2,4-滴丁酯降解菌Enterobacter sp.M11-3的分离和鉴定

[目的]利用生物降解修复2,4-滴丁酯污染的土壤。[方法]使用以2,4-滴丁酯为唯一碳源和能源的无机盐培养基对菌株培养,利用高效液相色谱法测定农药降解率,分离筛选2,4-滴丁酯高效降解菌。通过形态学观察及16S r RNA序列分析进行菌种鉴定,测定菌株的最佳生长条件和对其他11种农药的降解率。[结果]分离得到的菌株M11-3对2,4-滴丁酯的降解率为99.98%,初步鉴定为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。确定了该菌株最佳的生长温度为25℃、p H值为7.0,对毒死蜱和螺螨酯的降解率为37.25%~54.34%,对莠去津、吡虫啉、乙嘧酚磺酸酯、氟铃脲、啶虫脒和氯氰菊酯的降解率为15.53%~28.77%。[结论]菌株M11-3可为2,4-滴丁酯污染土壤的生物修复提供适宜的菌种资源。     

螺螨酯在土壤中的残留分析

[目的]建立螺螨酯在土壤中的残留分析方法。[方法]土壤样品经乙腈-水(体积比4∶1)混合振荡提取,静置后过膜,HPLC-DAD直接测定。[结果]当添加质量分数为1.0、10.0 mg/kg时,螺螨酯在黄壤、水稻土和石灰土中的添加平均回收率分别为94.8%~96.1%、91.0%~97.8%和93.2%~99.1%,RSD分别为0.8%~4.8%、2.7%~3.2%和1.6%~1.9%。方法最小检出量为1.0×10-9 g,土壤中最小检出质量分数为1.0 mg/kg。[结论]该方法操作简单,样品分析速度快,准确度、精密度及灵敏度均满足农药残留分析的要求,可用于土壤中螺螨酯残留量的检测。     

山楂叶螨对螺螨酯的抗药性选育及现实遗传力

[目的]预测山楂叶螨对螺螨酯产生抗性的速度。[方法]以杀死种群30%~70%剂量为选择压,在室内对山楂叶螨敏感种群进行抗性汰选。[结果]山楂叶螨幼螨对螺螨酯抗性发展缓慢,选育至第18代获得抗性指数为7.41的抗性种群;山楂叶螨对螺螨酯抗性现实遗传力为0.1281,在致死率为50%~90%选择压力下,预计山楂叶螨对螺螨酯抗性增长10倍,需要10.34~22.99代。[结论]汰选18代后,山楂叶螨幼螨对螺螨酯产生了明显抗性,山楂叶螨对螺螨酯存在一定抗性风险。     

30%乙唑螨腈·螺螨酯悬浮剂高效液相色谱法分析

[目的]研究30%乙唑螨腈·螺螨酯悬浮剂分析方法。[方法]采用高效液相色谱法,以乙腈∶水=99∶1(体积比)为流动相,使用Shimadzu C_(18)柱和紫外检测器分离和测定30%乙唑螨腈·螺螨酯悬浮剂。[结果]该分析方法的线性相关系数分别为0.999 98、0.999 96,乙唑螨腈和螺螨酯的RSD分别为0.39%和0.46%,乙唑螨腈回收率为100.11%,螺螨酯回收率为99.90%。[结论]该方法准确可靠,重现性、稳定性好,是一种较为理想的分析方法。     

6种杀螨剂对朱砂叶螨不同生测方法的毒力比较

[目的]筛选出对朱砂叶螨具有较好防效的药剂。[方法]采用药膜法、玻片浸渍法对6种杀螨剂进行室内毒力测定,并对2种生测方法进行比较。[结果]在2种方法下,6种药剂表现的毒力大小均为阿维菌素>唑螨酯>丁醚脲>三唑锡>哒螨灵>螺螨酯,同种药剂测定产生的毒力结果为玻片浸渍法>药膜法,且速效型药剂在玻片浸渍法与药膜法中表现的相对毒力倍数为3-5之间。[结论]试验表明阿维菌素、唑螨酯、丁醚脲均对朱砂叶螨表现出较高的毒力。     

一株三唑醇降解菌M1的筛选、鉴定及降解特性

[目的]分离筛选得到一株三唑醇降解菌株,完成菌株鉴定并对其降解特性进行分析。[方法]通过富集驯化法从三唑醇长期污染土壤中筛选三唑醇降解菌株,基于形态学特征、生理生化特性及16S rRNA和gyrB序列分析,对菌株进行鉴定。利用紫外分光光度计测定菌株生长量与三唑醇降解率的关系;并采用单因素试验探究不同温度、pH值及接种量对三唑醇降解作用的影响。[结果]从土壤中分离得到一株可降解三唑醇的细菌菌株M1,经鉴定为产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)。以三唑醇100 mg/L为初始质量浓度,28℃振荡培养7 d后,菌株的生长量OD600为0.2110,菌株M1对三唑醇的降解率为70.23%。该菌的最适降解温度为28℃,最适降解pH值为4,最适降解接种量为1%。[结论]产酸克雷伯氏菌M1可有效降解三唑醇,为三唑醇农药的降解提供了新的微生物资源。     

烟嘧磺隆高效降解复合菌系的构建及降解特性

[目的]构建烟嘧磺隆高效降解复合菌系并明确其降解特性，为高效修复烟嘧磺隆污染土壤提供理论支撑。[方法]通过富集驯化培养，从山西省不同生态区烟嘧磺隆污染土壤中筛选出5株烟嘧磺隆降解菌，通过16S rDNA和ITS序列分析鉴定降解菌的分类地位。通过全组合构建高效降解复合菌修复体系，并通过单因素试验明确其降解特性。[结果]筛选获得10株具有烟嘧磺隆降解能力的菌株，其中5株菌株降解能力较强。经16S rDNA和ITS序列鉴定和系统发育分析，5株烟嘧磺隆降解菌株分别为A枯草芽孢杆菌、B黑曲霉、C草酸青霉、D土曲霉和E绿木霉。全组合复配结果表明，由3种菌株组成的复合菌系对烟嘧磺隆降解率最好，其中ABD组合对烟嘧磺隆降解能力最高，较单株菌降解率最高的菌株D降解率提高23.74%；将筛选的A、B、D进行不同比例复配，菌株最佳复配比A∶B∶D为2∶3∶1时，烟嘧磺隆降解率最高达98.31%，各菌株对烟嘧磺隆降解的影响效果A>B>D。复合菌系较单一菌株增加了适宜的温度、pH值和烟嘧磺隆初始浓度范围，最适培养降解条件为接种量2%～5%，温度30～40℃，pH 7.0，烟嘧磺隆初始质量浓度50～2...     

降解有机磷农药L-1菌株的筛选与鉴定

[目的]筛选对多种农药都具有降解作用的微生物菌种。[方法]在经常喷洒农药的农田中采样,利用选择性培养的方式筛选对有机磷具有降解能力的微生物菌种,经菌落形态观察、生理生化特征及16S r DNA分子序列分析对其进行鉴定,并利用气相色谱测定其降解效果。对筛选得到的菌株进行鉴定。[结果]初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)。[结论] L-1对甲基对硫磷的降解率达到73.43%,对敌百虫的降解率达到70.45%。通过对其他农药的考察,发现该菌株对氯氰菊酯和呋喃丹农药也有降解效果。     

QuEChERS-高效液相色谱串联质谱法测定甜橙中哒螨灵和螺螨酯

[目的]建立了甜橙全果、果肉、果皮、果渣、橙汁和精油等6项基质中哒螨灵和螺螨酯的QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱分析检测方法(HPLC-MS/MS)。[方法]甜橙样品经乙腈提取,PSA、GCB、MgSO4净化,高效液相色谱-串联质谱仪配备电喷雾正离子多反应监测(MRM),外标法定量。[结果]甜橙6种基质通过此分析检测方法,哒螨灵和螺螨酯在0.001~1.25 mg/L质量浓度范围线性相关系数不小于0.9965,3个加标水平(0.01、0.5、5 mg/kg)下哒螨灵回收率为81%~93%,RSD为0.5%~6.5%,螺螨酯回收率为81%~99%,RSD为0.5%~7.9%。[结论]该方法简单、方便、灵敏度、准确度高,覆盖甜橙全项样品基质,可适用于大批量样品快速分析。     

拟无枝菌酸菌M3-1降解丙酯草醚的特性及应用初探

丙酯草醚是我国自主研制的一种新型高效油菜田除草剂。采用现代分子生物技术和微生物学传统方法从长期施用嘧啶水杨酸类除草剂的农田中富集、筛选出以丙酯草醚为唯一碳源生长的高效降解菌株M3-1,并对其最适降解条件及在土壤中的应用进行研究。结果表明:(1)经形态、生理生化和16S rDNA鉴定,M3-1属于拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis sp.)。(2)最适温度为35℃,pH为6.0,接种量为8%,在底物(ZJ0273)浓度为100～400 mg.L.1均具有一定的降解效果,且降解率随底物浓度的增加而降低,浓度高于300 mg.L.1时,对M3-1的降解效果有较强的抑制作用。(3)最适降解条件下,水溶液中培养25 d对浓度为100 mg.L.1丙酯草醚的降解率可达63.3%。(4)M3-1在土壤中对ZJ0273有很好的去除效果,处理25 d,其降解率可达53.7%。     

木质素高效降解菌的筛选及研究

(目的)筛选出可高效降解棉杆木质素的菌株;(方法)通过平板鉴定法进行初筛及复筛,再由固态发酵培养方式测定菌株对棉杆降解能力,并对棉杆木质纤维素含量的降解率及木质素酶活进行测定;(结果)筛选得到两株可高效降解棉杆木质素的菌株M11,H-1。H-1对棉杆木质素降解率的最大值为47%。而M11对棉杆木质素降解率的最大值为11%;(结论)棉杆木质素降解菌的研究为新疆棉杆的充分利用打下坚实的基础。     

腈吡螨酯及其混剂对苹果红蜘蛛的田间防控效果

[目的]明确腈吡螨酯及其混剂对苹果红蜘蛛的防治效果。[方法]通过螨口减退率和防治效果,综合评价30%腈吡螨酯SC与110 g/L乙螨唑SC和22.4%螺虫乙酯SC混合使用的药效。[结果]30%腈吡螨酯SC 60.0~75.0mg/L+110 g/L乙螨唑SC 14.7~22.0 mg/L、30%腈吡螨酯SC 75.0 mg/L+22.4%螺虫乙酯SC 44.8~56.0 mg/L和30%腈吡螨酯SC 60.0 mg/L+22.4%螺虫乙酯SC 56.0 mg/L对苹果红蜘蛛的速效性和持效性均较为显著,防效为94.0%~100%,持效期为20 d。[结论]在苹果安全生产中,为减少化学农药使用量,推荐30%腈吡螨酯SC与110 g/L乙螨唑SC和22.4%螺虫乙酯SC合理混用防治苹果红蜘蛛。     

24%螺螨双酯悬浮剂中有效成分及相关杂质的高效液相色谱分析

[目的]建立了一种对24%螺螨双酯混悬剂中螺螨双酯及相关杂质3-(2,4-二氯苯基)-4-羟基-1-氧杂螺[4.5]癸-3-烯-2-酮(BAJ-2510)含量测定的高效液相色谱分析方法。[方法]以0.1%磷酸水溶液和乙腈作为流动相,梯度洗脱,使用Ultimate XB-C18色谱柱和PDA检测器,在245 nm波长下对悬浮剂中的螺螨双酯和BAJ-2510进行分离和含量分析。[结果]螺螨双酯和BAJ-2510线性相关系数分别为0.9999和0.9998,标准偏差分别为0.001和0.000 05,变异系数RSD分别为0.41%和0.38%,平均回收率分别为100.9%和101.7%。[结论]该方法操作简便,精密度好,准确度高,线性关系良好,为该悬浮剂的市场监管和生产企业的质量检测及控制提供了可靠的检测方法。     

40%吡唑醚菌酯·戊唑醇悬浮剂在玉米及土壤中的残留与降解

[目的]利用高效液相色谱分析方法和田间试验法,研究了吡唑醚菌酯和戊唑醇在玉米及土壤中的降解和残留,以期为安全施药提供依据。[方法]利用紫外检测器双通道双波长,对吡唑醚菌酯和戊唑醇同时进行检测。[结果]吡唑醚菌酯和戊唑醇在植株和土壤中的消解动态均满足一级降解动力学过程,半衰期分别为5.2~10.8、4.8~12.1 d。用药后7 d至收获期,吡唑醚菌酯和戊唑醇在玉米中的最终残留均未检出。[结论]该分析方法操作简单,精密度、准确度和灵敏度均符合农药残留标准要求,适用于玉米和土壤中的吡唑醚菌酯和戊唑醇残留测定。     

QuEChERS-高效液相色谱法测定土壤中嘧霉胺和吡唑醚菌酯残留

[目的]建立一种QuEChERS样品前处理联合高效液相色谱-二极管阵列(HPLC-PDA)同时测定土壤中嘧霉胺和吡唑醚菌酯残留量的分析方法。[方法]采用QuEChERS方法对土壤样品进行前处理,以乙腈作为提取剂,PSA+C18+无水Mg SO4净化,HPLC-PDA检测,外标法定量。[结果]嘧霉胺和吡唑醚菌酯的最低检出限分别为6.2、12.8μg/L,定量限分别为19.6、37.7μg/L,在3个农药添加水平下(100、400、800μg/kg)嘧霉胺及吡唑醚菌酯的回收率范围为86.3%~99.2%,相对标准偏差为2.0%~5.4%。[结论]该方法准确、快速、方便,适用于土壤中嘧霉胺、吡唑醚菌酯这2种杀菌剂农药的残留检测。     

甘蓝和土壤中吡唑醚菌酯·烯酰吗啉残留分析

[目的]吡唑醚菌酯?烯酰吗啉是吡唑醚菌酯和烯酰吗啉的混合杀菌制剂,为建立该药剂在甘蓝及土壤中的残留分析方法,采用丙酮和水混合溶剂提取、二氯甲烷液液分配、中性氧化铝柱净化,GC-μECD检测。[结果]吡唑醚菌酯和烯酰吗啉最小检出量分别为2.0×10-11、1.0×10-11 g,实际土壤、植株添加的最低检测质量分数均为0.005 mg/kg。吡唑醚菌酯和烯酰吗啉的添加质量分数分别为0.01、0.05、0.50 mg/kg和0.1、1.0、5.0 mg/kg,在土壤和植株中的添加回收率分别为84.8%~104.4%,96.6%~100.8%和102.0%~108.6%、96.2%~106.6%,变异系数分别为1.74%~3.67%、3.32%~3.87%和1.54%~2.78%、3.48%~3.84%。[结论]方法具有简便、准确的特点,适合甘蓝及土壤中吡唑醚菌酯?烯酰吗啉残留量的测定。     

98%螺螨酯原药对大鼠生殖方面的影响

[目的]以Sprague Dawley(SD)大鼠为试材,进行98%螺螨酯原药大鼠的生殖毒性试验。测定98%螺螨酯原药对动物繁殖和致畸方面的影响。[方法]分别通过大鼠的繁殖试验和致畸试验来确定98%螺螨酯原药对动物繁殖和致畸的影响。[结果]98%螺螨酯原药对大鼠2代繁殖试验:对大鼠系统毒性的最小有作用剂量为530 mg/kg饲料,对大鼠的生殖毒性最小有作用剂量为530 mg/kg饲料,对子代生长发育的最小有作用剂量为4 800 mg/kg饲料。98%螺螨酯原药对大鼠致畸试验:98%螺螨酯原药对母鼠的最大无作用剂量为480 mg/kg,对胎鼠的最大无作用剂量为480 mg/kg。[结论]98%螺螨酯原药对大鼠繁殖试验有一定影响,而对母鼠胚胎毒性和胎鼠生长发育没有明显影响。     

氟乐灵降解菌Bacillus sp.的分离鉴定及其降解特性

[目的]从长期被氟乐灵污染的土壤中筛选出能以氟乐灵为唯一碳氮源生长的细菌,并对其降解特性进行研究。[方法]以连作15年以上棉田土壤为材料,采用直接稀释涂布法分离得到1株能够降解氟乐灵的细菌D8,通过形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列分析,对菌株D8进行鉴定;通过单因素试验研究降解特性。[结果]鉴定菌株D8为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),在氟乐灵质量浓度为50 mg/L、接种量为4%、外加氮源酵母浸粉0.1%、温度37℃、p H值为5.0的条件下,接种3 d后对氟乐灵降解率达到59.89%以上。[结论]该研究为氟乐灵的生物降解和土壤修复提供理论依据。     

螺螨酯原药中相关杂质的高效液相色谱分析方法

[目的]对螺螨酯原药进行高效液相色谱分析方法的研究,建立了螺螨酯原药中相关杂质3-(2,4-二氯苯基)-4-羟基-1-氧螺[4,5]癸-3-烯-2-酮(BAJ-2740 enol)含量的测定方法。[方法]色谱柱规格为ZORBAX SB不锈钢柱,使用磷酸调节pH值为3.0的水溶液和乙腈作为流动相,紫外检测器检测波长245 nm,对螺螨酯相关杂质进行定量分析,并且通过液质联用法对相关杂质的色谱峰进行了定性研究。[结果]螺螨酯原药中相关杂质的回收率在99.4%～100.4%,相对标准偏差为4.1%;螺螨酯相关杂质在0.0022～0.4392 g/L范围内具有良好线性关系(r≥0.9999)。[结论]螺螨酯原药中相关杂质的高液相色谱分析方法,填补了国内对螺螨酯相关杂质的分析检测方法研究空白,为螺螨酯原药的生产提供了可靠的相关杂质的检测方法。     

固相萃取-高效液相色谱分析玉米、土壤中吡唑醚菌酯的消解动态及最终残留量

[目的]系统地研究吡唑醚菌酯农药在玉米及土壤中的残留量,促进安全生产。[方法]建立吡唑醚菌酯在玉米、植株和土壤中残留的固相萃取-高效液相色谱分析方法,研究宁夏及黑龙江两地玉米、土壤中吡唑醚菌酯残留状况和消解动态规律。开展不同填料的固相萃取小柱净化效果的试验,采用高效液相色谱(HPLC)检测。[结果]以弗罗里硅固相萃取柱净化样品的效果最好,在质量分数0.02~0.5 mg/kg的添加水平下,玉米、植株和土壤中吡唑醚菌酯的回收率为92%~108%,变异系数为3.2%~9.4%。消解动态试验表明:吡唑醚菌酯在宁夏、黑龙江两地土壤中的半衰期为24.8、10.2 d。[结论]采用种子包衣的施药方式,消解动态试验的植株及最终残留试验的玉米、植株、土壤中均未检出吡唑醚菌酯,该施药方式安全。