产谷胱甘肽酵母菌株培养基优化

目的筛选对谷胱甘肽产量影响显著的碳源和氮源,考察其浓度对产量的影响。方法通过单因素实验和正交试验确定最佳碳源、氮源和无机盐浓度。结果最佳培养基的基本组成：2．5％葡萄糖,1％酵母粉,0．3％硫酸铵,0．03％硫酸镁,1．2g／L磷酸氢二钾和1．8g／L磷酸二氢钾。结论确定了最优培养基组成。     

产低温蛋白酶酵母菌株的筛选及发酵培养基优化

该研究从新疆本地分离获得的200株酵母菌中筛选产低温蛋白酶的菌株,并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学方法 对菌株WLY1、WLY2和MLY1进行鉴定,最后通过响应面法对20 ℃条件下蛋白酶活力高的菌株的发酵培养基配方优化。 结果表明, 共筛选到14株产低温蛋白酶菌株,其中3株（WLY1、WLY2和MLY1）于20 ℃条件下仍具有较强的产低温蛋白酶能力,其蛋白酶酶活 力依次为69.03 U/mL、34.20 U/mL、29.70 U/mL;鉴定菌株WLY1、WLY2和MLY1分别为双倒卵形红冬孢酵母（Rhodosporidium diobo- vatum）、Cryptococcus adeliensis、Barnettozyma californica;其中菌株WLY1产低温蛋白酶能力强,且其最佳产蛋白酶培养基配方为酵 母浸粉1.64%、蛋白胨1.21%、干酪素1.48%。在此最优条件下,菌株WLY1的蛋白酶活力达到251.51U/mL,约为优化前的4倍,同比其 他产蛋白酶功能菌具有较大的工业应用潜力。     

谷胱甘肽(GSH)高产酵母菌株的初筛及营养条件优化

对实验室保藏的14株不同种属的酵母菌株的谷胱甘肽(GSH)产量进行了比较,发现其中log酵母菌株的GSH产量最高,达127.785 mg/L.对其营养条件进行了研究,发现其最佳碳源为葡萄糖;硝酸盐会抑制其生长,而有机氮源对其生长有利;考虑到磷和钾对酵母细胞生长及发酵代谢的作用,选择KH2PO4为培养基中的基本成分.采用正交试验对培养基的基本成分进行优化,在最佳培养条件下log酵母的GSH产量有较大幅度的提高,达到148.547 mg/L.     

凉州熏醋酿造过程产乙偶姻酵母菌筛选及其发酵培养基优化

乙偶姻是凉州熏醋特征风味成分四甲基吡嗪的前体。本实验从凉州熏醋发酵料醅中分离获得了一株产乙偶姻酵母菌T8,通过经典鉴定方法结合ITS基因测序的方法,确定其为葡萄汁有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）。为探明T8菌株生长及代谢产乙偶姻的营养需求,本实验对产乙偶姻酵母菌T8发酵培养基进行了优化,以期为传统食醋酿造工艺现代化改造过程中人工接种增香酵母种子的制备提供培养基。通过研究不同碳源、氮源、无机盐对T8菌株产乙偶姻的影响,确定了发酵培养基的最终组分:葡萄糖60 g/L,蛋白胨10 g/L,酵母膏10 g/L,（NH₄）₂HPO₄8 g/L,KH₂PO₄0.5 g/L,Mg SO₄·7H₂O 0.75 g/L,Mn SO₄0.6 g/L。培养基优化后,乙偶姻产量达到15.236 g/L,与初始发酵培养基相比提高了20.65%。人工接种T8菌株种子液所酿食醋中四甲基吡嗪的含量较对照提高了22.1%,增香效果明显,证明H.Uvarum T8菌株可以作为食醋酿造的增香酵母。      

产红色素酵母菌的分离、鉴定及其基础培养基的优化

利用微生物平板分离方法,从花生渣土、椰汁土中分离、筛选得到3株产红色素菌株。光学鉴定发现菌体呈现椭球形,大小约为（2.5～5.0）μm×（5.5～8.0）μm;无性繁殖为出芽生殖。根据菌体形态特征、群体形态特征和生理生化反应,3株菌株归属于红酵母属（Rhodotorula）,命名为红酵母FS-1（Rhodotorula sp.FS-1）。依据OD值法、DCW法测得红酵母FS-1的典型生长曲线为：延滞期,0～8h;对数期,8～24h;稳定期,24～34h;衰亡期为34h后。红酵母FS-1能够较好地利用豆芽汁蔗糖培养基作为其发酵基础培养基产生红色色素。     

产红色素酵母菌的分离、鉴定及其基础培养基的优化

利用微生物平板分离方法,从花生渣土、椰汁土中分离、筛选得到3株产红色素菌株。光学鉴定发现菌体呈现椭球形,大小约为（2.5～5.0）μm×（5.5～8.0）μm;无性繁殖为出芽生殖。根据菌体形态特征、群体形态特征和生理生化反应,3株菌株归属于红酵母属（Rhodotorula）,命名为红酵母FS-1（Rhodotorula sp.FS-1）。依据OD值法、DCW法测得红酵母FS-1的典型生长曲线为:延滞期,0～8h;对数期,8～24h;稳定期,24～34h;衰亡期为34h后。红酵母FS-1能够较好地利用豆芽汁蔗糖培养基作为其发酵基础培养基产生红色色素。      

高产谷胱甘肽酵母菌筛选及发酵条件研究

本实验室从果园土壤中筛选到一株产谷胱甘肽的酵母菌YS10。经26SrDNA鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),正交试验获得该菌株产谷胱甘肽合适的发酵培养基为:葡萄糖为3.0%、酵母膏为0.7%、硫酸铵为1.0%、磷酸二氢钾为0.3%、硫酸镁为0.05%。通过发酵条件的优化,该菌在500mL三角瓶装量50mL,30℃摇瓶培养72h,谷胱甘肽的产量可达183.04mg/L,是一株具有工业化开发潜力的谷胱甘肽生产菌株。     

浆水中产香酵母菌菌株的筛选及其增殖培养基优化

以甘肃传统酿制的浆水为材料,采用经典平板分离法对浆水中的酵母菌进行分离纯化,通过感官评定、性能测定及气相色谱-质谱法半定量法分析筛选产香性能优良的酵母菌菌株,对其进行生理生化及分子生物学鉴定,并采用单因素结合Design-Expert设计响应面试验优化了该菌株的增殖培养基。结果表明,从浆水中分离出16 株酵母菌菌株,并成功筛选出了1?株产香性能优良的酵母菌菌株Y16,经鉴定为异常汉逊酵母（Hansenula anomala）。优化的培养基增殖配方为：10?°Be′麦芽汁,其中最佳的营养物添加量分别为葡萄糖11.0?g/L、牛肉膏2.3?g/L、KH2PO4?0.8?g/L。在该条件下,细胞浓度可达到8.75×108?个/mL,是初始麦芽汁发酵培养基细胞浓度的4?倍多;乙酸乙酯的产量达到256.35?μg/mL,比初始发酵培养基增加了25.39%,柠檬烯的产量达到0.083?μg/mL,比优化前增加了31.75%,该菌株增香效果明显,可为浆水发酵直投式增香菌剂的开发提供菌株来源和技术参考。     

酵母菌谷胱甘肽合成能力比较及催化条件优化

试验收集培养了9株酵母菌,分别测定他们的细胞生物量和胞内谷胱甘肽(GSH)含量,酿酒酵母SP004细胞干重达到11.39g/L,啤酒酵母TS013胞内GSH含量达到1.5282mg/g湿细胞;验证考察了4种不同提取方法对细胞内GSH含量测定的影响,结果表明,温差破碎法提取效果较好.同时比较9株酵母菌催化合成GSH的能力,结果显示,絮凝酵母SP5 GSH合成酶活力相对较高,酶活达到2.385mg/g湿细胞,每克湿细胞催化前体氨基酸(AA)合成GSH转化率为7.76％.用单因素试验和正交试验分析法研究不同反应液体积与菌体量比、硫酸镁浓度、磷酸钾缓冲液浓度以及葡萄糖浓度对絮凝酵母SP5细胞催化前体AA合成GSH的影响,结果表明,合成GSH的适宜条件为:谷氨酸60mmol/L、半胱氨酸20mmol/L、甘氨酸20mmol/L、七水合硫酸镁20mmol/L、葡萄糖0.5mol/L、pH值为7.0磷酸钾缓冲液100mmol/L,30℃下,160r/min,振荡反应时间6h.在此条件下,絮凝酵母SP5细胞GSH合成酶活力平均达到2.9498mg/g湿细胞,每克絮凝酵母SP5湿细胞催化前体AA合成GSH的转化率平均为9.60％.     

葡萄汁酵母菌发酵产辅酶Q10培养基优化的研究

选用葡萄汁酵母菌(Saccharomyces uvarum(Beijerinck)为出发菌株,通过对其培养基的优化来提高辅酶Q10产量,确定了菌种最佳培养时间为36h,初步确定最佳培养基组成为蔗糖4%,可溶性淀粉0.2%,酵母菌浸粉4%,蛋白胨1%,NaC1 0.5%,pH7.0时辅酶Q10量最大为48.54mg/L,其中蔗糖对发酵产辅酶Q10响显著.     

TMV拮抗细菌A3的培养基优化研究

利用单因素试验结合正交试验的方法,以菌体生长量(OD₆₀₀值)作为测定指标,对TMV拮抗细菌恶臭假单胞杆菌A3的培养基进行优化,系统研究了碳源、氮源、无机盐的发酵结果.试验结果表明,碳源为麦麸,氮源为酵母浸粉,无机盐为CaCl₂、CoCl₂、MgSO₄、FeSO₄、KH₂PO₄时有利于A3的生长.7因素3水平正交试验结果表明,培养基的最优组合为麦麸15 g,酵母浸粉15 g,CaCl₂ 2.5 g,CoCl₂ 0.5 g,MgSO₄ 0.8 g,FeSO₄ 0.5 g,KH₂PO₄ 0.8 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0,在此条件下拮抗细菌活菌数可达3.234×10¹² cfu/mL,比NB培养基中活菌数提高一个数量级.     

苹果酒酵母增殖培养基的优化

以麦芽汁装液量(mL)、(NH_4)_2SO_4、Na_2HPO_4和 MgSO_4的质量浓度(g/L)为影响因素,以苹果酒酵母细胞浓度(个/L)为考察指标,利用二次回归正交旋转组合设计研究了1株苹果酒酵母增殖所需培养基的数学模型,进而优化了针对该菌株的增殖培养基。研究结果表明,在100mL 三角瓶中,培养开始酵母细胞浓度为 1．923×10~8个/L,麦芽汁装液量20mL,(NH_4)_2SO_4浓度0．196～1．033g/L,Na_2HPO_4浓度2．559～5．566g/L, MgSO_4浓度1．778～3．222g/L 的培养条件下,培养24h 后,酵母细胞浓度可望高于1．125×10~(11)个/L。     

一株谷胱甘肽产生菌的诱变筛选与鉴定

从葡萄中分离出1株GSH产生菌,并通过对其紫外诱变40S结合ZnCl2（1．2g／L）与L-甲硫氨酸（40g／L）的复合抗性而筛选出1株谷胱甘肽的高产诱变菌pt-32-3。经18sDNA分子生物学鉴定为假丝酵母属,通过液相色谱检测诱变后的菌株谷胱甘肽产量为120mg／L以上,是原始菌株产量的1．5倍,为下一步工作奠定基础。     

骆驼凝乳酶工程菌发酵培养基的优化

凝乳酶可以专一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe 105-Met 106之间的肽键,引起蛋白质凝聚,在乳制品加工中应用广泛。目前对牛凝乳酶的研究比较成熟,而对骆驼凝乳酶的研究报道较少。本研究为获得高效骆驼凝乳酶发酵培养基,在单因素实验的基础上,采用Plackett-Burman试验考察培养基中的8个成分对骆驼凝乳酶产量的影响。研究表明葡萄糖、玉米浆、尿素的对产酶影响显著。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区间,利用Box-Behnken响应面法对3个主要影响因素进行分析,得到高效发酵培养基配方:葡萄糖86.6 g/L、玉米浆56.9 g/L、酵母粉4 g/L、磷酸二氢钾3 g/L、尿素18 g/L、硫酸锌3 g/L、硫酸氨1 g/L和氯化镁0.3 g/L。在该条件下凝乳酶活达到431.25 U/m L,较优化前的基础培养基(207.03 SU/m L)提高了2.08倍。再利用1L发酵罐进行发酵培养,凝乳酶活性达到530 SU/m L,约为摇瓶培养最高酶活性的1.22倍。     

产葡萄糖氧化酶菌株的筛选及发酵培养基的优化

从土壤中筛选出了一株产葡萄糖氧化酶较高的菌株,利用响应面法对该菌株的产酶培养基进行优化以提高产酶量。响应面法优化的发酵培养基组成为：葡萄糖109.41g/L、复合氮源(m(月示蛋白胨):m((NH₄)₂SO₄)=3:1)37.36g/L、吐温-80 37.15g/L、KH₂PO₄ 2g/L、 MgSO₄·7H₂O 0.7g/L 和KCl 0.5g/L。采用该优化培养基所得葡萄糖氧化酶的活力为1.54U/mL,较优化前提高了31.6%。     

常压室温等离子体诱变选育丁烯基多杀菌素高产菌株及培养基优化

以ASAGF 2-G4为出发菌株,进行常压室温等离子体与2 mg/mL亚硝基胍的复合诱变选育。结合96孔板发酵培养进行了初筛及摇瓶复筛后,共得到高产突变菌株5株,经复筛验证获得1株高产且稳定遗传菌株2-A9,其比出发菌株产量提高30.92%。利用Pulckett-Burman实验设计筛选发酵培养基中的影响因素,得到葡萄糖、糊精、棉籽蛋白、玉米浆干粉为显著因素。利用Box-Behnken响应面实验设计优化4种影响因素,获得最优培养基配方为(g/L):葡萄糖60.0、糊精25.0、棉籽蛋白25.0、玉米浆干粉12.5、胨化牛奶10.0、Mg SO₄ 1.0、NaCl 2.0、CaCO₃ 5.0。经重复实验验证后,丁烯基多杀菌素平均产量与预测产量接近,表明该模型可行有效。     

产谷胱甘肽面包酵母的选育及发酵条件优化研究

本文以面包酵母BV54为出发菌株,镉盐抗性为筛选标记,经紫外和硫酸二乙酯复合诱变,筛选出一株高镉盐抗性面包酵母菌株BV54-11-11,经摇瓶发酵其谷胱甘肽产量迭98.8 mg/L,胞内含量为15.22 mg/g.借助于SAS软件,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken实验设计及响应面分析法进行回...