4种生物农药对新疆枣果黑斑病的室内及田间药效试验

[目的]筛选出适合新疆枣果黑斑病防治的生物农药。[方法]采用室内抑菌和田间喷雾法分别测定4种生物农药对枣果黑斑病菌室内抑菌效果和田间防效,同时对其安全性进行了评价。[结果]4种生物农药对2株枣果黑斑病菌均有较好的抑菌效果,田间试验中50亿/g绿色木霉菌粉剂667 mg/L和1亿/mL枯草芽孢杆菌10 g/L对枣果黑斑病的田间防效分别为64.44%和66.67%,对红枣落花的影响最小,药后5 d落花率分别为31.53%和32.28%。[结论]绿色木霉菌667 mg/L和枯草芽孢杆菌10 g/L适用于新疆枣果黑斑病的防治。     

40%丙硫菌唑悬浮剂对番茄叶霉病的防效试验

[目的]明确新型三唑类药剂丙硫菌唑对番茄叶霉病的防治效果。[方法]进行室内毒力测定和田间药效试验。[结果]83%丙硫菌唑原药对番茄叶霉病菌具有良好的抑制效果,其活性明显高于95%苯醚甲环唑原药,40%丙硫菌唑悬浮剂100、200、400 mg/L对番茄叶霉病的防效分别为75.9%、85.1%、88.4%,显著高于对照药剂10%苯醚甲环唑可分散粒剂(61.3%)、40%氟硅唑EC(41.5%)和70%甲基托布津WP(10.4%)。[结论]40%丙硫菌唑悬浮剂对番茄叶霉病具有良好的防治效果,且对番茄生长安全,对环境和非靶标生物无不良影响,可作为一个很好的防治番茄叶霉病的替代品种。     

贝莱斯芽孢杆菌S6拮抗物质分离纯化及抑菌机理

[目的]旨在明确新型生防细菌贝莱斯芽孢杆菌S6的拮抗物质和抑菌作用。[方法]拮抗物质的研究方法包括硫酸铵沉淀法、DEAE-Sephrose~(TM) Fast Flow阴离子交换、Superdex TM75凝胶层析及SDS-PAGE电泳分析;抑菌作用的研究方法包括菌丝生长速率法和孢子萌发法。[结果]贝莱斯芽孢杆菌S6拮抗物质对多种病原菌具有很好的抑制作用。采用80%饱和度(NH_4)_2SO_4沉淀法提取贝莱斯芽孢杆菌S6的发酵液粗提物,粗提物通过DEAE-Sephrose TM Fast Flow阴离子交换和Superdex~(TM) 75凝胶层析进行纯化,经SDS-PAGE电泳检测到单一的条带,其分子质量为20.1 kDa。贝莱斯芽孢杆菌S6的拮抗蛋白质量浓度为5、10 g/L时,对番茄早疫病菌的抑制率分别为71.13%、90.33%;质量浓度为1 g/L时,对早疫病菌的孢子萌发抑制率为60.42%,质量浓度达到10 g/L时,孢子几乎不萌发。拮抗蛋白处理的菌丝发生了扭曲、畸形、肿大。[结论]本研究结果为利用贝莱斯芽孢杆菌S6开发新的生防制剂奠定了基础。     

稻曲病生防菌的筛选与鉴定

[目的]为获得优良、高效的稻曲病生防菌株。[方法]通过对峙培养法、菌丝生长速率法和孢子萌发法,综合筛选对稻曲病菌具有拮抗作用的生防菌株,根据形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列进行种类鉴定。[结果]筛选出2株抑菌活性较高的生防菌QYQN-3和ZHQN-6,抑菌圈直径分别为33.33、31.67 mm,30%发酵液的菌丝生长抑制率分别为56.06%和50.76%,孢子萌发抑制率分别为47.85%和74.85%。菌株QYQN-3具有广谱抑菌效果。QYQN-3为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),ZHQN-6为短小芽孢杆菌(B. pumilus)。[结论]2株生防菌对稻曲病菌均有较高的抑制效果,拓宽了稻曲病生防菌的种类。     

防治蔬菜灰霉病解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及抑菌特性

[目的]为研制防治蔬菜灰霉病的新型生物农药,进行高效生防菌的分离筛选及抑菌特性研究。[方法]通过形态学、生理生化和16S rDNA序列分析,对拮抗菌进行鉴定;采用平板扩散法测定发酵液的抑菌特性。[结果]分离筛选出1株对黄瓜灰霉病具有高效拮抗作用解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);该菌株在生长对数期产生抗菌物质,并在30-38 h达到最大值;产生的抗菌物质有很好的热、酸碱稳定性,紫外线照射不敏感,常温储存6个月活性保持在80%以上;抗菌谱测定表明其对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)等多种病原菌具有显著抑菌效果。[结论]该菌株所产抗菌物质性能稳定,抗菌谱宽,抑菌力强,具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

烟草青枯病生防芽孢杆菌协同防治药剂的筛选和复配

[目的]为提高解淀粉芽孢杆菌Bs2-4防治烟草青枯病效果,筛选出与Bs2-4菌株复配药剂及比例。[方法]采用抑菌圈法测定7种杀菌剂和Bs2-4菌对烟草青枯病菌的毒力,计算EC50值。平板菌落计数法测定杀菌剂与Bs2-4菌生物相容性,Horsfall法确定复配方案。[结果]硫酸链霉素抑制中质量浓度最低,为170.01 mg/L,且与Bs2-4菌有较好生物相容性。170.01 mg/L硫酸链霉素与3.3×107 cfu/m L Bs2-4菌体积比为4∶6时,IR值为1.232。复配剂对烟草青枯病菌生长抑制率达68.59%,烟草青枯病防效达65.85%,显著高于单剂防效。[结论]硫酸链霉素可与解淀粉芽孢杆菌Bs2-4菌联用防治青枯病,混剂施用减少一半化学农药施用量。     

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6摇瓶发酵条件优化

[目的]对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6的摇瓶发酵工艺进行优化。[方法]通过对发酵培养基成分和发酵条件的单因素试验和正交试验,测定生防菌株FS6对人参立枯丝核菌的抑菌效果和菌体生长量,来确定其最适发酵培养基和发酵条件。[结果]最适摇瓶发酵培养基配方为葡萄糖30 g,酵母浸粉40 g,Mg SO_4·7H_2O_2 g,甘油10 m L,K_2HPO_42 g,H_2O 1000 m L;最优培养条件为接种量6%,摇瓶装液量50 m L/250m L,摇床转速160 r/min,初始p H值6.0,培养温度28℃,培养时间12 h。[结论]解淀粉芽孢杆菌FS6在最适摇瓶发酵培养基及发酵条件下,对人参立枯病菌的抑菌活性最好,为该菌株的工业化生产奠定了基础。     

拮抗放线菌F-15的生防作用及其初步分类鉴定

从沈阳东陵区蔬菜大棚土壤中分离到1株拮抗放线菌,编号为F-15.采用平板对峙培养法和温室盆栽防治法测定了其抑菌活性,并通过形态学、化学的方法初步研究了其分类地位.结果表明:该菌株对供试的多种植物病原菌均有抑制作用,其中对瓜类枯萎病菌和番茄叶霉病菌抑制作用较强,平均抑菌带宽度达到14.8～15.0 mm.温室防病实验结果表明:其发酵上清液对番茄叶霉病具有良好的生防作用,防治效果可以达到73.2%.根据其菌株形态、培养特征、生理生化特性、细胞壁化学组分等分析,将菌株F-15归人链霉菌属,并初步鉴定为不吸水链霉菌的金色类群Streptomyces aureus.     

42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂对番茄叶霉病的田间防效

[目的]研究42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂、75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂和30%醚菌·啶酰菌悬浮剂对番茄叶霉病的田间防治试验。[方法]以番茄叶霉病为防治对象,采用田间小区试验法检测3种药剂对其防治效果。[结果]42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂对番茄叶霉病具有很好的防治效果,128.40 g a.i./hm2二次施药后的防效为77.43%,高于对照药剂的防效,差异显著。[结论]42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂对番茄叶霉病防治效果好,对作物安全,是防治番茄叶霉病的优良杀菌剂。     

白鲜皮水提物对植物病原真菌的抑菌活性

[目的]研究白鲜皮水提物抑制植物病原菌活性成分并进行鉴定,为开发植物源农药提供依据。[方法]采用生长速率法测定抑菌效果。采用大孔树脂、高速逆流、柱层析法等对活性成分分离。[结果]白鲜皮水提物对辣椒立枯病菌、番茄灰霉病菌、人参枯萎病菌、人参根腐病菌等具有良好的抑菌活性。且对番茄灰霉病菌抑菌活性显著,40%乙醇洗脱部位及单体的EC50值分别为1 203、393.36 mg/L,单体经鉴定为梣酮。[结论]白鲜皮水提物具有良好的抑菌活性,分离所得单体为白鲜皮中抑制番茄灰霉病菌的主要活性成分。     

海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1菌株发酵液抗菌谱及稳定性测定

[目的]研究海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株GM-1发酵液的抗菌谱及稳定性。[方法]以10种植物病原菌为供试菌,生长速率法测定GM-1菌株发酵液的抗菌谱;以油菜菌核病菌为指示菌,生长速率法测定发酵液在不同条件下的稳定性。[结果]GM-1菌株发酵液对供试的10种植物病原菌具有较好的抑制作用,抗菌范围较广,其中对葡萄白腐病菌(Coniella diplodiella)和小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)的抑菌率均达85%以上;其发酵液的抗菌作用有较好的热稳定性,在光照和紫外线照射下稳定性较好,在pH值6～8的条件下抗菌作用稳定,对蛋白酶不敏感。[结论]GM-1菌株具有广谱抗菌活性和较强的稳定性。     

几种杀菌剂对番茄枯萎病的毒力及田间防效

[目的]筛选出防治番茄枯萎病菌的有效药剂。[方法]采用菌丝生长速率法测定11种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力,选择其中较好的7种药剂进行田间药效试验。[结果]25%咪鲜胺EC、20%嘧霉胺WP、50%异菌脲WP和20%叶枯唑WP对番茄枯萎病菌的抑制作用较强,其中25%咪鲜胺EC的抑制作用最强,EC50值为0.048 mg/L。田间药效试验表明:25%咪鲜胺EC和20%嘧霉胺WP对番茄枯萎病防治效果较好,防效均在70%以上。[结论]为药剂混配和防治番茄枯萎病提供理论依据。     

曼陀罗总生物碱抑菌活性的初步研究

采用MIC和纸片法考查了曼陀罗提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑菌性能。结果表明,曼陀罗对4种受试菌株都有抑菌活性;100℃时,水提物对大肠杆菌的抑菌效果最好,最大抑菌圈为14.72 mm;pH值为8时,曼陀罗水提取对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑菌性最好,最大抑菌圈分别为15.46、13.47、12.26和11.22 mm。曼陀罗水提取对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为8、8、4、6 mg/m L。     

生防菌株AI-05对黄瓜白粉病的防治及菌株鉴定

[目的]明确生防菌株AI-05对黄瓜白粉病的防治效果及其分类。[方法]采用盆栽和田间药效试验测试其防病效果,观测菌株培养性状与形态特征,测定其生理生化指标,并采用16S r DNA序列分析法对菌株AI-05进行鉴定。[结果]生防菌株AI-05对黄瓜白粉病的盆栽和田间试验的防效良好,分别为80.4%和74.9%;菌株AI-05的形态特征和生理生化指标与芽孢杆菌很接近,由16S r DNA序列分析的系统发育树发现,菌株AI-05的序列与Bacillus subtilis菌株HDYM-26同源性高达99%。[结论]效果优于281 g a.i./hm2的50%多菌灵WP,该菌可鉴定为枯草芽孢杆菌B.subtilis。     

3种生物农药对水稻纹枯病菌的室内毒力及田间防效

[目的]筛选水稻纹枯病绿色防控的药剂。[方法]采用生长速率法和叶面喷雾法分别测定3种生物农药对水稻纹枯病菌的室内毒力和田间防效。[结果]大蒜素和中生菌素对水稻纹枯病菌的室内EC50值分别为29.10、29.03 mg/L,枯草芽孢杆菌EC50值为23.90亿活芽孢/L;6%大蒜素EW 200～1 200 mg a.i./L、3%中生菌素WP 50～300 mg a.i./L和1 000亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌WP 400～1 500亿活芽孢/L药后7、14 d对水稻纹枯病的田间防效均在66%以上。[结论]大蒜素、中生菌素和枯草芽孢杆菌适用于水稻纹枯病的防治。     

蜡梅籽生物碱类成分及其抗氧化和抑菌活性

[目的]研究蜡梅(Chimonanthus praecox)籽中生物碱成分及其抗氧化和抑菌活性。[方法]应用硅胶柱层析法进行分离纯化并鉴定化合物结构。使用ABTS和FRAP法检测抗氧化能力,并考察其对甘蓝链格孢菌、葡萄灰霉菌、番茄叶霉菌的抑菌效果。[结果]分离得到1种化合物,鉴定为洋蜡梅碱(calycanthine)。其对ABTS阳离子自由基清除作用较强,IC_(50)值为(3.24±0.08)mg/L;抑菌结果显示其对3种菌株均具有一定的抑菌活性。[结论]洋蜡梅碱具有较强的抗氧化活性和抑菌活性。     

侧柏内生真菌G21抑菌活性及其鉴定

[目的]研究侧柏内生真菌菌株G21在不同培养基中发酵产物抑菌活性,并进行鉴定。[方法]利用生长速率法测定抑菌活性,结合形态分类及ITS-18S rDNA序列分析鉴定菌株。[结果]G21在所有不同培养基中的发酵产物对苹果腐烂病菌、白菜黑斑病菌、小麦纹枯病菌及番茄灰霉病菌均有不同程度的抑制作用;G21鉴定为异茎点霉属(Paraphoma),与菊异茎点霉菌(Paraphoma chrysanthemicola)处于同一分支。[结论]G21马丁培养基和淀粉铵盐培养基发酵产物活性值得进一步研究。     

黄瓜枯萎病拮抗内生菌BPT-18的鉴定及抗菌物质性质

[目的]为有效防治黄瓜枯萎病,进行了菌种鉴定及其抗菌物质性质的试验。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA序列的进化树分析,对拮抗内生细菌BPT-18进行鉴定;采用平板对峙法测定抑菌谱;采用平板扩散法测定经60%硫酸铵沉淀所得粗提液的性质。[结果]鉴定菌株BPT-18为短小芽孢杆菌,该菌对多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抗菌物质粗提液耐高温,对酸碱稳定,对胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K均不敏感,对氯仿敏感,并能有效抑制枯萎病菌孢子萌发。[结论]该抗菌物质可能是一种抗菌多肽,为黄瓜枯萎病的防治提供新的生防资源。     

几种含羟基类化合物的抑菌活性

[目的]发现含羟基类化合物中具有潜在修饰价值的抑菌先导化合物。[方法]采用菌丝生长速率法分别测定15种含羟基类化合物a~o对番茄灰霉病菌和烟草枯萎病菌的室内抑菌活性。[结果]初步构效关系表明化合物a~o对所测2种病原真菌均表现出不同程度的毒力,特别是α-萘酚(d)对番茄灰霉病菌和烟草枯萎病菌均表现出高于吧霉灵(o)的活性,其对应EC_(50)值分别为17.9、32.0mg/L和38.0、74.3mg/L。整体而言,化合物a、b和d~o对番茄灰霉病菌较烟草枯萎病菌敏感特别是化合物b、f和j,其番茄灰霉病菌的EC_(50)均低于烟草枯萎病菌EC_(50)值的10倍多。[结论]化合物a、b、f、g和I对番茄灰霉病菌均表现出较好的抑制活性,初步拟定将该5种化合物作为下一步开发抑菌剂的先导化合物。     

甜瓜细菌性叶枯病病原菌鉴定及有效药剂筛选

[目的]确定甜瓜细菌性叶枯病病原菌种类,筛选有效抑菌药剂。[方法]划线分离法获得分离物经柯氏验证菌株致病性,结合生理生化和分子生物学方法进行鉴定,抑菌圈法测定室内毒力。[结果]病原菌鉴定为丁香假单胞丁香致病变种(Pseudomonas syringae pv. syringae);在制剂推荐剂量下,0.3%四霉素水剂20 000～33 000 mg/L、30%乙蒜素水剂1429～2000 mg/L、80%乙蒜素水剂556～667 mg/L对病菌TG01的抑菌圈直径15 mm;3%噻霉酮微乳剂2000～3333 mg/L、20%溴硝醇可湿性粉剂667～1000 mg/L、60%进口叶枯唑粉剂3333～5000 mg/L对TG01的抑菌圈直径10～15 mm;47%春雷·王铜WP 1667～2000 mg/L对TG01的抑菌圈直径8.33～7.33 mm;其他供试药剂无抑菌活性。[结论]明确了甜瓜细菌性叶枯病的病原菌为P. syringae pv. syringae,筛选出7种对该病菌有抑制作用的药剂。