重离子束诱变选育谷氨酸高产菌株

采用中能12C6+离子束辐照诱变谷氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌,结合3种选择性培养基初筛突变菌株,通过摇瓶复筛谷氨酸高产菌株,并进行批次发酵实验。结果表明,经80 Me V/u碳离子束辐照后,受照菌存活率发生显著变化,通过选择性平板初筛、摇瓶复筛选育出1株高产菌株GM006,菌体生长和发酵有较大改进,其发酵最高产酸达121.10 g/L,比出发菌株提高了10.09%,糖酸转化率达60.55%,比原始菌株提高10.09%。该GM006突变株是很有前景的谷氨酸工业生产菌,同时证明重离子束是一种高效的辐射诱变源。     

重离子辐照诱变增强枯草芽孢杆菌纤维素降解能力

为了提高枯草芽孢杆菌纤维素降解能力,本实验从5株枯草芽孢杆菌中筛选出一株纤维素降解率较高的菌株作为出发菌株,利用12C6+离子束辐照诱变处理后,采用刚果红染色法进行初筛,通过测定纤维素降解率及内切葡聚糖苷酶活力进行复筛,对选出的高纤维素降解率菌株进行发酵条件优化。最终得到一株Bacillus subtilis CG-40-1突变株,其纤维素降解率为(53.07±0.75)%,较出发菌株提高了17.75%,并具有良好的纤维素降解稳定性。经过发酵条件优化,最终得到该菌株的最适发酵时间、温度和pH分别为120 h、45℃、6.5,纤维素降解率为(67.79±0.49)%,较未优化时提高27.74%。     

产维生素K_2黄杆菌复合诱变及发酵优化

利用亚硝基胍(NTG)和低能氮离子束(N+)注入复合诱变方法,获得产维生素K2黄杆菌(Flavobacterium sp.)菌株,并对突变菌株发酵条件进行优化,进一步提高黄杆菌产维生素K2的能力。确定最佳诱变条件为:NTG处理浓度0.8 mg/m L,处理时间20 min;N+离子注入能量15 ke V,80(2.6×1013 cm?2),突变菌维生素K2产量为6.12 mg/L,较原始菌株提高了159%。突变菌传代6次,维生素K2产量稳定。进一步优化突变菌发酵条件,确定最优发酵条件为:温度37℃、起始p H=7.0,装液量30 m L/250 m L,接种量2%、摇床转速120r/min,发酵后72 h添加3 mg/m L花生衣(Arachis hypogaea)作为诱导物,优化后的菌株维生素K2产量较优化前提高31%。     

绿色木霉原生质体的激光诱变及纤维素酶发酵条件优化

采用Nd:掺钕的钇铝石榴石固体激光器,在266 nm激发波长下,对绿色木霉CICC13038原生质体进行辐照诱变,通过微晶纤维素筛选,得到高产纤维素酶的菌株JG13,运用正交试验对诱变菌株发酵条件进一步优化,在28℃、180 r/min、发酵72 h条件下的正交试验结果表明:发酵条件为1%(NH4)2SO4为氮源,2%麸皮为碳源,0.5%Tween-80为产酶促进剂,瓶装量25 mL(250 mL 发酵瓶),纤维素酶酶活可达35.68 U/mL,相同发酵条件下,较原始菌株酶活提高25.76%.菌株JG13也可作为进一步诱变筛选的出发菌株,获得更高活性菌株.     

N+离子注入对Aspergillus sp.产原果胶酶的诱变效应

原果胶酶是一种具有广泛应用前景的工业酶类,为获得高活性原果胶酶的菌株,用能量为15 keV、注量为20×2.6×1013-180×2.6×1013cm-2的N+注入原果胶酶产生菌黑曲霉Aspergillus sp.XZ-131的成熟孢子,其存活率曲线为典型的"马鞍型"剂量-效应曲线.经筛选确定高产诱变菌株Z-25,经传代培养,高产性状稳定遗传.发酵过程中比原始菌株提前24 h进入生长旺盛期,随后在稳定期期间大量产酶,发酵至72 h时酶活性达到最高,比原始菌株提高了179%,每克干细胞性比原始菌株提高了84%.     

激光诱变筛选呼吸缺陷型酵母及其发酵条件优化

本实验利用266nm激光作为诱变手段,对酿酒酵母YE0进行辐照诱变筛选呼吸缺陷型酵母,通过TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）筛选和气相色谱法酒精测定,最终得到-株高葡萄糖转化率呼吸缺陷型酵母JB7。对该突变株进行鉴定和发酵条件优化,结果表明,接种量15％,发酵温度32℃,葡萄糖初始浓度25％,发酵72h后,酒精产量体积分数可达12．3％,葡萄糖转化率达到52．9％,分别比出发菌株的酒精产量（12．0％）和葡萄糖转化率（49．6％）有所提高。高于正常酵母的糖原利用率,显示了呼吸缺陷型酵母良好的应用前景。     

~(67)Ga-C_(60)(OH)_x标记条件的研究

用^67Ga标记了水溶性富勒烯衍生物富勒醇（C60（OH）x）。研究了反应时间、温度、pH值、C60（OH）x的质量浓度等对标记率的影响。研究结果表明，反应时间在3-60min时对标记率影响不大；反应温度对标记率基本无影响；pH值大于12后，标记率较低；C60（OH）x的质量浓度高于5μg/μL时，标记率均在94%以上。稳定性研究结果表明，标记后稀释与不稀释的溶液在放置200h后，其放化纯度都达90%以上。     

氮离子注入选育高效发酵木糖生产L(+)-乳酸的米根霉

为了获得能够高效发酵木糖生产L( )-乳酸的菌株,采用氮离子注入诱变方法,对出发菌株米根霉RLC41-6进行改良,获得高产L( )-乳酸菌株RQ4012,发酵周期为72h,产酸能力达74.37g/L,产酸速率达1.03g/(L.h),比RLC41-6提高了1.6倍.经过多次传代实验证明该菌株具有较好的遗传稳定性.     

微生物发酵法批量制备高丰度~(15)N同位素标记L-精氨酸

采用均匀设计实验方法建立5L罐发酵生产L-精氨酸-~(15)N_4的优化调控模型。在菌体生长24h进入产酸阶段,控制转速820r/min,pH7.8,温度30℃,通气2.5L/min,流加总量60%的葡萄糖,理论产酸最高可达到22.49g/L,验证实验产酸19.69g/L,达到理论高值的88%。利用~(15)N丰度99.68%的尿素和丰度99.43%的硫酸铵发酵生产得到L-精氨酸-~(15)N_4的产品丰度为98.7%,化学纯度为98.5%,丰度下降1%。可以满足批量生产的要求。     

激光诱变筛选木霉菌株及木聚糖酶发酵条件优化

本实验利用激光这一高效诱变手段,对野生菌株绿色木霉Tr-02进行辐照诱变,通过两轮的定向筛选,最终得到一株高产木聚糖酶的菌株.对突变株进行发酵条件优化,结果表明,以0.5%麸皮为碳源,0.5%蛋白胨为氮源,0.1%Tween-80作为产酶促进剂,培养基初始pH值为5.0,瓶装量100mL,接种两环,28℃,180 r/min培养48h,木聚糖酶活力达到281.21U·mL-1,较之相同条件出发菌株木聚糖酶活力增长31.83%.     

高能脉冲电子束诱变筛选高产酒精酵母及其发酵条件优化

为获得更高酒精产量的菌株,以高能脉冲电子束为诱变源,以酿酒酵母Saccharomyces Cerevisiae YE0为出发菌株,通过乙醇胁迫筛选和气相色谱法测定酒精浓度,筛选得到一株性状优良的高产酒精酵母YF1.运用正交试验对诱变菌株发酵条件进行优化并比较其与出发菌株YE0的生长曲线和热致死温度,结果表明:在发酵温度...     

Mutant breeding of Aspergillus niger irradiated by ~(12)C~(6+) for hyper citric acid

In this study,strains of Aspergillus niger 4# for hyper citric acid were irradiated to different doses by80 MeV/u ~(12)C~(6+) ion beams.Seven mutant strains showed marked citric acid over-production records and faster productivity than initial Aspergillus niger 4# by shaking flash fermentation.The maximum product yield was 132.8 gL~(-1)(the H4002 strain) being a 8.8%increase to the initial strain.The scale-up experiment was carried out in a 100 L bioreactor.The mutant H4002 can accumulate 187gL~(-1) product yield of citric acid from starch liquefying supernatant.The productivity of citric acid was 2.75gL~(-1) h~(-1).So,the mutant H4002possesses rapid sugar katabolism for producing citric acid.Meanwhile,the pellet morphology kept compact and round during the whole submerged fermentation,which was suited to produce citric acid.The results indicate that mutant H4002 has potential ability to produce citric acid rapidly.     

利用中子活化分析法研究高生物量富铬酵母的培养条件

利用中子活化分析法对富铬酵母中的铬进行了测定。以啤酒酵母菌株LZ-53为出发菌株对培养基的种类、糖度、铬浓度、pH值、装液量、接种量和培养时间等培养条件进行了优化,确定了最佳培养条件为:麦芽汁作培养基,培养基中糖浓度为10Brix,铬浓度为1200mg/mL,pH6.0,装液量为8%,接种量为10%,培养时间为30h。在此条件下干菌体铬含量可达3248mg/g。     

碳离子束辐照选育截短侧耳素菌原生质体

使用12C6+离子束辐照Clitopilus pinsitus原生质体至不同吸收剂量,运用琼脂柱预筛和96孔板固体发酵选育截短侧耳素高产变异株。结果显示,最佳12C6+离子束吸收剂量为1.5 Gy,在该吸收剂量下正变异率为37.58%。选育出C.pin15I5E和C.pin15II6B两株正变异株,其产量较出发菌株分别提高16.17%和15.47%。表明重离子束辐照原生质体是行之有效的工业微生物诱变育种方法。     

Parameter Optimization for Enhancement of Ethanol Yield by Atmospheric Pressure DBD-TreatedSaccharomyces cerevisiae简

In this study, Saccharomyces cerevisiae （S. cerevisiae） was exposed to dielectric barrier discharge plasma （DBD） to improve its ethanol production capacity during fermenta- tion. Response surface methodology （RSM） was used to optimize the discharge-associated pa- rameters of DBD for the purpose of maximizing the ethanol yield achieved by DBD-treated S. cerevisiae. According to single factor experiments, a mathematical model was established using Box-Behnken central composite experiment design, with plasma exposure time, power supply volt- age, and exposed-sample volume as impact factors and ethanol yield as the response. This was followed by response surface analysis. Optimal experimental parameters for plasma discharge- induced enhancement in ethanol yield were plasma exposure time of 1 rain, power voltage of 26 V, and an exposed sample volume of 9 mL. Under these conditions, the resulting yield of ethanol was 0.48 g/g, representing an increase of 33% over control.     

低能N+离子注入选育抗菌脂肽高产菌及其发酵的研究

采用了低能N^＋离子注入技术,以淀粉液化芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ES-2为出发菌株。进行诱变选育抗菌脂肽高产菌株。研究了不同注入剂量对存活率和正突变率的影响,并获得一株抗菌脂肽高产菌,命名为淀粉液化芽孢杆菌（B.amyloliquefaciens）ES-2—4。与原始菌株相比,脂肽含量提高了15．2％。此外,对突变株的发酵特性进行了初步研究。结果表明：突变株（B．amyloliquefaciens）ES-2-4的延滞期短,稳定期长,脂肽产量高,其发酵性能有利于脂肽的大规模生产。     

无载体188Re标记氟哌酸的研究

用188W/188Re发生器得到的188Re研制了具有潜在临床应用价值的188Re标记的氟哌酸(188Re-Norfloxacin).研究了在无载体的条件下,pH值、温度、时间、氯化亚锡含量对标记率的影响,确定了最佳标记条件.实验结果表明用无载体188Re标记的188Re-Norfloxacin的标记率为92%以上,标记后调pH为4,24h后,放化纯度基本不变.     

低能氮离子注入和紫外线复合诱变选育高产酿酒酵母

通过离子注入联合紫外线辐射诱变选育高产酿酒酵母菌株,根据存活率及突变率确定离子注入的诱变条件为电荷18 ke V,剂量400×10~(14) cm~(-2),紫外线辐射60 s。在该条件下,诱变获得的菌株正突变率和致死率都最高,诱变效果最好。在该条件下进行研究后获得目标菌株SC-N9015,酒精产量从14.65%提升到15.53%。多次传代实验结果显示遗传性状稳定。研究表明,通过低能氮离子注入和紫外线联合诱变选育高产酒精酵母效果显著。