鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用

目的：从鲫鱼卵中提取唾液酸糖蛋白,研究其对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用,并探究其作用机理。方法：采用切除大鼠双侧卵巢的方法建立骨质疏松症大鼠模型,灌胃鲫鱼卵唾液酸糖蛋白（400 mg/（kg·d））90 d后,分别检测大鼠尿液骨吸收指标（脱氧吡啶啉、钙、磷）、血清骨吸收指标（抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K）、血清骨生成指标（骨源性碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型前胶原羧基端前肽）以及血清骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、核因子κB受体活化因子（receptor activator for nuclear factor-κB,RANK）、核因子κB受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL）含量。结果：鲫鱼卵唾液酸糖蛋白能显著降低骨质疏松症大鼠尿液脱氧吡啶啉（P＜0.01）、钙（P＜0.01）、磷（P＜0.01）含量和血清抗酒石酸酸性磷酸酶（P＜0.01）、组织蛋白酶K（P＜0.01）活性,防止大鼠骨吸收;显著降低血清骨源性碱性磷酸酶（P＜0.01）活性和骨钙素（P＜0.01）、Ⅰ型前胶原羧基端前肽（P＜0.01）含量,抑制大鼠高骨转换速率;显著上调OPG（P＜0.01）含量,下调RANKL（P＜0.01）含量,降低RANKL/OPG比值,抑制破骨细胞增殖分化,降低骨吸收。结论：鲫鱼卵唾液酸糖蛋白具有改善去卵巢大鼠骨质疏松症的作用,其作用机理可能与下调RANKL/OPG比值有关。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用

本文研究了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoproteins of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用。以雄性SAMP6小鼠为老年性骨质疏松症动物模型,连续灌胃Ca-SGP 150d后,检测血清骨代谢生化标志物,测定小鼠股骨矿化沉积率、胫骨骨密度及松质骨微结构。结果显示,经Ca-SGP(500mg/kg·bw)干预后,小鼠血清中骨生成标志物骨源性碱性磷酸酶的活性和I型前胶原羧基端前肽、骨钙素的含量得到显著升高(p0.01),骨吸收标志物抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白酶K的活性得到显著抑制(p0.01);胫骨骨密度提高10.92%(p0.01);松质骨骨体积分数、骨小梁数目及厚度均得到显著增加(p0.01),骨小梁间隙显著缩小(p0.01);骨矿化沉积率提高98.87%,差异显著(p0.01)。该研究表明Ca-SGP可改善老年性骨质疏松症小鼠低骨转换,提高骨密度,改善骨小梁结构,促进骨矿化,为开发抗骨质疏松症药物和功能食品提供了理论支持。     

体外模拟胃肠道对鲫鱼卵唾液酸糖蛋白的降解作用

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(sialoglycoprotein from Carassius auratus eggs,Ca-SGP)是从鲫鱼卵中筛选分离出的一种新型唾液酸糖蛋白,具有改善骨代谢、调节免疫力等功效。然而Ca-SGP属于大分子质量(195.35 kDa)物质,其如何通过胃肠道被降解并利用的仍不清楚。本实验旨在研究胃肠液及大肠肠道菌群对Ca-SGP的降解作用,以期为深入探索Ca-SGP作用机理提供参考。本实验以唾液酸糖蛋白为研究对象,采用体外静态胃肠模拟系统,通过检测不同阶段的产物分子质量、pH值、唾液酸含量及还原糖质量浓度来研究胃肠液及大肠肠道菌群对Ca-SGP的降解作用。结果表明:经过胃肠道消化后Ca-SGP的分子质量减小,唾液酸含量减少,还原糖质量浓度增加,说明胃肠液对Ca-SGP有一定的降解作用,Ca-SGP糖链末端的活性因子唾液酸能够在胃肠消化酶的作用下发生脱落;Ca-SGP经过肠道菌群发酵后,分子质量不断减小,还原糖质量浓度降低,说明Ca-SGP能够不断被微生物发酵并且利用,发酵后溶液pH值呈现逐渐下降趋势,推测可能与产生短链脂肪酸等酸性物质有关。提示胃肠液对Ca-SG...     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

从鲫鱼卵中提取唾液酸糖蛋白,并探讨其对免疫功能低下小鼠免疫功能的作用。Balb/c小鼠连续皮下注射氢化可的松造成免疫功能低下模型,以不同剂量的鲫鱼卵唾液酸蛋白灌胃28d后,分别测定小鼠的抗体产生水平、T细胞免疫功能、非特异性免疫功能和血清IFN-γ/IL-4。结果显示,高剂量的鲫鱼卵唾液酸糖蛋白能显著升高免疫低下小鼠的血清溶血素水平(p0.01)和抗体细胞生成数(p0.01),增强脾淋巴细胞增殖能力(p0.01)和迟发型变态反应(p0.05),显著提高腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数(p0.01),改善碳廓清能力(p0.05)并升高血清中IFN-γ/IL-4水平(p0.01)。说明鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠具有显著的免疫调节作用。     

响应面法优化鱿鱼缠卵腺糖蛋白提取工艺研究

以鱿鱼缠卵腺为原料,在单因素实验的基础上,通过响应面实验设计优化了鱿鱼缠卵腺糖蛋白提取的工艺条件。结果表明,从鱿鱼缠卵腺中提取糖蛋白的最佳工艺条件为:提取时间3.5h,提取温度25℃,NaOH浓度0.37mol/L,在该条件下,提取率为12.79%,获得的糖蛋白中糖含量为72.5%,蛋白含量22.7%,硫酸根含量3.0%,是一种硫酸化的粘蛋白。      

响应面法优化鱿鱼缠卵腺糖蛋白提取工艺研究

以鱿鱼缠卵腺为原料,在单因素实验的基础上,通过响应面实验设计优化了鱿鱼缠卵腺糖蛋白提取的工艺条件。结果表明,从鱿鱼缠卵腺中提取糖蛋白的最佳工艺条件为:提取时间3.5h,提取温度25℃,NaOH浓度0.37mol/L,在该条件下,提取率为12.79%,获得的糖蛋白中糖含量为72.5%,蛋白含量22.7%,硫酸根含量3.0%,是一种硫酸化的粘蛋白。     

超声辅助制备带鱼副产物糖蛋白工艺优化

在测定带鱼副产物基本营养成分的基础上,采用超声辅助盐提法制备带鱼副产物糖蛋白,考察不同因素（Na-Cl浓度、提取时间、提取温度、料液比、超声功率、超声时间）对糖蛋白得率的影响,利用响应面设计进一步对提取条件进行优化,获得带鱼副产物糖蛋白的最佳提取工艺条件。研究结果表明,带鱼副产物糖蛋白的最佳制备条件：NaCl浓度0.4 mol/L,提取时间1.5 h,提取温度78℃,料液比1:10（g/mL）,超声功率525 W,超声时间21 min,在此条件下带鱼副产物糖蛋白得率为（9.20±0.20）mg/g。     

响应面法优化人参糖蛋白制备工艺

目的:优化人参糖蛋白的制备工艺.方法:利用Box-Behnken响应面法分析提取时间、提取次数、料液比、乙醇体积分数对人参糖蛋白的影响.结果:最优人参糖蛋白制备工艺为提取时间1.5 h、提取次数3次、料液比(m人参粗粉∶V蒸馏水)1.0∶ 15.4(g/mL)、乙醇体积分数72％,该条件下人参糖蛋白质量分数为24.14...     

鸡蛋壳膜提取唾液酸过程中蛋白质脱除工艺优化

以鸡蛋壳膜为原料,用乙醇沉淀法脱除蛋白质以提取唾液酸。利用二次回归中心组合设计对影响蛋白质去除率和唾液酸回收率的乙醇体积分数、加热温度、加热时间、pH值4个因素进行回归分析和优化,建立四元二次回归模型。结果表明因素的影响大小顺序为：乙醇体积分数＞加热温度＞pH值＞加热时间,确定最佳工艺参数为：乙醇体积分数30%、加热温度80℃、加热时间1h、pH2。在此条件下,蛋白质去除率为52.3%,唾液酸回收率为82.1%,经验证实验得到实验结果与模型预测值吻合,说明建立的模型确实可行。     

响应面法优化北五味子水溶性糖蛋白提取工艺

为探讨碱提酸沉法提取北五味子水溶性糖蛋白的最优条件,采用响应面分析法,在单因素试验的基础上,选择料液比、浸提时间、浸提温度和碱提液p H值为影响因素,以蛋白得率和糖得率为响应值,采用中心组合Box-Benhnken法建立数学模型,进行响应面分析。结果表明,碱提酸沉法提取北五味子水溶性糖蛋白的最佳工艺条件为:料液比1∶35(g/m L),碱提液p H 9.5,浸提温度35℃,浸提时间3 h,该条件下蛋白质得率为7.72%,糖得率为19.24%。     

重金属镉在鲫鱼鳃组织中的积累及其对P-糖蛋白基因表达的影响

以鲫鱼(Carassius auratus)为试验材料,研究了在2.12、4.23、8.46 mg/L不同浓度镉(CdCl₂·2.5H₂O)的胁迫下,Cd在鲫鱼鳃组织96 h内的富集量及其对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)活性和mRNA表达的影响。结果表明,不同Cd浓度和时间处理均对鲫鱼腮内的Cd富集量、P-gp的活性变化及基因表达量有明显影响。暴露于2.12 mg/L Cd后,Cd的富集量在48 h达到最大值,之后有所降低并趋于稳定;暴露于4.23、8.46 mg/L Cd后,Cd的富集量随着处理时间的延长明显升高,呈明显的时间依赖关系。在Cd的胁迫下,鲫鱼鳃组织中P-gp的活性以及mRNA的表达显著升高(P<0.05),且在不同Cd浓度处理下,P-gp活性和mRNA的表达均在72 h达到最大。研究表明P-gp在鲫鱼自身抗Cd机制中发挥了作用,可较敏感地反映水环境中重金属Cd浓度或含量。     

佛手黄酮提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本研究通过乙醇回流法提取佛手黄酮,在单因素实验的基础上,以得率为指标,通过响应面优化分析,优化佛手总黄酮的提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行评价。结果表明:佛手黄酮最佳提取条件为:乙醇浓度73%,提取温度80℃,提取时间90 min,料液比1:31 g/mL。在此条件下黄酮得率为1.34%;佛手黄酮对DPPH和ABTS自由基均有一定的清除作用,且呈明显的剂量效应关系,其中DPPH自由基清除率的IC₅₀为0.8 mg/mL,ABTS自由基清除率的IC₅₀为0.07 mg/mL。ORAC(总抗氧化能力)为20.18 μmol TE/g。以上结果表明,佛手黄酮是一种良好的天然抗氧化剂。     

超声辅助提取蛋黄卵磷脂工艺优化及其理化特性研究

目的:优化超声辅助乙醇提取蛋黄卵磷脂的工艺参数,并对提取产品的稳定性和抗氧化活性进行研究。方法:采用响应面方法,优化影响蛋黄卵磷脂的主要参数(液料比、乙醇浓度、时间);运用薄层色谱、红外光谱、气相-质谱联用法分析了卵磷脂结构和脂肪酸组成;并研究了卵磷脂稳定性和抗氧化活性。结果:超声辅助乙醇提取蛋黄卵磷脂最优工艺参数为:液料比15:1 (mL/g),乙醇浓度92%,提取时间22 min。在此条件下,提取所得卵磷脂含量为375.69 mg/g。薄层色谱和红外光谱确定提取物为蛋黄卵磷脂;气相色谱-质谱联用法检测了蛋黄卵磷脂中脂肪酸组成,主要为油酸、亚油酸、硬脂酸和软脂酸。稳定性和抗氧化活性分析表明,光照和温度影响卵磷脂的抗氧化活性和稳定性,蛋黄卵磷脂的稳定性和抗氧化活性优于大豆卵磷脂。结论:超声辅助乙醇法是一种较好的提取蛋黄卵磷脂的方法,本研究成果为蛋黄卵磷脂的提取、贮藏和综合利用提供了一定的技术支持。     

响应面法优化卵黄蛋白质提取工艺

利用有机溶剂沉淀蛋白的方法对卵黄蛋白质的提取工艺进行研究。采用乙醚低温回流的方法脱去蛋黄粉中的脂肪,然后在单因素试验基础上,通过响应曲面法优化试验,以提取卵黄蛋白质含量为评价指标,得到卵黄蛋白质的最佳提取条件:蛋黄粉的浓度为29%,乙醇溶液的浓度为48.7%,pH值为4.35和氯化钠的浓度为0.018 mol/L(全部提取过程均保持0℃~4℃)。在此条件下,卵黄蛋白质的最高提取率可达72.20%。     

鸡骨草多糖的酶法提取工艺优化及其抗氧化活性

目的:研究纤维素酶提取鸡骨草有效成分多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以鸡骨草多糖得率为响应值,在单因素实验基础上,以液料比、酶解时间、酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件,并采用DPPH·和·OH清除能力体系评价鸡骨草多糖体外抗氧化活性。结果:最佳提取条件为:液料比13:1 mL/g,纤维素酶酶解时间60 min,酶添加量12.8 mg/mL,酶解温度50 ℃,pH5.0,在此条件下鸡骨草多糖得率为8.15%,与理论值8.34%相对误差小于5%。酶添加量对多糖得率影响最大,液料比、酶解时间次之,酶解温度影响最小。鸡骨草多糖对DPPH·和·OH清除的半数抑制浓度IC₅₀分别为1.591、1.926 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:鸡骨草多糖纤维素酶酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

响应面法优化碱法提取林蛙卵团中粗多糖的工艺研究

以林蛙卵团胶状物为原料,采用碱法对粗多糖进行提取,在单因素试验基础上,采用响应面法对NaOH溶液浓度、料液比、提取温度及提取时间进行优化。结果表明,碱法提取林蛙卵团胶状物粗多糖的最佳工艺条件为NaOH 溶液浓度1.2mol/L、料液比1:8(g/mL)、浸提温度56℃、浸提时间73min。在此条件下林蛙卵团胶状物粗多糖含量可达24.01mg/g。     

蓝刺头多糖提取工艺优化及其抗氧化活性

本试验用水提醇沉法提取蓝刺头多糖(Echinops latifolius tausch polysaccharide,ETP),通过单因素和响应面法对ETP提取工艺进行优化,并对蓝刺头提取物进行体外抗氧化活性的测定。结果表明,蓝刺头多糖的最佳提取条件为:料液比1:20 g/mL、提取时间2 h、提取温度100 ℃。在最优条件下多糖的得率为1.191%。清除自由基结果显示,在一定浓度范围内,蓝刺头多糖对DPPH·清除率最高达93.69%,对·OH清除率最高达97.44%,对O₂^-·清除率最高达67.96%。研究表明,响应面对ETP的提取优化条件合理,同时保留了该多糖良好的抗氧化活性,为其临床应用提供一定的理论依据。     

线叶旋覆花总黄酮的提取工艺优化及其抗氧化活性分析

采用响应面法优化线叶旋覆花总黄酮的提取工艺,评价最佳条件下得到提取物的抗氧化活性。以线叶旋覆花总黄酮提取量为指标,考察乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间对总黄酮提取量的影响。在单因素试验的基础上,采用4因素3水平的响应面法确定线叶旋覆花总黄酮的提取工艺。结果表明,线叶旋覆花总黄酮提取的最佳工艺为:乙醇体积分数70%、提取温度87℃、液料比31:1 mL/g、提取时间40 min,线叶旋覆花总黄酮提取量为(33.62±0.0207) mg/g。最佳工艺条件下得到的提取物对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(IC₅₀=0.074 mg/mL)的清除能力强于V_C(IC₅₀=0.082 mg/mL),但对OH·的清除能力明显弱于V_C。响应面法优化线叶旋覆花总黄酮提取工艺切实可行,得到的总黄酮有较强的抗氧化活性,为线叶旋覆花总黄酮的开发提供理论依据。     

超声波提取炒王不留行总三萜的工艺优化及其抑菌活性研究

优化炒王不留行总三萜提取工艺,并分析其抑菌活性。在单因素实验的基础上,选取乙醇浓度、液料比、超声温度和超声时间为自变量,总三萜得率为响应值,采用4因素3水平的响应曲面分析法优化炒王不留行总三萜提取工艺;并采用倍比稀释法研究炒王不留行总三萜提取物对10种常见致病菌的抑菌作用。结果表明,超声波辅助提取炒王不留行总三萜最佳提取工艺条件为:乙醇浓度65%,料液比1:25(g/mL),超声温度63℃,超声时间40 min。在此工艺条件下,炒王不留行总三萜的得率为1.24%±0.003%,与模型预测值1.28%之间具有良好的拟合性。炒王不留行总三萜提取物对所选10种常见致病菌均有一定的抑制作用,尤其是对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌和肺炎链球菌抑制作用最强,其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均在1.25~5 mg/mL之间。该提取方法稳定、高效,可用于炒王不留行中总三萜的提取,同时提取物具有较强的广谱抗菌作用。     

超声波辅助提取麻城福白菊总黄酮工艺优化及其抗氧化活性分析

以麻城福白菊为原材料,采用单因素及响应面优化超声辅助提取黄酮工艺条件,并评价最优条件下黄酮提取物的抗氧化活性。结果表明,超声波功率为440 W,超声温度为60 ℃,超声时间为50 min。在此条件下福白菊总黄酮的得率为7.15%。当福白菊黄酮浓度为0.05 g/L时,总还原能力最强,此时测得吸光度值为0.341;当福白菊黄酮浓度为0.50 g/L时,福白菊黄酮对2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除率达81.25%,其对DPPH自由基的IC₅₀值为0.191 g/L,表明其具有较好的抗氧化活性。