双水相萃取芡实多糖工艺研究

目的:探究聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取芡实中多糖成分的最佳条件。方法:以双水相系统的相比、分配系数、收率等为参数,探究了聚乙二醇(PEG)的相对分子质量、PEG的质量分数以及硫酸铵质量分数对芡实多糖在两相系统中的分配行为的影响。结果:萃取最佳条件为PEG分子量为6 000、硫酸铵质量分数为20.6%、PEG6000质量分数为15.7%。结论:聚乙二醇/硫酸铵双水相提取方法可减少加工过程中对多糖成分的破坏。     

响应面法优化黑胡萝卜红色素双水相萃取工艺

采用聚乙二醇（PEG）/硫酸铵双水相体系萃取纯化黑胡萝中的花青素。通过单因素实验考察了硫酸铵、PEG6000、粗提液的质量分数对花青素选择性系数和萃取率的影响,并以花青素的萃取率为响应值,结合响应面试验优化萃取工艺。结果表明,各因素对萃取率的影响程度由大到小依次为硫酸铵质量分数>粗提液质量分数>PEG6000质量分数。以双水相体系的总质量为基准,实验最佳萃取条件为:硫酸铵质量分数为20.0%、粗提液质量分数为12.0%、PEG6000质量分数为14.0%,黑胡萝卜红色素的平均萃取率为94.17%。此萃取方法得到的黑胡萝卜红色素具有一定的抗氧化活性,对DPPH自由基清除能力的IC₅₀值为30.51 mg/L。     

发芽糙米多糖双水相萃取工艺优化及其抗氧化活性

以发芽糙米为原料,采用超声波辅助双水相法萃取对发芽糙米多糖的分配系数进行研究,多糖得率作为考察目标,通过正交试验确定超声波辅助双水相萃取发芽糙米多糖的最佳提取工艺条件。结果表明:发芽糙米多糖最优提取工艺为选用PEG6000、PEG6000添加量15.7%、硫酸铵添加量14.8%、萃取时间40min,该条件下多糖得率为81.07%。并采用DPPH法、邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲法检测提取的多糖抗氧化活性。研究发现发芽糙米多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基以及羟基自由基均有较强的抗氧化作用。     

双水相体系萃取纯化紫甘蓝色素

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵双水相体系萃取纯化紫甘蓝中的花青素。通过单因素实验优化了硫酸铵、PEG、粗提液的质量分数和体系的pH,通过正交实验确定各因素对花青素选择性系数的影响程度,粗提液的质量分数 pH硫酸铵的质量分数 PEG的质量分数。实验最佳提取条件为:粗提液的质量分数为12%,硫酸铵质量分数为20%,pH为3.5,PEG的质量分数为15%,花青素的选择性系数为750.26。     

应用双水相萃取技术提取双孢蘑菇多糖的研究

利用双水相系统来提取双孢菇多糖,研究了双孢菇多糖在双水相系统中的分配不同和不同双水相系统对分配比的影响,确定了提取双孢菇多糖的双水相系统中PEG和硫酸铵的最佳配比,并和用乙醇沉淀法提取双孢菇多糖进行了横向比较,得出一个最佳的提取双孢菇多糖的方法。实验结果表明:当PEG6000浓度为16.5%,硫酸铵浓度为21.4%时,多糖的分配系数K可达2~2.35,收率Y可达51%~59.7%。     

PEG/(NH4)2SO4双水相体系萃取杏鲍菇多糖

采用PEG/(NH4)2SO4双水相体系萃取杏鲍菇多糖,研究了PEG的分子量、硫酸铵的浓度及PEG的浓度三个因素对杏鲍菇多糖在双水相系统中的分配系数和收率的影响,结果表明：当PEG4000浓度为21.33%,硫酸铵浓度为14%时,多糖的分配系数可达1.9529~2.0152,收率可达60.58~62.82,从而得出一种萃取杏鲍菇多糖的方法。     

双水相萃取韭籽粕多糖的工艺优化及其抗氧化活性研究

为研究双水相萃取法提取韭籽粕多糖的效果,采用聚乙二醇-硫酸铵双水相体系提取韭籽粕多糖并探讨韭籽粕多糖的抗氧化活性.通过单因素实验和Design Expert 8.06响应面试验优化萃取工艺条件,得到优化工艺参数为聚乙二醇相对分子质量6000,聚乙二醇质量分数14.50％,硫酸铵质量分数20.46％,在此条件下多糖的萃取...     

双水相体系萃取分离葡萄籽多糖

采用Plackett-Burman (PB)试验、最陡爬坡试验、响应面设计法对双水相萃取分离葡萄籽多糖的条件进行优化.首先,采用Plackett-Burman设计从影响萃取率的5因素中筛选出PEG质量分数、硫酸铵质量分数和萃取温度3个显著影响因素.在此基础上,通过最陡爬坡试验逼近最大萃取率区域,然后通过响应面组合试验对显著因素进行优化.得到最佳萃取条件为:PEG2000质量分数为8.92％、(NH4)2SO4质量分数为16.41％、萃取温度为38℃,萃取率可达55.1％,与预测值56.075％接近.     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

乙醇-硫酸铵双水相体系萃取坛紫菜多糖

探究不同系线长度的乙醇-硫酸铵双水相体系对坛紫菜多糖萃取的影响。采用浊点滴定法绘制乙醇-硫酸铵双水相相图,选取不同系线长度体系,测定其对紫菜多糖分配情况。结果表明：在乙醇质量分数27%、硫酸铵质量分数18%（即系线长度为40）、体系相比R为1.1时,紫菜多糖的回收率可达79.8%,分配系数K为0.23;其蛋白去除率明显高于传统醇沉法（双水相萃取多糖蛋白含量为1.20%,醇沉多糖蛋白含量为6.17%）,且具有较好的脱色效果,可用于紫菜多糖的分离纯化。     

双水相法萃取分离猪胰α-淀粉酶体系的初步研究

采用聚乙二醇(PEG1500)/硫酸铵[(NH4)2SO4]双水相体系对猪胰α-淀粉酶分离条件进行了研究。探讨PEG质量分数、p H值和(NH4)2SO4质量分数对猪胰α-淀粉酶在PEG1500/(NH4)2SO4双水相中的分配系数Ka及萃取率Y的影响,并通过正交试验优化双水相萃取条件。结果表明,在p H值为7.0,PEG1500质量分数为18%,(NH4)2SO4质量分数为12%的双水相体系中,α-淀粉酶的分配系数Ka为8.48,萃取率Y为80.25%,α-淀粉酶活为1 690 U/m L。     

双水相萃取法分离纯化金针菇子实体多糖

根据双水相萃取原理,探讨了乙醇-硫酸铵双水相体系对金针菇多糖的分配途径,并对该体系的双节线数据进行拟合,确定出拟合度高且参数较少的双节线方程:y=-5.83-64.76×0.95x,R~2=0.999 1。以金针菇多糖萃取率为指标,研究系线长度、硫酸铵质量分数、乙醇质量分数对金针菇多糖的萃取效果。结果表明:在乙醇质量分数为24%、(NH_4)_2SO_4质量分数为21%时,系线长度为47.36,多糖在下相的分配系数为10.57,多糖的萃取率可达92.24%。该法简单高效,可用于金针菇多糖的分离纯化。     

PEG/Na_2SO_4双水相萃取木瓜蛋白酶的研究

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸钠(Na2SO4)双水相体系对木瓜蛋白酶进行分离提取。考察各成相试剂及pH对木瓜蛋白酶活性的影响,研究体系中不同相对分子量PEG、硫酸钠和PEG的质量分数、pH、酶添加量等因素对木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的影响,采用响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件,并进行了实验室规模的放大。结果表明:Na2SO4的质量分数对分配行为的影响极显著,其次是PEG的质量分数,pH对分配行为的影响不显著。当两相体系中PEG的相对分子量为6000,质量分数为16.0%、Na2SO4质量分数为18.0%、pH7.0、酶添加量为1.0mg/g时,木瓜蛋白酶在两相体系中的分配系数最高可达3.1,可获得木瓜蛋白酶活性回收率82.6%。实验证明:响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的条件是可行的,可用于实际预测。     

响应面法优化植物乳杆菌素的双水相萃取条件

采用聚乙二醇/硫酸铵双水相体系研究发酵上清中植物乳杆菌素的萃取条件.通过单因素试验考察不同PEG分子质量、PEG浓度、硫酸铵浓度、离子强度等对细菌素纯化系数及萃取率的影响.在此基础上,用响应面法对系统进行优化.试验结果表明,植物乳杆菌素萃取的最佳条件为PEG4000-硫酸铵体系,PEG 18%,硫酸铵20%、氯化钠1%,萃取pH 3.75.     

响应面法优化黑豆酯酶的双水相萃取工艺

采用双水相萃取技术对黑豆酯酶进行分离纯化,优化黑豆酯酶在聚乙二醇4000/硫酸铵双水相体系中的分配行为。首先,制作PEG4000/(NH4)2SO4双水相相图;然后考察PEG4000质量分数、(NH4)2SO4质量分数、萃取体系p H值3个因素对黑豆酯酶萃取率的影响;最后采用Box-Behnken中心组合试验设计对黑豆酯酶双水相萃取工艺进行优化,确定最佳工艺条件为:PEG4000质量分数为28%、萃取体系p H为7.30、(NH4)2SO4质量分数为17%。此条件下黑豆酯酶萃取率为(93.95±0.24)%,黑豆酯酶酶比活力达到7.893 U/mg。与粗酶液纯度相比,黑豆酯酶双水相萃取工艺提纯倍数为7.363倍。该结果为黑豆酯酶的提纯和进行有机磷农药残留的检测提供科学依据。     

灰树花漆酶的双水相萃取及酶学性质

研究双水相萃取法分离灰树花漆酶。以PEG6000/(NH4)2SO4作为成相系统,通过单因素试验研究酶液添加量、PEG6000质量分数、(NH4)2SO4质量分数和体系pH对灰树花漆酶萃取效应的影响,并通过正交试验确定最佳萃取条件,同时进行纯化漆酶的酶学性质研究。结果表明,在pH为6时,PEG6000/(NH4)2SO4双水相萃取的最佳条件为:酶液添加量5%,PEG6000质量分数25%,(NH4)2SO4质量分数17%,此时漆酶的分配系数和酶活收率分别高达7.6和96.6%。纯化漆酶的最适反应温度和最适pH分别为45℃和2.97,在30~45℃和pH 3.5~5.0之间具有很好的稳定性。金属离子Cu2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+、K+、Ca2+对漆酶酶活有促进作用,其中Cu2+和Mg2+的促进作用最显著,而Co2+、Fe2+、Na+对漆酶酶活有抑制作用,其中Fe2+的抑制作用最明显。     

双水相萃取地皮菜中藻蓝蛋白的研究

采用单因素实验和正交实验法对双水相萃取纯化地皮菜藻蓝蛋白技术进行优化。研究PEG1000/硫酸铵体系中PEG1000含量、硫酸铵含量及离子强度对地皮菜藻蓝蛋白纯化的影响,以回收率为检验指标,确定了双水相萃取纯化地皮菜藻蓝蛋白的优化条件。结果表明,通过正交实验发现3种因素对地皮菜藻蓝蛋白回收率的影响大小依次为硫酸铵>氯化钾>PEG1000;并得到最优组合：双水相体系总质量为20 g,加入藻蓝蛋白粗提液5 g时,PEG1000质量分数为14%、硫酸铵质量分数为15%、氯化钾质量分数0.5%,得到藻蓝蛋白纯度为0.302,回收率为96.43%。     

双水相萃取法提取米糠脂肪酶研究

该实验采用双水相萃取法提取米糠脂肪酶,通过确定米糠脂肪酶最佳提取条件,为日后大规模生产提供理论依据。用蒸馏水对米糠脂肪酶粗提取实验,通过单因素实验确定最佳提取工艺参数:料液比1∶15,提取温度40℃,提取pH 7.0,提取时间1 h。双水相萃取对粗酶液纯化实验,对影响双水相萃取各种因素进行探讨,并通过正交实验优化提取条件,于PEG浓度22.5%,硫酸铵浓度20%,pH 7.0条件下进行双水相萃取,脂肪酶纯化倍数最高。     

响应面分析法优化麦麸酯酶双水相萃取的条件

研究采用聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取麦麸酯酶,通过单因素实验考察不同PEG分子量、PEG浓度、无机盐种类、无机盐浓度、pH和离子强度对麦麸酯酶总蛋白分配系数、酶活回收率、纯化倍数的影响,并通过响应面分析法优化了萃取条件。结果表明最佳萃取条件为:PEG1000质量浓度为21%、(NH4)2SO4质量浓度为18%、pH4.4。回归方程预测双水相萃取纯化倍数可达到2.9208,三次验证实验的平均纯化倍数为2.9190,与预测值相对误差为0.06%。     

TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。