡沫稳定性的改善提供理论支持,为解决目前啤酒行业普遍存在的纯生啤酒泡沫衰减问题提供参考.     

蛋白酶A与纯生啤酒泡沫稳定性及蔗糖转化酶的关系研究

纯生啤酒的泡沫稳定性衰减问题已成为其质量保证的难题.本研究通过外加蛋白酶A、温度梯度热处理研究啤酒残留蛋白酶A酶活和啤酒泡沫的稳定性、蛋白酶A专一抑制剂梯度处理后蛋白酶A残留酶活与对应啤酒泡沫稳定性相关性分析.结果袁明,纯生啤酒的蛋白酶A酶活高低直接决定纯生啤酒的泡沫稳定性.通过戴安离子色谱法检测仪器,建立了检测单位时间内蔗糖的转化效率为基础的蔗糖转化酶酶活的评价方法,该方法可以定量评价啤酒经过温瓶温度处理的强度,为鉴别纯生啤酒提供了定量检测方法.     

酿酒酵母蛋白酶A的生化特性及生物学功能

酿酒酵母蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的关键因素。由于纯生啤酒的广阔市场前景,对酵母蛋白酶A的研究越来越受到国内外研究者的关注。本文从蛋白酶A的结构、分泌、成熟、激活机制、催化机制、对啤酒泡沫的破坏作用以及酿造过程中蛋白酶A活性的变化等方面综述了蛋白酶A的研究进展,希望能为解决纯生啤酒泡沫稳定性问题提供理论参考。     

纯生啤酒泡沫稳定性的衰减规律研究

目前,市售的纯生啤酒在泡沫稳定性方面普遍存在明显的缺陷,即泡沫稳定性差,并随着货架时间的延长而逐渐下降。有的纯生啤酒存放一个月以后,其泡持性几乎衰竭。纯生啤酒泡持性的衰减主要是由成品啤酒中残留的活性蛋白酶A造成的。真正的纯生啤酒常常会因未经巴氏灭菌而残留一些酶类,其中蛋白酶A会破坏啤酒泡沫蛋白,从而使纯生啤酒的泡沫稳定性降低。本研究旨在寻找货架期间纯生啤酒泡沫稳定性衰减的一般规律,探究引起纯生啤酒泡沫稳定性衰减的根本原因,并提出相应的控制措施。     

啤酒中蛋白酶A的研究进展

蛋白酶A(EC 3.4.23.6)来源于啤酒酵母,由于其能破坏啤酒中的泡沫蛋白,从而大幅度降低啤酒泡沫稳定性,因而引起酿造者的研究兴趣。在中国,随着“纯生热”的不断升温,纯生啤酒的泡沫稳定性问题越来越受到生产厂家和研究者的关注。本文从酿造过程中蛋白酶的来源、蛋白酶A的生化特性、蛋白酶A的检测、蛋白酶A在发酵过程中的变化、蛋白酶A与泡沫稳定性关系以及降低蛋白酶A活性等六方面对国外蛋白酶A研究进展做一综述。     

纯生啤酒存放过程中泡沫稳定性与酵母蛋白酶A以及蛋白含量与组成变化的研究

酵母蛋白酶A已经被证实对啤酒泡沫稳定性有负面作用。通过测定纯生啤酒存放过程中酵母蛋白酶A活性变化、泡持性衰减及蛋白含量的变化,进一步说明酵母蛋白酶A以及蛋白种类与含量对纯生啤酒泡沫稳定性的影响及其相互关系。对不同存放时期纯生啤酒样品中蛋白质进行电泳鉴定的结果显示,存放3月后的纯生啤酒中脂肪转运蛋白1(LTP1)完全消失,这一结果表明LTP1是影响啤酒泡沫稳定性的主要蛋白,该蛋白降解可能是酵母蛋白酶A作用的结果。     

蛋白酶A对纯生啤酒泡持性的影响研究

该文研究蛋白酶A活力对纯生啤酒泡持性的影响,同时建立初始成品纯生啤酒及过滤前发酵液蛋白酶A活力限量值。结果表明,随着贮存时间的延长,纯生啤酒蛋白酶A活力和泡持值均呈下降趋势,最终残留蛋白酶A活力是影响其货架期泡持值的主要因素。纯生啤酒泡持值与蛋白酶A活力呈显著负相关（P＜0.01）。为了保证成品纯生啤酒在货架期内泡沫稳定性,发酵液出罐滤酒前的蛋白酶A活力应＜24×10-5 U/mL,相应成品纯生啤酒初始蛋白酶A活力应＜15×10-5 U/mL。该内控标准能为纯生啤酒生产企业控制泡持性提供指导。     

蛋白酶 A 与纯生啤酒泡沫稳定性的关系研究

纯生啤酒的泡沫稳定性衰减问题已成为其质量保证的难题,同时也是国际啤酒业的研究重点。然而国内外没有直接的文献证明残留在成品啤酒中的蛋白酶 A 是影响纯生啤酒泡沫质量的关键因素。本研究首次系统地通过一系列试验,包括外加蛋白酶 A、温度梯度的热处理后检测残留蛋白酶 A 酶活和一定储存期后啤酒泡沫稳定性的相关性分析;蛋白酶 A专一抑制剂梯度处理后蛋白酶 A 残留酶活与对应啤酒泡沫稳定性的相关性分析。试验结果证实了纯生啤酒的蛋白酶 A 酶活高低直接决定纯生啤酒的泡沫稳定性。同时通过不同温度梯度处理对啤酒蛋白酶 A 及蔗糖转化酶活力的影响研究结果表明,蔗糖转化酶对温度升高的抵抗力比蛋白酶 A 稍强,在蛋白酶 A 的活力降低到某种限度时,蔗糖转化酶仍保留部分的酶活。     

纯生啤酒的泡沫稳定性及原因分析

利用中国国标测定方法,分析比较市场上销售的普通熟啤酒和纯生啤酒的泡沫稳定性,跟踪其在3个月货架期的泡沫稳定性的变化。结果表明,在3个月的货架期内,熟啤酒泡沫稳定性变化不大,纯生啤酒的泡沫稳定性随时间逐渐下降;贮藏条件对泡沫稳定性有影响,贮藏温度越高,纯生啤酒泡沫稳定性下降越快;对全国啤酒市场上的不同品牌的纯生啤酒进行了泡沫稳定性的跟踪检测,表明泡沫稳定性差是纯生啤酒的共同问题;蛋白酶A是导致纯生啤酒泡沫稳定性问题的关键因素。     

工业化酿造过程中酵母分泌蛋白酶A的规律及影响因素的研究

对啤酒工业化规模发酵过程中酵母分泌蛋白酶A的规律进行了探讨,对酵母代数及酵母贮存条件等因素对酵母分泌蛋白酶A的影响进行了研究,并对蛋白酶A活性不同的成品纯生啤酒的泡持值、泡沫活性蛋白含量及蛋白酶A活性进行了跟踪分析。结果表明:发酵过程中,蛋白酶A的活性呈上升趋势且接种酵母的蛋白酶A活性越高,与其对应的发酵液中蛋白酶A的活性越高,成品酒的泡沫稳定性越差。另外,随着酵母代数及贮存时间的增加,酵母分泌蛋白酶A的量增加。当酵母蛋白酶A活性控制在0.015U/m L以下且成品酒的初始蛋白酶A活性在15×10-5U/m L以下时,储存4个月的成品纯生啤酒的泡沫稳定性较好。     

无外源基因引入的蛋白酶A缺失的下面发酵酵线菌株的构建

酵母蛋白酶A有PEP4基因编码，它的存在是造成纯生啤酒泡沫稳定性下降的直接原因，本研究通过PER介导的基因敲除技术．分剐得到PEP4单等位基因和双等位基因缺失株。根据基因的剂量效应，二者的预计蛋白酶活分别为出发茸株的50％～60％和0％。该二菌株不舍任何外源基因和质粒，安全性能高，是潜在的适合在纯生啤酒生产中应用的低蛋白酶A和无蛋白酶A活性的菌株，也是提高纯生啤酒泡沫稳定性的直接解决方案，     

纯生啤酒泡沫稳定性的影响因素及改善策略

简要介绍了纯生啤酒泡沫稳定性的主要影响因素———泡沫阳性蛋白和酵母蛋白酶A对啤酒泡沫的影响及影响机理,并简要介绍了改善纯生啤酒泡沫的主要策略。     

啤酒发酵过程中影响蛋白酶A分泌的因素

纯生啤酒中残存的蛋白酶A严重影响泡沫稳定性,制约了纯生啤酒的质量提升。为了探索啤酒发酵过程中影响蛋白酶A分泌的因素,作者分别考察了菌种、酵母生理状态、酵母代数、麦汁浓度、发酵时间等对蛋白酶A分泌的影响。结果发现,蛋白酶A分泌量高的菌株,处于稳定期之后的酵母、较高的酵母代数、较高的原麦汁浓度和在发酵阶段末期都会导致发酵液中蛋白酶A活性偏高。建议在实际生产中,采用蛋白酶A分泌量少的菌种、调整酵母生理状态、使用小于3代的酵母、采用18°P以下的麦汁发酵和尽早结束发酵都会对降低蛋白酶A的分泌量起到积极作用。     

温瓶处理对纯生啤酒泡沫稳定性的影响研究

在温度不断提高的情况下，纯生啤酒中蛋白酶A及蔗糖转化酶的活力都呈下降趋势，但蔗糖转化酶对温度升高的抵抗力比蛋白酶A强，在蛋白酶A失活的临界点，蔗糖转化酶仍能保持约35％的活力。实验发现，在灌装过程中，对成品纯生啤酒采用60℃、2．5min的“温瓶”处理，可在部分保留蔗糖转化酶活力的同时，将蛋白酶A的活力降低到最低限度，有效地防止纯生啤酒泡沫稳定性的衰减。温瓶操作既可保持纯生啤酒的新鲜度，又可防止其泡持性的衰减。     

无外源基因引入的蛋白酶A缺失的下面发酵酵母菌株的构建

酵母蛋白酶A有PEP4基因编码,它的存在是造成纯生啤酒泡沫稳定性下降的直接原因。本研究通过PCR介导的基因敲除技术,分别得到PEP4单等位基因和双等位基因缺失株。根据基因的剂量效应,二者的预计蛋白酶活分别为出发菌株的50%～60%和0%。该二菌株不含任何外源基因和质粒,安全性能高,是潜在的适合在纯生啤酒生产中应用的低蛋白酶A和无蛋白酶A活性的菌株,也是提高纯生啤酒泡沫稳定性的直接解决方案。     

蛋白酶A与啤酒蛋白的相互作用

蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的重要原因。本文利用相关蛋白质分析技术,SDS—PAGE电泳、HPLC技术和疏水色谱技术,研究蛋白酶A与啤酒蛋白质的相互作用。结果表明,蛋白酶A破坏的并不是某个分子量的啤酒泡沫蛋白,而是通过分解啤酒中疏水蛋白,从而降低了啤酒的泡沫稳定性。     

蛋白酶A与啤洒蛋白的相互作用

蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的重要原因。本文利用相关蛋白质分析技术,SDS—PAGE电泳、HPLC技术和疏水色谱技术,研究蛋白酶A与啤酒蛋白质的相互作用。结果表明,蛋白酶A破坏的并不是某个分子量的啤酒泡沫蛋白,而是通过分解啤酒中疏水蛋白,从而降低了啤酒的泡沫稳定性。     

啤酒发酵过程中蛋白酶A的分泌及其与泡沫稳定性的关系

泡沫稳定性严重影响了纯生啤酒的质量。本文考察了蛋白酶A活性与泡沫稳定性的关系,结果显示二者呈明显负相关的关系。同时考察了影响蛋白酶A分泌的因素,结果发现,蛋白酶A分泌量高的菌株、处于稳定期之后的酵母、较高的酵母代数、较高的原麦汁浓度、发酵阶段末期、较低的酵母活力和较高的酵母死亡率都会导致发酵液中蛋白酶A活性偏高。因此在实际生产中,采用蛋白酶A分泌量少的菌种、调整酵母生理状态、使用小于3代的酵母、采用18°P以下麦汁发酵、尽早结束发酵、提高酵母活力、降低酵母死亡率都会对减少蛋白酶A的分泌量起到积极作用.