笃斯越桔中酿酒酵母菌的筛选、鉴定及特性研究

从口感好、自然发酵的笃斯越桔果汁中分离出140株酵母菌.经过对酵母菌产气、产酒精情况的测定以及发酵酿酒后感官评定,筛选出4株酵母菌,分别编号为C13、C18、D07和D15.对这4株酵母菌进行形态学和生理学特征鉴定以及26SrDNA D1/D2区序列分析,最终鉴定出4株酵母菌为同一种菌,即酵母属(Saccharomyces )中的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).结合商业葡萄酒活性干酵母进行比较分析,选择优良菌株D15作为实验菌株,测定其生物特性,结果表明D15具有较好的发酵特性、耐受特性和快速生长特性.D15在20°Bx、pH 3.5笃斯越桔果汁中24℃发酵9d,残糖量为2.8 g/L,酒精度(V/V)为12.5%,可以作为笃斯越桔酒酿造的优选菌株.     

耐高温高产酒精酵母菌的筛选鉴定及特性研究

为了筛选耐高温产酒精酵母菌,以贵州省茅台镇酱香型酒厂的第四轮次酒醅为实验材料,采用平板划线分离法筛选出37株酵母菌,从37株酵母菌中通过热致死温度、TTC染色法获得1株耐高温且高产酒精的J18菌株,对其在最高发酵温度的耐乙醇、耐酸、耐糖及发酵力进行了研究。结果表明：J18菌株的最高发酵温度为44℃,耐乙醇浓度18%vol,最适生长pH值为5.5;最适生长葡萄糖浓度为35%,最适发酵条件下发酵力为4.881 g/100 mL。对该菌株进行形态学鉴定和26S rDNA测序,确定该菌株为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。     

西藏牦牛曲拉中高产酒精酵母菌株的分离及鉴定

从西藏不同海拔地区的曲拉样品分离得到80株酵母菌,经过TTC一级筛选、糖浓度耐性二级筛选和酒精发酵三级筛选获得1株发酵性能较好的菌株XZ3,结合生理生化特征和26S r DNAD1/D2序列分析,鉴定该菌株为Saccharomyces cerevisiae。     

发酵刺梨干红酵母菌的鉴定及优良菌株的筛选

对8株法国引进发酵刺梨干红酵母菌进行形态学、生理生化学及分子生物学分类鉴定;并结合刺梨干红生产特点,检测其发酵性能、抗逆性能等。经比较筛选出RC212号葡萄汁酵母(Saccharomyces uvarum)与DV10号汉氏德巴利氏酵母(De-baryomyces hansenii)2菌株。其表现出高发酵能力(残糖量≤1.00g/100mL);高产酒性能(原汁发酵酒度均达4°以上);发酵周期适中,发酵体系中生酸少,单宁含量少,同时还具有耐60%糖浓度、耐10%盐浓度及耐8%醋酸浓度的性能。为“刺梨干红工业化生产技术研究”提供了试验菌株。     

南疆传统发酵酸奶中酵母菌的分子鉴定及抗氧化活性研究

以开发新疆地区传统发酵乳中的酵母菌为研究目的,对分离的78株酵母菌利用26SrDNA D1/D2区和ITS转录区间分析以及抗氧化活性检测试剂盒进行分子鉴定和抗氧化活性检测。结果表明,78株酵母菌中具有抗氧化活性的菌株有42株,其中NG-40综合抗氧化能力突出,其抗氧化活性为(106.41±3.92)U/mL,抑制羟基自由基能力为(651.24±3.75)U/L,抗超氧阴离子能力为(104.11±3.25)U/mL,而脂质过氧化物含量仅为(1.99±0.65)μmol/L;分子鉴定结果表明,38株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),36株为马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),4株属于毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。     

富锌酵母的筛选和培养条件优化

从实验室分离得到的16株酵母菌中,筛选出一株耐高浓度锌的酵母菌Y14,通过26S rDNA D1/D2区序列比对分析,确定该菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。结果表明:培养基中添加300mg/L浓度的Zn,摇瓶培养48h时,Y14对Zn的吸附能力最高;正交实验结果显示,最适合Y14菌株吸附Zn的培养基组分为:葡萄糖20g/L、酵母粉10g/L、蛋白胨30g/L、KH_2PO_4 10g/L、Zn 300mg/L。优化后菌株对Zn吸附量提高50%左右,菌体锌含量达13.61mg/g。该菌株表现出对锌元素较强的吸附能力,具有进一步研究开发应用价值。     

26S rDNA序列分析法鉴定开菲尔发酵液中的酵母菌

利用26S r DNA D1/D2区序列分析法鉴定了内蒙古牧区传统开菲尔发酵液中的酵母菌,为筛选可发酵特色乳酒的酵母菌奠定基础。对所分离纯化得的酵母菌进行菌落特征和细胞显微形态区分,在形态鉴定基础上,选择代表菌进行26S r DNA D1/D2区序列分子鉴定。结果表明,共分离到36株酵母菌,形态聚类为5类,经DNA提取、26S r DNA D1/D2区PCR扩增、酶切、基因序列分析和同源性比对,鉴定为5种分子类型的酵母菌,分别为胶红酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)、诞沫假丝酵母菌(Candida zeylanoides)、发酵毕赤酵母菌(Pichia fermentans)、酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、有孢圆酵母菌(Torulaspora delbrueckii)。传统开菲尔发酵液中分离到的酿酒酵母,具有可发酵特色乳酒的潜质。     

新疆塔城地区乳源酵母菌的分离、鉴定及其抗胁迫特性

为收集、保护和发掘西部牧区传统发酵乳制品中酵母菌资源,从新疆塔城地区牧区共采集8份牧民自制乳制品样品。采用细胞形态学、生理生化特性鉴定、5.8S rDNA序列同源性比对相结合的方法,对酵母菌进行了分离、纯化和鉴定,并考察了其耐高温、耐渗透压、耐乙醇等能力。结果表明,共分离出16株库德毕赤酵母菌(Pichia kudriavzevii)、6株戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii)、4株美极梅奇酵母菌(Metschnikowia pulcherrima)、2株马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)、2株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、2株胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、2株乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)。库德毕赤酵母菌A2-1能够耐受42℃高温、2.4%高盐胁迫、50 g/100 g高糖胁迫以及12%酒精胁迫;马克思克鲁维酵母菌A2-13能够耐受42℃高温、2.4%高盐胁迫、50 g/100 g高糖胁迫以及16%酒精胁迫。可见,两株菌均能适应于工业开发需求。     

新疆传统馕发酵面团中酵母菌的多样性分析

采用平板分离与纯化、26S rDNA D1/D2区域序列测定和系统发育分析方法,对新疆乌鲁木齐、阿勒泰、伊犁、喀什、阿克苏及和田6 个地区民间传统馕面团发酵酵母菌多样性进行了研究。从中分离得到227 株酵母菌,它们隶属于10 个属14 个种：Saccharomyces cerevisiae、Saccharomyces servazzii、Pichia fermentans、Pichia membranifacies、Pichia kudriavzevii、Pichia anomala、Candida humilis、Hanseniaspora uvarum、Torulasporadelbrueckii、Wickerhamomyces anomalus、Cladosporium ramotenellum、Cryptococcus albidus、Kodamaea ohmeri、Issatchenkia orientalis;其中Saccharomyces cerevisiae为优势种,占总分离株的55.51%（126 株）,在系统发育树上形成2 个大分枝4 个小分枝,A1-1分枝由115 株菌株构成,是馕面团发酵的优势品系菌群。研究结果阐明了新疆民间传统馕面团中酵母菌的多样性,为开发利用传统馕面团的酵母菌资源提供了理论依据。     

桑椹酒专用酵母菌的选育

试验选择桑葚果、桑叶、桑葚园土壤和自然发酵的桑葚酒为原料,分离筛选酿酒酵母,共分离、纯化得到99株酵母菌。通过三级筛选,以产气能力、发酵能力、耐酒精与SO_2的能力等为条件,结合感官评定,与法国进口酵母D254进行发酵力对比分析,确定SH1菌株发酵最适合桑葚酒的发酵。SH1酵母菌最高能耐受14%的酒精和28%的糖度,最适生长温度为30℃,最佳SO_2浓度为100mg/L~120mg/L,最适pH为4.0~5.0,产酒精最高能达到10.6%,酒味纯正、风味良好,符合桑葚酒酒发酵的要求。     

一株有氧条件下高产乙醇酵母的筛选、鉴定及其生物学特性研究

采用平板涂布法从老白干香型大曲中获得一株有氧条件下高产乙醇酵母菌株,命名为YF1914。通过菌落形态、细胞显微结构、生理生化特性和26S rDNA D1/D2区方法对其进行鉴定,借助液体培养方式考察其乙醇耐受性、葡萄糖耐受性、乙酸耐受性、生长温度和pH等生物学特性。结果表明,该菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)属于乙醇高耐受性酵母,耐受乙醇最高体积分数为18%,同时还具有较高的NaCl和葡萄糖耐受性,最高耐受质量分数分别为15%和80%,在温度为20~50 ℃和pH1~10能够生长,具有宽广的温度和pH适应性。综上,该酵母这些优良特性有利于其在未来白酒酿造方式变化中发挥作用。     

清香风味导向的酿酒酵母Y2的分离鉴定及生物学特性研究

通过嗅觉和气相色谱分析,分离筛选得到一株高产乙酸乙酯的酵母菌株Y2。该酵母菌株在发酵液中28℃培养7 d,产乙酸乙酯量可达653 mg/L,酒精度达10.5%。通过菌落菌体形态观察、生理生化试验、26S rDNA D1/D2区域序列测序和genbank序列比对,初步确定菌株Y2为酿酒酵母。该菌株对发酵环境的耐受性较强,最高耐受温度39℃,pH 2.0,酒精度14%,糖度18%,是实际生产中理想的产香酿酒酵母。利用该菌株发酵的白酒具有清香、糟香、酯香,带酱感,落口酸爽、醇厚、绵柔,乙酸乙酯香突出,可用作清香白酒调香酒。     

Expression of the GPD1 and GPP2 orthologues and glycerol retention during growth of Debaryomyces hansenii at high NaCl concentrations

The highly NaCl-tolerant yeast Debaryomyces hansenii produces and obtains high levels of intracellular glycerol as a compatible solute when grown at high NaCl concentrations. The effect of high NaCl concentrations (4%, 8% and 12% w/v) on the glycerol production and the levels of intra- and extracellular glycerol was determined for two D. hansenii strains with different NaCl tolerance and compared to one strain of the moderately NaCl-tolerant yeast Saccharomyces cerevisiae. Initially, high NaCl tolerance seems to be determined by enhanced glycerol production, due to an increased expression of DhGPD1 and DhGPP2 (AL436338) in D. hansenii and GPD1 and GPP2 in S. cerevisiae; however, the ability to obtain high levels of intracellular glycerol seems to be more important. The two D. hansenii strains had higher levels of intracellular glycerol than the S. cerevisiae strain and were able to obtain high levels of intracellular glycerol, even at very high NaCl concentrations, indicating the presence of, for example, a type of closing channel, as previously described for other yeast species.     

五株酿酒醇母发酵特性比较

通过对安琪牌葡萄活性干酵母及菌株B、C、D的基本性能测试，得出安琪牌葡萄酒活性干酵母不仅应用方便，而且其耐低温、高酒精、高糖含量、高酸度的特性，使其应用更广泛。     

Identification of <Emphasis Type="Italic">Zygosaccharomyces mellis</Emphasis> strains in stored honey and their stress tolerance

To screen yeast with high sugar tolerance and evaluate their stress tolerance, six yeast strains were selected from 17 stored honey samples. The species were identified through 26S rRNA sequencing. Their stress tolerance was determined via the Durham fermentation method and ethanol production ability was determined via flask fermentation. The results demonstrated that all the six strains were Zygosaccharomyces mellis. Their sugar, ethanol, and acid tolerance ranges were 500–700 g/L, 10–12% (v/v), and pH 2.5–4.5, respectively. The SO₂ tolerance was 250 mg/L. Among the six strains, 6-7431 had the best stress tolerance with sugar tolerance of 700 g/L, ethanol tolerance of 12% (v/v), and acid tolerance of pH 2.5. Furthermore, the strain of 6-7431 had the highest percentage of ethanol production at the same initial sugar content as the other strains. Therefore, the selected six yeast strains would be promising fermentation yeasts for wine-making, ethanol production, or other fermentation purposes.     

冬果梨果酒酵母的筛选及鉴定

以冬果梨作为富集培养基,对野生酵母菌株进行收集、分离,得到980株;采用TTC平板法、耐乙醇性能测定以及产乙醇性能测定共三级筛选,最终筛得一株可耐受18%vol乙醇、乙醇产量达7.79%vol、发酵过程中糖利用率92.75%的菌株L-0301。通过对筛选所得菌株L-0301的形态特征观察、26S rDNA D1/D2区序列分析方法对菌株进行分类鉴定,结果显示,菌株L-0301为酵母亚科酵母属酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。     

白酒酿造酒醅与周边土壤中酵母菌多样性及东方伊萨酵母发酵特性比较

采用平板分离法,从白云边酒厂酒醅和周边土壤中分离获得120株酵母菌,采用26S rDNA D1/D2序列分析,比较2种环境中酵母菌的多样性,并测定不同来源的东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）菌株耐酸、耐温和乙醇耐受性及发酵产物乙醇和乙酸乙酯含量差异。结果表明,来自酒醅和土壤中的酵母菌多样性差异较大,土壤、酒醅中热带假丝酵母（Candida tropicalis）、盔形毕赤酵母（Pichia manshurica）分别占优势。I. orientalis在土壤和酒醅中均比较丰富,其耐酸、耐高温和高温下耐乙醇能力有差异,且来源酒醅的菌株在耐受性方面较来源土壤菌株有一定优势,来源酒醅I. orientalis菌株发酵产乙醇和乙酸乙酯含量显著高于来源土壤菌株。该研究结果将有助于揭示参入白酒发酵的菌种来源和I. orientalis优良菌株的选育。     

耐高温酵母的筛选鉴定及发酵性能的初步研究

为获得耐高温酵母菌,从白酒糟醅中分离筛选出1株在45℃生长良好且产乙醇能力较高的酵母菌株.经ITS和26S rDNAD1/D2区域序列分析比对,结合菌落菌体形态鉴定其为库德毕赤酵母.其最适生长温度为30℃,与安琪酵母相比较,高温条件下生长优势明显.以浓度为10％ (w/v)的葡萄糖为底物,在45℃进行静置发酵,其产乙醇浓度为18.74g/L,安琪酵母产乙醇浓度为11.40g/L,该菌株较安琪酵母表现出明显的优势.     

野木瓜酵母菌株抗性及发酵特性评价

以从野木瓜自然发酵过程中筛选出的8株发酵力强、产香好的酵母菌,对其进行抗性（温度耐受性、葡萄糖耐受性、酒精耐受性等）评价。供试菌株中,在NaCl浓度为140 g/L时,有4株菌仍可生长发酵并具耐高渗性,可用于高盐环境发酵中;菌株B7-2、C-4、BL-5的耐高温性较好,在55℃时仍可生长,可用于工业生产的高温环境;所有供试菌株都有很好的SO2耐受性,筛选的5株优良酵母模拟酒精发酵实验中,菌株C-4、B1-3产酒精度高于商品酵母RC212,可以作为优良酵母进一步开发利用。菌株B7-2产酒精度为0,但产香很好,可作为产香酵母在发酵过程中适量添加以增加香味,或者用于面包和无醇饮料的开发。     

耐受性黄酒酵母YS6.2.5的选育及初步应用

黄酒酵母的耐受性对黄酒酿造至关重要。对原始菌株YS 分别采用乙醇- 热冲击法、细胞紫外诱变法和原生质体紫外诱变法,结合高温驯育进行选育,筛选到一株在38℃能正常生长发酵的黄酒酵母突变株YS6.2.5。YS6.2.5体积小,近似圆形,产香好,产酸少,30℃时产酒精能力、酒精耐性、高糖耐性分别为9.0%、19%、30°Bx,38℃时相应指标分别为6.5%、20%、28°Bx。酿酒实验表明,其生理耐性强,酿酒性能好,遗传性状稳定,具有较好的工业应用前景。