酶解条浒苔蛋白制备ACE 抑制肽

为了开发利用绿潮藻类条浒苔中含量丰富的蛋白质,采用可见分光光度法测定酶解物对ACE的抑制作用,考察碱性蛋白酶、Alcalase和胰蛋白酶对条浒苔蛋白的水解作用及其水解产物的ACE抑制活性,筛选出Alcalase作为酶解条浒苔蛋白制备具有降血压活性酶解物的适宜水解酶。在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对该酶的酶解条件进行优化。结果表明,最佳酶解条件为：料液比1:50、加酶量2982U/g pro、温度47.9℃、pH7.53、酶解时间90min,在该条件下,酶解物的ACE抑制率IC50值为0.66mg/mL。不同截留分子质量的组分中,分子质量范围在1～5kD,平均肽链长度为16的组分ACE抑制活性最强,模拟体外消化实验结果表明,分子质量小于10kD的组分具有一定的对消化酶的抗性。     

双酶法制备条浒苔鲜味肽工艺研究

研究双酶法制备条浒苔鲜味肽工艺优化.以水解度和鲜味的感官评价为考察指标,经筛选确定由胰酶与风味酶复配,通过单因素试验、均匀试验和响应面优化试验得出最佳酶解工艺条件为:双酶同步酶解、温度46.5℃、胰酶比风味酶为2∶1(酶活比)、酶添加总量1965.26 U/g· pro、pH 7.49、酶解时间2.91h、固液比1∶2...     

酶解法制备植物抗氧化肽及其应用

作为一类天然抗氧化剂,植物抗氧化肽具有较高的抗氧化活性和较高的安全性,原料来源丰富,廉价易得,制备工艺简单,受到各个行业的关注。综述了酶解法制备植物抗氧化肽的生产工艺、近年抗氧化肽的植物来源以及植物抗氧化肽的应用,为植物抗氧化肽的制备和应用提供借鉴。     

条浒苔低聚糖全麦面包制备工艺及配方优化研究

以条浒苔低聚糖和全麦粉为主要原料制备全麦面包。以感官评分为考察对象，在单因素试验的基础上通过响应面法和正交试验分别优化面包配方和工艺参数，并对全麦面包的理化指标和微生物指标进行分析及对保质期进行确定。结果表明：条浒苔低聚糖全麦面包最优配方为全麦粉添加量150.0 g、牛奶添加量125.0 g、酵母添加量5.0 g、盐添加量3.0 g、条浒苔低聚糖添加量15.0 g,此时感官评分为92.36;最佳工艺条件为烘焙时间12 min、上火温度150℃、下火温度170℃,此时感官评分为90.00。在14 d内条浒苔低聚糖全麦面包各项理化指标及微生物指标均符合标准，故产品保质期为14 d。制得的条浒苔低聚糖面包口感松软、内部组织细腻、气孔均匀，符合消费群体的健康需求。     

浒苔低聚糖的制备及抗氧化活性研究

为开发利用浒苔多糖,制备高抗氧化活性的低聚糖水解物,以条浒苔为材料,采用纤维素酶辅助碱提法提取浒苔粗多糖,通过酸水解法将多糖降解为低聚糖。以羟自由基清除率为指标,采取单因素试验,研究不同料液比、酸浓度、时间、温度对浒苔多糖酸水解的影响,确定影响酸水解的关键因素及其适宜参数范围,然后采用响应面分析法优化水解工艺。结果表明：多糖酸水解最佳条件为料液比1∶40（g/mL）、温度为70 ℃、盐酸浓度1.4 mol/L、时间2 h,在此条件下羟自由基清除率模型预测值为80.40%,实测值为（79.76±0.82）%。     

二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

响应面优化酶解法制备蒲公英籽蛋白抗氧化肽工艺

以蒲公英籽蛋白质抽提物为原料,采用响应面分析法(RSM)优化酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺。采用碱性蛋白酶酶解制备蒲公英籽抗氧化肽,以酶解产物对DPPH自由基清除力为评价指标,考察酶解p H、底物浓度、酶底比及酶解温度对酶解产物抗氧化活性的影响。在单因素实验的基础上,采用三因素三水平的响应面分析法确定酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺,同时建立酶解工艺的二次项数学模型并验证其可靠性。以酶解时间、酶底比和酶解p H为自变量,研究这3个因素的交互作用及最佳酶解工艺条件并进行验证。研究表明,对酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺的影响因素主次顺序为:p H酶底比酶解时间,最佳酶解工艺条件:酶解时间4.90 h,p H8.5和酶底比7.80%。在最佳工艺条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为79.13%。     

响应面优化酶解法制备韭菜籽蛋白抗氧化肽工艺

以韭菜籽蛋白质抽提物为原料,采用响应面分析法优化酶解韭菜籽蛋白质制备抗氧化肽工艺。采用酸性蛋白酶酶解制备韭菜籽抗氧化肽,以酶解产物对DPPH自由基清除力为评价指标,考察酶解p H值、底物质量浓度、酶添加量及酶解温度对酶解产物抗氧化活性的影响。在单因素试验的基础上,采用3因素3水平的响应面分析法确定酶解韭菜籽蛋白质制备抗氧化肽工艺,同时建立酶解工艺的二次项数学模型并验证其可靠性。以酶解p H值、酶添加量和酶解温度为自变量,研究这3个因素的交互作用及最佳酶解工艺条件并进行验证。研究结果表明,对酶解韭菜籽蛋白质制备抗氧化肽工艺的影响因素主次顺序为:p H值酶添加量酶解时间,最佳酶解工艺条件:酶解时间6.5 h,p H 3.00,酶添加量1345.7 U。在最佳工艺条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为80.12%。     

响应面优化酶解法制备蒲公英籽蛋白抗氧化肽工艺

以蒲公英籽蛋白质抽提物为原料,采用响应面分析法(RSM)优化酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺。采用碱性蛋白酶酶解制备蒲公英籽抗氧化肽,以酶解产物对DPPH自由基清除力为评价指标,考察酶解p H、底物浓度、酶底比及酶解温度对酶解产物抗氧化活性的影响。在单因素实验的基础上,采用三因素三水平的响应面分析法确定酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺,同时建立酶解工艺的二次项数学模型并验证其可靠性。以酶解时间、酶底比和酶解p H为自变量,研究这3个因素的交互作用及最佳酶解工艺条件并进行验证。研究表明,对酶解蒲公英籽蛋白质制备抗氧化肽工艺的影响因素主次顺序为:p H>酶底比>酶解时间,最佳酶解工艺条件:酶解时间4.90 h,p H8.5和酶底比7.80%。在最佳工艺条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为79.13%。      

浒苔多糖的酶法降解及其工艺条件优化的研究

采用生物酶法将浒苔多糖降解为分子质量较小、粘度较低的浒苔寡糖,以还原糖生成量作为指标,通过单因素和响应面法优化降解工艺,利用液相色谱和质谱技术对酶解产物进行了组分分析。结果表明:浒苔多糖降解酶能够实现对浒苔多糖的高效降解,最适酶解条件为加酶量1.5%、底物质量浓度14 mg/m L、初始p H=6.5、反应时间6 h、温度33℃,在此条件下,还原糖生成量为165.21 mg,降解率为61.21%,粘度由349.89 m Pa·s降低至2.05 m Pa·s。单糖组成结果表明酶解产物由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖组成,质谱分析表明酶解产物包括酸性寡糖片段和中性寡糖片段。      

杏鲍菇柄抗氧化肽的制备及其稳定性初步分析

为研究杏鲍菇柄抗氧化肽的制备及其稳定性,以杏鲍菇柄为原料,利用酶解法制备杏鲍菇柄抗氧化肽,采用单因素实验研究酶解时间、料液比、碱性蛋白酶加酶量,利用响应面分析法对杏鲍菇柄抗氧化肽的制备工艺进行优化。结果表明,碱性蛋白酶效果最好,最佳工艺条件为:酶解时间为1.59 h、液料比(mL/g)为16.06:1、碱性蛋白酶加酶量为5846 U/g,DPPH自由基清除率为55.52%±0.89%;研究表明杏鲍菇柄抗氧化肽在不同温度(20~100℃)、pH(2~12)、金属离子(K⁺、Ca²⁺、Zn²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺)、食品原料(5.0%的NaCl、葡萄糖、淀粉、蔗糖、乳糖)下表现的抗氧化活性不同。综上,该工艺能很好地制备杏鲍菇柄抗氧化肽,同时在储存过程中要尽量避免与高温、强酸强碱环境及金属离子等这些因素接触,本研究为杏鲍菇柄的进一步开发利用提供了理论基础。     

碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉制备抗氧化多肽

为优化碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉蛋白制备抗氧化多肽的条件,采用响应面分析法,以·OH清除率为响应值,研究酶解温度、酶用量、酶解p H值对制备抗氧化肽的影响。此外,还研究了不同分子质量魔芋多肽的抗氧化活性,结果表明:最佳酶解工艺参数:底物质量分数2.25%、温度55℃、酶用量3 228 U/g底物、p H 7.84、水解时间270 min。该条件下抗氧化多肽(18.35 mg/m L)的·OH清除率为73.41%,多肽得率为75.37%。通过Sephadex G-25和Sephadex G-15串联柱分离得到5个多肽组分,其中分子质量为1 500 u和1 000 u的组分抗氧化活性较高,其清除DPPH·的IC50分别为2.82 mg/m L和3.65 mg/m L;清除·OH的IC50分别为9.03mg/m L和14.16 mg/m L;抑制大鼠肝脏自发性脂质过氧化的IC50分别为0.21 mg/m L和0.66 mg/m L;抑制大鼠红细胞H2O2诱导氧化溶血的IC50分别为0.11 mg/m L和0.22 mg/m L。     

酶解法制备鲟鱼皮活性肽条件优化及抗氧化能力

为提高从鲟鱼皮中提取的生物活性肽含量,以鲟鱼皮胶原蛋白为主要材料,以蛋白酶酶解后的肽得率为 主要考察指标,在单因素试验基础上利用正交试验分析加酶量、酶解温度、酶解时间对鲟鱼皮活性肽得率的影 响,并优化酶解条件。在此基础上以新鲜猪肉为模型,考察鲟鱼皮活性肽溶液处理对猪肉组织抗氧化酶（总超氧 化物歧化酶（total-superoxide dismutase,T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、 谷胱甘肽S转移酶（glutathione S-transferase,GST））活力的影响。结果表明：酶解鲟鱼皮胶原蛋白的最适 酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为加酶量12 000 U/g、酶解温度60 ℃、酶解时间4 h,在此条件下,肽得率为 （12.59±0.98）%;鲟鱼皮活性肽可以提高猪肉组织T-SOD、GSH-Px和GST活性,具有抗氧化功效。     

响应面法优化受精蛋蛋清制备抗氧化肽酶解工艺

以酶解产物的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,在单因素试验的基础上,选择酶解温度、pH值、底物质量浓度、加酶量4 个因素,通过Box-Behnken试验设计和响应面分析法优化酶解受精蛋蛋清制备抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明：在酶解温度46 ℃、pH 9.1、底物质量浓度4.28 g/100 mL、加酶量21 000 U/g条件下,所得酶解产物的DPPH自由基清除率活性最强,达到84.97%。碱性蛋白酶酶解得到的产物具有较强的抗氧化活性,优化工艺条件与理论预测拟合度高。     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

响应面法优化制备南瓜籽抗氧化肽的工艺

以南瓜籽分离蛋白为原料,采用酸性蛋白酶酶解制备南瓜籽抗氧化肽。选用加酶量、酶解温度、pH值、底物质量浓度、酶解时间作为研究对象,以酶解液对DPPH自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上,运用Plackett-Burman筛选试验确定显著因素,然后通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法优化制备南瓜籽抗氧化肽的酶解工艺条件。结果表明：酸性蛋白酶酶解南瓜籽蛋白质的最佳工艺条件为：酶解温度50℃、pH2.5、酶解时间5h、底物质量浓度0.05g/mL、加酶量6000U/g pro,在此条件下,DPPH自由基清除率可达到92.82%。     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

酶解鸢乌贼组织蛋白制备酸溶性肽的工艺优化

为有效利用鸢乌贼资源,对酶解鸢乌贼组织蛋白制备酸溶性肽的工艺进行了研究。比较了不同蛋白酶对鸢乌贼组织蛋白水解能力的差异,确定胰蛋白酶为水解鸢乌贼组织蛋白的最佳蛋白酶类型。先后采用单因素和响应面试验对酶解工艺条件进行了系统的研究及优化。确定了胰蛋白酶水解鸢乌贼组织蛋白的最佳工艺条件为:蛋白浓度3%,加酶量4210 U/g蛋白,pH9.23,酶解温度52.3 ℃,酶解时间5 h。在优化的工艺条件下,酸溶性肽的得率可以达到(74.02%±0.41%)。此外,氨基酸分析结果表明,经酶解得到的酸溶性肽基本保持了原鸢乌贼组织蛋白的氨基酸组成,8种必需氨基酸含量丰富,约占氨基酸总量的38%。试验结果表明,采用胰蛋白酶水解鸢乌贼制备酸溶性肽的工艺具有可行性。     

双酶法制备银杏抗氧化肽工艺研究

为获得制备银杏抗氧化肽的最佳工艺,采用2709碱性蛋白酶和胃蛋白酶分步水解银杏种仁蛋白,以总还原能力为指标,考察酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间这4个因素对银杏种仁蛋白酶解效果的影响。通过响应面试验得出2709碱性蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为6976U/g、酶解温度为55℃、pH值为8.9、酶解时间为5h,此时银杏种仁蛋白酶解液的总还原能力(A700nm)为1.278;通过正交试验,得到胃蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为9000U/g、pH值为3.0、酶解温度为50℃、酶解时间为2h,此时银杏种仁蛋白酶解液的A700nm为1.636。