胆红素氧化酶产生菌的选育及发酵工艺条件的研究

对胆红素氧化酶产生菌的菌和选育进行了研究。以科研室保藏菌种Mv9201为出发菌株，通过紫外线、硫酸二乙酯单独处理和复合诱变，从353株突变株中筛选出一株高产菌株MyrotheciumverrucariaMv9352，并对其产酶条件进行了研究。以20％的土豆汁（含0．25％的葡萄糖和蛋白胨）为发酵培养基，初始pH6～7，摇床转速为140～160r／min，24～26℃培养96h，酶活力可达4．0～4．5u／ml，比出发株的产酶能力提高近4．5倍。     

尿苷菌种选育及发酵条件优化

以野生型枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）TJ374为出发菌株,根据代控制发酵原理,采用DES（硫酸二乙酯）及UV（紫外）诱变处理,定向选育出一株尿苷产生菌Tc142（2TU。＋6AU％UP^-）,在培养基未经优化的情况下产尿苷2．3-2．4g／L。同时,考察了培养基对菌株产苷的影响,在优化的培养基中发酵积累尿苷3．4g／L,最高可产尿苷3．6g／L。     

L－脯氨酸产生菌的选育

以嗜乙酰乙酸棒杆菌ＡＴＣＣｌ３８７０为出发菌株，经硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和亚硝基胍（ＮＴＧ）逐级诱变处理，结构类似物定向选育，获得一株Ｌ－脯氨酸高产菌ＺＱ－３（ＳＧｒ、Ｓｕｃｇ、ＤＨＰｒ）。在含１６％葡萄糖的培养基中，摇瓶发酵７２ｈ，产酸率为５．３％～５．５％。     

木糖发酵高产2,3-丁二醇菌株的选育

以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)CICC10011为出发菌株,进行紫外诱变选育。通过2,3-丁二醇抗性和产酸能力对诱变菌株进行初筛,发酵后23,-丁二醇产量检测进行复筛,获得6株高产2,3-丁二醇的肺炎克雷伯氏菌,其中产量最高的一株诱变菌U3-17,与出发菌株相比,产量提高了21.5%。在摇瓶批式补料发酵中,诱变株U3-17的23,-丁二醇产量达49.3 g/L。     

抗老化啤酒酵母的选育

以无锡轻工大学生物工程学院保藏的一株啤酒酵母为出发菌株，经紫外线诱变及蛋氨酸连续驯养后，选育得到一株抗老化性能较为优良的菌株Ｍ４．在１ｍ３发酵罐中的中试结果表明，与出发菌株相比，其羰基化合物（ＴＢＡ）含量降低１９．１％，谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量增加２９．６％．在不改变其它生产条件的情况下，啤酒风味稳定性提高９２％，工业应用前景良好。     

无蒸煮生淀粉糖化酶霉菌的选育

从23份土样中筛选出105株野生型霉菌，其中有10株具有较高的糖化生淀粉的能力，尤以A－4（Ⅱ）、C和E6 3株菌酶活力最高，分别达112562，825．1和825．1个酶活性单位；对C株菌进行紫外光诱变，从诱变后的菌株中筛选出有较大正向突变的两株菌株C（1）和C（5），与诱变前相比，C（1）菌的生淀粉糖化酶活力提高了27．3％，经生淀粉酒精发酵试验，相同条件下酒精度提高了22．4％；C(5) 的生淀粉糖化酶活力提高了12．1％，酒精度提高了5．97％。     

快速发酵面包酵母菌株的选育

对出发菌株进行紫外-氯化锂复合诱变，通过初筛、复筛选育出高麦芽糖发酵力、低葡萄糖阻遏的面包酵母菌株BM-72，该菌株在不加糖、低糖面团中均表现出较好的发酵力，分别高于出发菌株19．4％和7．3％。     

—株耐高温α-淀粉酶产生菌的诱变选育

以一株耐高温α-淀粉酶产生菌DG-4为出发菌株，通过紫外线（UV）诱变，得到菌株DG-4—4，酶活提高了20．4％；通过硫酸二乙酯（DES）诱变，得到菌株DG-4—46，酶活在UV诱变基础上提高了61．9％，比初始出发菌株DG-4提高了95．0％。     

产纤维素酶细菌的微波诱变及产酶条件的研究

以实验室保藏的产纤维素酶芽孢杆菌S（3）7为出发菌,对其进行微波诱变处理,采用透明圈法初筛和液体摇瓶发酵复筛,得到一株产纤维素酶活力较高的突变菌株S（3）7-5。对该突变菌株的产酶条件进行研究,结果表明,突变菌株最适产酶条件为：发酵温度37℃,起始pH9．0,发酵时间4d。在此条件下,该突变菌株所产纤维素酶活最高,达52．55U／mL,比出发菌株的产酶活力提高了26．6％。     

低双乙酰啤酒酵母的选育

以两株青岛啤酒酵母ｃ－０２和ｃ－０３为出发菌株，经紫外线诱变后挑出甲磺隆抗性菌株，经过实验室菌种分离、筛选、发酵及双乙酰驯养等步骤选育出一株②＃菌，１２°Ｐ麦汁经１０００Ｌ小罐１１℃低温发酵，双乙酰峰值为０．３５ｍｇ／Ｌ，主酵结束双乙酰为０．１３ｍｇ／Ｌ，成品啤酒双乙酰为０．０６ｍｇ／Ｌ，成品啤酒真正发酵度６５．６％，凝聚性指标Ｆ值为４８．４％，啤酒风味基本不变。     

L-异亮氨酸菌种选育及发酵条件优化

以栖糖蜜棒杆菌（Corynedacterium melassecola）ATCC17965为出发菌株。根据代谢控制发酵原理。经硫酸二乙酯和60^Co诱变处理。定向选育出一株L-异亮氨酸产生菌131-5（SG^r＋LeuME^r＋Leu＋AHV^r＋Suc^g＋Eth^r）。在培养基未经优化的情况下产L-异亮氨酸14-15g／L．同时，考察了培养基及发酵每件对茼株产酸的影响，在优化的培养基和发酵条件下积累L-异亮氨酸19．2g／L．最高时可迭21．3g／L．     

高清除自由基能力保加利亚乳杆菌ZS-2的诱变选育

分别对保加利亚乳杆菌ZS-2（LZS-2）进行紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变及复合诱变，测定了突变株无细胞提取物清除DPPH自由基的能力。从诱变后的菌株中筛选出了3株对DPPH自由基清除率较高的乳酸菌UV2—6，UV5—4和D30—UV3—1。结果表明，保加利亚乳杆菌ZS-2分别经过紫外线诱变、DES、复合诱变后，选育出的突变菌株无细胞提取物对DPPH自由基清除率为56．43％，55．77％和55．60％，比出发菌株的清除率都提高了9％以上。     

耐高温耐高酒度醋酸菌突变株的选育

以从高温季节发酵良好的醋醅中，分离筛选出的N9、F17两株醋酸菌为出发菌株，经紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变，分别获得编号为HNl5、HF6两株耐高温耐高酒度醋酸菌株。在培养温度40℃，培养基酒度12％（V／V）条件下，HN15酒精转化率为75％，HF6酒精转化率为70％。     

纳他霉素高产突变种的选育

纳他霉素是一种广泛应用于食品、药品的抗真菌剂。本文以GM04（streptomyces gilvosporeus）为出发菌株，经紫外线和微波诱变处理，直接用抗性平板初筛，通过连续多代诱变选育出一株正向突变株，经旋转摇床300r／min、29℃发酵90h，纳他霉素产量达2．78g／L。     

L-色氨酸高产菌的选育及其发酵条件的研究

以谷氨酸棒杆菌AS1542为出发菌株，经过硫酸二乙酯诱变和紫外原生质体诱变，定向选育出一株稳定的色氨酸生产菌T11－6，该菌株具有苯丙氨酸、酪氨酸双重营养缺陷及对氟苯丙氨酸、5-甲基色氨酸、6-氟色氨酸三种结构类似物抗性遗传标记。对T11－6的发酵条件进行了研究，引进均匀设计理论，以微机为辅助手段，确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产色氨酸的优化配比。在最佳条件下，摇瓶产酸平均达10．01g/L。     

L-谷氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究

采用黄色短杆菌（Brevibacterium flavum)T1为始发菌株，根据代谢控制发酵原理，利用紫外线、硫酸二乙酯进行诱变，定向选育出具有寡霉素抗性、谷氨酸氧肟酸盐抗性的温度敏感突变株TM106。然后，以温度敏感突变株TM106和产酸率高（10．5％以上）的天津短杆TG961为亲株。通过原生质体融合技术，成功地选育出了产酸率高的融合子CM021，并且该菌株系温度敏感型菌株，可用于谷氨酸强制发酵。在摇瓶条件下，产酸达13.6g/dI；在6m^3发酵罐上进行中试，产酸达14．6g/dI，转化率达62％。     

冬枣果酒酵母的紫外诱变选育研究

以冬枣发酵液中筛选的酿酒酵母菌TN9#为出发菌株,进行紫外诱变选育。采用TTC筛选培养基对诱变产生菌株进行初筛,杜氏管产气测试,CO2失重法考察发酵速率,对糖与酒精的耐受性进行复筛,得到一株优良的冬枣果酒专用酵母TN91#菌株。TN91#菌株在发酵周期内酒精度为12．8％vol,比出发菌株提高了14．3％,且该菌株在起酵速度及增加果酒品质方面都有提高。     

多重抗药性突变株中α－淀粉酶高产菌株选育

以解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｅｆａｃｉｅｎｓ）Ａ－４为出发菌株，经诱变处理，选育多重抗药性突变株。研究结果表明，抗药性突变株α－淀粉酶产量提高的正变率和正变幅度明显大于非抗药性突变株，负变率和负变幅度也较高。经ＮＴＧ和ＮＴＧ－ＵＶ诱变处理，获得一株林可霉素、Ｄ－环丝氨酸和万古霉素多重抗性突变株ＬＣＶ＿５（Ｌｉｎ￣ｒ，Ｃｓ￣ｒ，Ｖｍ￣ｒ），其α－淀粉酶活力比出发菌株Ａ－４提高３２．５％，发酵周期短，摇瓶为４０ｈ，酶活力达４６１ｕ／ｍｌ．     

UV、LiCl复合诱变深黄被孢霉选育γ-亚麻酸突变株

以深黄被孢霉（Mortierella isabellina）AS3．3410为出发菌株，经UV、LiCl复合诱变处理，随机筛选后复筛，最终获得一株突变株SHFU-13。其种子发酵2d，摇瓶发酵8d时，生物量和总脂量分别达21．66、12．65g/L，在同等条件下比出发菌株分别提高了8．84％和36．61％。气相色谱分析其油脂组成，γ-亚麻酸含量为6．39％，产量为0．81g／L，产量较对照样提高44．64％。连续传代多次，其产量性状无显著变化。     

氮离子注入和微波复合诱变选育高产柠檬酸的黑曲霉研究

利用低能离子注入及微波辐射对柠檬酸生产菌进行诱变选育.在30keV能量的氮离子注入以及间隔10s的微波电磁辐射后筛选得到2株产量提高到60％的诱变高产菌,多次传代实验表明菌株遗传稳定性良好,为柠檬酸发酵菌黑曲霉的进一步的育种工作提供了诱变参数和高产出发菌株.