硒蛋白和过氧化氢酶清除羟自由基作用的研究

在甲基紫-Fe~(2+)-H_2O_2体系中,试验得到最佳测定条件:缓冲溶液用量为1.0 mL、甲基紫用量为3.5 mL、Fe~(2+)用量为3.0 mL和H_2O_2加样量为2.5 mL。采用紫外可见分光光度法研究富硒食用菌中硒蛋白和过氧化氢酶对羟自由基的清除作用。结果表明:硒蛋白清除羟自由基的能力明显高于相同浓度的无机硒和蛋白质,且清除率随着各自加入量的增加而相应增加;硒蛋白和过氧化氢酶对清除羟自由基具有一定的协同作用,为富硒食品的合理开发和利用提供了一定的参考依据。     

茉莉花丙酮提取物的体外抗氧化作用研究

研究了茉莉花丙酮提取物的体外抗氧化活性及清除自由基的能力,通过测定其在Fe~(3+)氧化体系的抗氧化能力以及用Marklund法和邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法测定其对O_2~-·和羟自由基及DPPH的清除能力。结果表明茉莉花丙酮提取物对Fe~(3+)氧化体系有较强的抗氧化性能,并具有一定的清除O_2~-·、·OH和DPPH·自由基的能力。     

瑶山甜茶提取物抗氧化性能的化学发光检测

基于分级膜分离对瑶山甜茶干叶浸提液进行纯化,获得分子质量分布范围不同的5种水溶性组分。采用Fe~(2+)-H_2O_2-Luminol体系及邻苯三酚-Luminol体系化学发光法分别检测各组分对羟自由基(·OH)及超氯阴离子(O_2~-·)的清除能力,并以Vc作为对照比较各组分的抗氧化性能。结果表明:瑶山甜茶提取物的分子质量分布范围对其抗氧化能力有较大的影响,其水溶性抗氧化活性片断的分子质量在5～10ku范围内。     

空心莲子草皂苷类物质功能特性研究

对空心莲子草皂苷体外抗氧化作用和防腐作用进行了研究。利用ABTS体系、Fe~(2+)-H_2O_2体系和邻苯三酚自氧化体系测定皂苷对ABTS自由基、羟自由基和超氧自由基的清除作用,利用滤纸片法测定了空心莲子草皂苷的防腐特性。结果发现,对ABTS自由基的清除能力随着皂苷浓度的增加而增加,低浓度的空心莲子草皂苷对羟自由基具有促进作用,但随着皂苷浓度的增加开始具有清除作用并且其清除作用与皂苷浓度具有剂量效应关系,但是对超氧自由基,随着浓度的增加其清除率先增加而减小。空心莲子草皂苷类物质对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、黑曲霉和根霉有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌、苏云金杆菌和啤酒酵母没有抑菌效果。     

茄子皮红色素抗氧化活性研究

目的:研究茄子皮天然红色素体外抗氧化活性;方法:以抗坏血酸为对照,以Fenton反应产生羟自由基(·OH),肾上腺素自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O-2·)为试验模型,采用紫外分光光度法和荧光分析法,测定茄子皮红色素对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除作用;结果:茄子皮红色素对上述自由基均有清除作用,时羟自由基和超氧阴离子自由基清除效果比抗坏血酸好,清除过氧化氢能力弱于抗坏血酸;结论:茄子皮红色素具有明显清除自由基的作用.     

三叉苦提取物抗氧化作用的研究

目的:研究三叉苦不同部位水提取物的抗氧化作用及其规律,为食品或药物抗氧化剂的筛选和应用提供理论依据。方法:应用化学发光法检测三叉苦的各部位水提取物对邻苯三酚 -CTMAB 体系产生的超氧阴离子自由基(O2·)、邻菲罗啉 - 抗坏血酸体系产生的羟自由基(·OH)及过氧化氢(H2O2)的清除作用。结果:三叉苦水提取物具有明显的清除超氧阴离子自由基、羟自由基和过氧化氢的作用,清除率与浓度之间存在着明显的量效关系。结论:证明了三叉苦各部位的水提取物均是一种有效的抗氧化剂。     

八角茴香醇提物的抗氧化活性研究

采用羟自由基(·OH)体系、NO_2~-体系及超氧阴离子(·O_2~-)自由基体系对八角乙醇提取物的不同极性部分进行了抗氧化活性的测定。结果表明,八角乙醇提取物的不同极性部分均具有一定的抗氧化活性,且抗氧化活性与其加入量呈正相关。在羟自由基(·OH)体系中,95%乙醇相优于VC的清除效果;在NO_2~-体系中,石油醚相与VC的清除效果相当。对超氧阴离子(·O_2~-)自由基的清除率顺序:VC95%乙醇相氯仿相石油醚相丙酮相。     

铁皮石斛多糖提取及对羟自由基诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用

以酶解超声提取法提取铁皮石斛多糖,通过对料液比、超声时间、复合酶质量分数的单因素试验和正交试验,确定铁皮石斛多糖的最佳提取条件;以高效液相色谱法对铁皮石斛多糖进行组成成分分析;以香豆素-3-羧酸荧光法测定铁皮石斛多糖的羟自由基清除能力;以噻唑蓝实验和细胞流式实验研究铁皮石斛多糖提取物对SH-SY5Y细胞的保护作用。结果表明,最优铁皮石斛多糖提取条件为料液比1∶100(g/mL)、超声时间2 h、复合酶(纤维素酶和果胶酶1∶1等质量混合)质量分数50%,最优提取条件下铁皮石斛多糖得率为25.69%,其主要单糖组分为甘露糖和葡萄糖。在质量浓度为20～80μg/mL范围内铁皮石斛多糖提取物能有效清除Cu~(2+)催化H_2O_2产生的羟自由基并有效抑制SH-SY5Y细胞的凋亡(凋亡率从56.97%下降到17.97%),且其作用效果成质量浓度依赖性。因此,铁皮石斛多糖可通过清除羟自由基从而抑制Cu~(2+)催化H_2O_2产生羟自由基诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。     

刺参多糖清除活性氧保护线粒体的研究

本文采用酶解法(胃蛋白酶与胰蛋白酶)提取刺参多糖(Stichopus japonicus polysaccharides,SJP),以硫酸苯酚法测定多糖含量并研究其清除活性氧保护线粒体的作用机制。以Fe~(2+)-Vit C系统诱发肝线粒体脂质过氧化,以丙二醛(MDA)为指标测定SJP对脂质过氧化的影响;测定SJP的还原力及其对Fe~(2+)的螯合作用;以H_2O_2-Fe~(2+)体系为羟自由基(·OH)生成系统,测定SJP清除·OH的能力;用滴定法测定SJP清除过氧化氢(H_2O_2)的能力;用氮蓝四唑(NBT)法测定SJP清除超氧阴离子(O_2·~-)的能力。研究表明:SJP可抑制MDA生成;SJP具有一定的还原力和较弱的Fe~(2+)螯合作用;另外,SJP能在一定浓度范围内明显清除·OH、H_2O_2和O_2·~-。SJP能通过抗氧化、清除活性氧(ROS)来保护线粒体,具有保护机体的功效,这是SJP保护线粒体的可能机制。     

α-乳白蛋白酶解物体外抗氧化及活性氧清除作用

以α-乳白蛋白为原料,研究其酶解产物的体外抗氧化活性及对HepG2肝细胞(人肝肿瘤细胞株)氧化损伤的保护作用。以ABTS(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzyhiazoline-6-sulfpnic acid))自由基清除率、Fe~(2+)螯合能力和羟自由基清除能力为指标,分析了水解产物的抗氧化活性;以DCFH-DA(dichlorofluorescin diacetate)荧光探针所产生的荧光强度为指标,探究了水解产物对HepG2肝细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的清除作用。结果表明,与α-乳白蛋白相比,α-乳白蛋白酶解物表现出较强的ABTS自由基清除能力、Fe~(2+)螯合能力和羟自由基清除能力;利用质量浓度0.25~2.0 g/Lα-乳白蛋白酶解物孵育细胞12 h,对H_2O_2诱导的HepG2肝细胞内ROS水平上升的抑制率达到78.61%。     

菟丝子总黄酮提取工艺及其抗氧化活性

采用响应面法优化菟丝子中总黄酮的提取工艺。在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间为自变量,总黄酮得率为因变量,运用Box-Behnken设计-响应面优化菟丝子中总黄酮回流提取工艺。并通过菟丝子总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用来评价其抗氧化活性。结果表明:菟丝子总黄酮最佳提取工艺条件为乙醇浓度90.0%、提取温度70℃、料液比1:15 g/mL、提取时间100 min。在此条件下,菟丝子总黄酮得率为(34.65±0.02) mg/g,与模型预测值(34.37 mg/g)相对误差为0.81%,说明回流提取菟丝子总黄酮的工艺稳定可靠。菟丝子总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的IC₅₀分别为0.067、7.209、0.119 mg/mL,抗坏血酸对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子的IC₅₀分别为0.082、1.731、0.054 mg/mL,体外抗氧化试验结果表明,菟丝子总黄酮对DPPH自由基具有较强的清除能力,明显高于抗坏血酸;而对羟自由基、超氧阴离子具有一定的清除能力,但清除能力低于同浓度的抗坏血酸。     

纳米二氧化铈化学发光抑制法测定抗坏血酸

基于抗坏血酸抑制纳米二氧化铈-过氧化氢-鲁米诺体系的发光强度,建立流动注射化学发光法检测抗坏血酸含量的新方法。考察过氧化氢浓度、鲁米诺浓度、纳米二氧化铈质量浓度及pH值对发光强度的影响。在优化条件下,该方法对抗坏血酸检测的线性范围为0.001～1.0 mg/mL（r = 0.983 1）,检出限（3 σ）为0.2 ng/mL,对质量浓度为1.0 mg/mL的抗坏血酸进行11 次平行测定,相对标准偏差为2.9%。该法已成功用于水果、果汁和蔬菜中抗坏血酸含量的测定,方法简单、灵敏、快速。     

东北林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性研究

以抗坏血酸(VC)为对照,采用邻苯三酚自氧化法、邻二氮菲-Fe氧化法、DPPH法和总抗氧化能力测定林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性。结果表明:林蛙皮精制多糖对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基均有不同程度的清除能力,当多糖浓度为0.1mg/mL时,多糖的总抗氧化能力为1.48mmol/g。随着林蛙皮多糖浓度的增加,抗氧化能力均进一步提高,说明林蛙皮精制多糖具有良好的抗氧化活性。     

扁桃斑鸠菊叶酵素发酵过程中理化性质分析、抗氧化能力评价及对氧化应激细胞防护作用研究

以扁桃斑鸠菊叶为原料制备酵素,监测发酵过程中理化指标的变化,通过ABTS+自由基、羟基自由基清除能力考察其发酵过程中抗氧化能力变化,并利用人正常肝细胞（WRL-68）模型考察其对氧化应激的保护作用。结果表明:对比酵素第2和第55 d,pH从4.24±0.01降至3.46±0.07,可溶性蛋白质、总糖、总酚、总黄酮含量呈下降趋势,分别从0.95±0.02、244.94±4.89、6.05±0.03、0.37±0.01 mg/mL降至0.71±0.02、34.26±0.57、3.42±0.21、0.08±0.01 mg/mL。总酸含量呈上升趋势,从0.15±0.01提高至0.95±0.01 mg/mL。在第2~28 d,抗坏血酸含量从25.36±0.52提高至28.44±0.01 μg/mL,随后呈下降趋势;ABTS+自由基清除能力在第18 d最强,为73.72%±0.86%,第28 d羟基自由基清除能力最高,为54.14%±0.43%,且ABTS+自由基、羟基自由基清除能力和总酸含量呈显著正相关性（P<0.01）;WRL-68细胞经H₂O₂处理造模后,酵素处理组的胞内ROS显著降低（P<0.05）,胞内抗氧化系酶SOD、CAT、GSH-Px活提高。综上,扁桃斑鸠菊叶酵素在发酵中期具有较强的清除自由基能力,且经酵素预处理后WRL-68细胞抵御氧化应激的能力提高。     

费约果叶片总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

对费约果叶片总黄酮的提取工艺和抗氧化活性进行了研究。结果表明:费约果叶片总黄酮最佳提取工艺为温度50℃、料液比1∶30(g∶mL)、提取时间50 min和甲醇体积分数70%。根据最佳提取工艺,重复3次得到总黄酮量分别46.89、44.51、48.27 mg/g,具有稳定性和可操作性;另外,通过半抑制浓度IC50衡量费约果叶片总黄酮提取物抗氧化活性,其抗脂质过氧化能力(IC500.275 mg/mL)和DPPH.自由基的清除能力(IC500.798 mg/mL)均优于抗坏血酸(IC500.643、IC500.917 mg/mL),而超氧阴离子自由基的清除能力(IC500.774 mg/mL)和羟自由基的清除能力(IC500.278 mg/mL)均弱于抗坏血酸(IC500.537I、C500.275 mg/mL)。     

生姜与醋泡姜抗氧化、抑菌和抗肿瘤活性比较研究

本文研究了生姜和醋泡姜的姜油和姜乙醇提取物的抗氧化、抑菌和抗肿瘤作用的活性差异。以抗坏血酸为对照,评价两类姜提取物的抗氧化活性(DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基(·OH)清除能力和总还原能力);以96孔板微量稀释法比较了两类姜提取物对几种常见致病菌的抑菌活性;同时研究了两类姜提取物对HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、Skov3(卵巢癌细胞)等肿瘤细胞的抗癌效果。结果表明:醋泡姜的抗氧化活性总体上好于生姜,其中醋姜油对羟自由基(·OH)的清除能力(IC₅₀为0.28 mg/mL)明显强于生姜油(IC₅₀为0.42 mg/mL);生姜和醋泡生姜提取物都有一定的抑菌作用,醋姜油的抑菌效果稍好于生姜油,其中最好的是醋姜油对金黄色葡萄球菌的抑制作用(156.25 μg/mL);抗肿瘤活性基本相当。本研究结果表明,醋泡姜在抗氧化、抑菌功能上一定程度优于生姜。     

石榴皮提取物体外抗氧化活性比较研究

研究石榴皮提取物的体外抗氧化作用。采用羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(.O2-)、2,2-二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)的生成体系,研究石榴皮提取物及绿茶多酚、没食子酸为对照,对自由基的清除能力和对小鼠肝组织匀浆脂质过氧化抑制作用。结果表明:石榴皮提取物对羟自由基、超氧阴离子、DPPH.的半清除率分别为I:C50=71.37 mg/mL、SC50=557.55 mg/mL、DC50=31.98 mg/mL;没食子酸对这3种自由基的半清除率分别为I:C50=51.85 mg/mL、SC50=289.2 mg/mL、DC50=37.65 mg/mL;绿茶多酚对这3种自由基的半清除率分别为:IC50=66.67 mg/mL、SC50=1043.91 mg/mL、DC50=22.48 mg/mL。石榴皮提取物对小鼠肝组织匀浆的脂质过氧化半抑制率EC50=5.21 mg/mL、没食子酸半抑制率EC50=22.82 mg/mL、绿茶多酚半抑制率EC50=3.47 mg/mL。研究表明石榴皮提取物较没食子酸和绿茶多酚具有良好的清除自由基及抑制脂质过氧化的能力。石榴皮提取物能有效清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH.自由基,抑制脂质过氧化作用,具有进一步研究和开发价值。     

响应面法优化超声辅助提取荠菜多酚工艺及其抗氧活性研究

采用超声辅助提取荠菜多酚,并利用响应面法对多酚的提取工艺进行了优化。在单因素实验的基础上,采用四因素三水平的响应面试验优化设计,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度和料液比对荠菜多酚提取量的影响,结果显示最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为48%,超声提取时间为27 min,提取温度为57 ℃,料液比为1:33 (g:mL),得到多酚提取量的实验值为28.33 mg/g,与模型预测值(28.35 mg/g)相比,其相对误差为0.07%。通过体外自由基(·OH、O₂-·和NaNO₂)清除能力和还原能力评价了荠菜多酚的抗氧化性,结果显示荠菜多酚具有一定的自由基清除活性和还原能力,荠菜多酚的自由基(·OH、O₂-·和NaNO₂)半数抑制浓度(IC₅₀值)分别为(0.17±0.01) mg/mL、(0.08±0.01) mg/mL和(18.9±0.02) μg/mL。结论:荠菜多酚是一种天然的抗氧化活性剂和自由基清除剂。     

发芽时间对糙米糖蛋白抗氧化能力的影响

为了明确发芽时间对糙米糖蛋白含量及抗氧化性能的影响,本研究将糙米分别发芽12、24、36、48、60、72 h、84、96 h,考察发芽糙米中的糖蛋白对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除能力、铁离子还原能力和抗亚油酸氧化能力的影响,以抗坏血酸为阳性对照,研究发芽时间和糙米糖蛋白浓度与抗氧化能力的相关性。结果发现,糙米发芽84 h时,4 mg/mL的糖蛋白有最佳的抗氧化能力。此时,糖蛋白对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力优于抗坏血酸,清除率分别为99.49%和99.39%;对DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力和抗亚油酸能力稍弱于抗坏血酸,清除率为88.11%,吸光度值分别为2.06和0.211。糙米糖蛋白的抗氧化能力受发芽时间和样液浓度的影响,发芽时间与DPPH自由基、羟自由基的清除率和抗亚油酸氧化能力呈极显著正相关(P<0.01),与铁离子还原能力呈显著正相关(P<0.05);糖蛋白浓度与超氧阴离子清除率,铁离子还原能力和抗亚油酸氧化呈极显著正相关(P<0.01)。     

芸豆肽的抗氧化活性研究

采用Sephadex-G50 凝胶柱层析分离具有强抗氧化活性的小分子芸豆肽,以VC 为对照,研究3 种肽分离组分的还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力。结果表明：随着相对分子质量的减小和肽质量浓度的增加,其还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力逐渐增大;小分子芸豆肽(C 组分)的还原能力低于VC;对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的半清除质量浓度分别为2.301、2.553、1.386mg/mL。该小分子肽组分的相对分子质量主要集中在100～1000,该组分疏水性氨基酸含量为36.78%,其疏水值达到364.73 kcal/mol。说明小分子肽组分的抗氧化活性与其氨基酸种类和组成、相对分子质量分布密切相关。