Alcalase酶解高底物浓度玉米蛋白工艺优化

以玉米蛋白粉为原料,研究底物浓度、加酶量、水解液pH值和水解温度对酶解产物水解度、可溶性蛋白含量、抗氧化活力和蛋白转换率的影响.首先将玉米蛋白粉顺次进行碱洗、α-淀粉酶去淀粉和高温蒸煮预处理,以破坏蛋白高级结构和去除淀粉,然后以碱性蛋白酶Alcalase为生物催化剂进行玉米蛋白(10％～15％,m∶V)的限制性水解.结果表明,最适酶解条件:底物浓度13.5％(m∶V),加酶量2％,水解温度68℃,反应体系pH值7.7,总水解时间210min.在上述条件下,蛋白水解度为28.81％,水解液的可溶性蛋白含量为31.69mg/mL,水解物抗氧化活性为547.83U/mL,蛋白转化率为36.92％.获得的玉米蛋白水解物的溶解性显著增加,具有良好的抗氧化活性,显示了其在食品和药品等行业应用的潜力和前景.     

改性对玉米蛋白质功能性质和结构的影响(I)酶解

蛋白质的食品功能性质主要由其结构决定 ,改性是改善或加强某些食物蛋白的功能性质的有效方法。通过Asl.398枯草杆菌中性蛋白酶对玉米蛋白质的水解改性发现 ,Asl.398蛋白酶对玉米蛋白质的最大水解度为 2 9.47% ;随水解度的增大 ,水解物的表面疏水性先增大后减少 ,分子柔性不断增大 ,溶液粘度不断降低 ,这表明水解使玉米蛋白结构发生了明显变化。而随着水解度的增大 ,玉米蛋白质的水溶性大幅度提升 ,水解度为 3.0 %的水解物的乳化活性最大 ,而水解度为 9.0 %的水解物的乳化稳定性最高     

水酶法提取玉米胚芽油的优化工艺研究

对水酶法提取玉米胚芽油的最适酶进行了确定,以纤维素酶和中温α-淀粉酶复合使用效果最好.在纤维素酶和中温α-淀粉酶复配比例为1:1条件下,用响应面分析法对水酶法提取玉米胚芽油的工艺进行了优化,以玉米胚芽油的得率为响应值,确定了酶水解的最适参数:液固比5.1:1,蒸汽处理19.6 min,酶的添加量1.037%(V/W),酶解时间6 h.在此条件下的提油率为89.75%.     

水酶法提取玉米胚芽油研究

在水酶法制取玉米胚芽的工艺中，纤维素酶和中温－α淀粉酶的复合作用能显著提高玉米胚芽油的收率。其最适参数为：料液比为１∶５；蒸汽预处理时间为２５分钟，酶的加酶量为０．８％（纤维素酶和淀粉酶的配比为５∶３），反应时间为６小时。     

玉米蛋白复合风味蛋白酶水解物性质的研究

以玉米蛋白为原料,主要研究了通过复合风味蛋白酶水解制备的玉米蛋白水解物的功能特性。结果表明:玉米蛋白经复合风味蛋白酶水解后水解度为11.43%,体外实验该水解度下的玉米蛋白水解物结合胆汁酸的能力较强,相对分子质量分布在10 000～180 Da之间,水解物中有高含量的疏水性氨基酸残留。玉米蛋白水解物持水性为2.95 mL/g,持油性为2.13 mL/g,乳化性为49.96 mL/g,起泡性为126%。玉米蛋白水解物经Sephadex G-15、RP-HPLC分离纯化,对含量最高的组分F2,用MALDI-TOF/TOF MS/MS方法进行鉴定,其相对分子质量为244.2 Da,氨基酸组成为脯氨酸-谷氨酰胺。     

酶底比对玉米蛋白水解物抗氧化活性的影响

为改善玉米蛋白的功能特性,开发其生理活性,采用复合蛋白酶(Protamex)和碱性蛋白酶(Alcalase)对高底物浓度1:10(m/v)玉米蛋白进行协同水解,研究酶底比对蛋白水解物的DPPH自由基清除率、·OH清除活性、Fe2+螯合能力、还原力、水解度(DH)和可溶性蛋白含量的影响。结果表明,在试验范围内,Protamex+Alcalase顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:2.0%+2.0%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(82.01±0.62)%,·OH自由基的清除活性为(78.8±0.56)%,Fe2+螯合能力为(43.3±1.20)%,还原力为0.43±0.03,DH为(19.93±0.59)%,可溶性蛋白含量为(63.20±0.04)mg/m L;Alcalase+Protamex顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:0.5%+0.5%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(84.99±0.20)%,·OH自由基的清除活性为(89.9±1.63)%,Fe2+螯合能力为(40.95±0.43)%,还原力为0.454±0.01,DH为(9.43±0.70)%,可溶性蛋白含量为(40.54±0.01)mg/m L。因此,酶底比显著影响了玉米蛋白水解物的抗氧化活性。     

玉米蛋白酶水解物对生肉糜脂肪氧化的抑制研究

采用碱性蛋白酶(Alcalase)对玉米蛋白进行水解,水解时间为0.5～6 h,通过测定不同水解时间水解物的水解度及水解物的还原能力,得出水解5 h水解物具有最强的抗氧化活性.将5 h玉米蛋白水解物、未水解玉米蛋白、BHA添加到生肉糜中,比较各处理组对肉糜颜色和脂质氧化的影响,得出添加2.0%水解物的处理组在冷藏过程中能显著抑制脂肪的氧化,并能保持肉糜鲜红的色泽.水解物对脂肪氧化的抑制效果要明显好于未水解的玉米蛋白,而且抗氧化效果同添加0.02%BHA的效果相近.     

中性蛋白酶及碱性蛋白酶制备玉米粗肽的醒酒活性比较

本文旨在使玉米蛋白增值,为工业化生产玉米醒酒肽提供依据.采用气相色谱、氨基酸自动分析仪等仪器,研究了玉米蛋白水解物--粗肽的醒酒活性.结果表明：中性蛋白酶的低水解度粗肽（2h、酶底比0.5%、料液比1：25）能使小鼠血醇浓度降低54.06%,但该粗肽的蛋白回收率太低.碱性蛋白酶的中水解度粗肽（4h、酶底比0.5%、料液比1：20）的醒酒活性高,并存在剂量效应关系,其剂量为800 mg/kg.bw时,小鼠血醇浓度降低了62.80%,且该粗肽的蛋白回收率高,具有开发价值.     

水酶法提取玉米胚芽油的研究

在水酶法制取玉米胚芽油的工艺中 ,纤维素酶和中温 α淀粉酶的复合作用能显著提高玉米胚芽油的收率。其最适参数为 :料液比 1∶5 ,蒸汽预处理时间 2 0min ,酶的加入量 0 8% (纤维素酶和淀粉酶的配比为 5∶3) ;反应时间 6h ,提油率可达 89 75 %。     

梭子蟹下脚料酶法制取蛋白水解物最佳工艺的研究

采用酶法从梭子蟹下脚料中制取蛋白水解物,并利用单因素试验和正交试验对最佳酶解条件进行研究。结果表明,梭子蟹下脚料最适的水解蛋白酶为碱性蛋白酶;在液料比3:1 时,最适酶解条件为温度55℃、时间3.0h、pH8.5、加酶量(E/S)1000U/g,此时水解度为26.68%,其中温度对水解度的影响最大,其次为加酶量;蛋白水解物的分子量小于10kD,蛋白水解呈味氨基酸含量为412.6mg/L,占氨基酸总量的39.42%,具有很高的营养价值和应用前景。     

玉米蛋白水解物的酶法制备及其对结肠炎的缓解作用

为了探究玉米蛋白水解物对肠道屏障功能的保护作用，本文首先以玉米蛋白粉为原料，采用Alcalase对其进行酶解，考察了不同酶解条件对水解物中谷氨酰胺含量的影响，建立了玉米蛋白的最适水解体系。然后以葡聚糖硫酸钠为诱导剂构建小鼠结肠炎模型，系统的评价了玉米蛋白水解物对小鼠结肠炎的缓解作用。结果表明：Alcalase的最适酶解条件为酶解温度64℃，酶解时间2.5 h，加酶量1300 U/g；在此条件下，水解物中谷氨酰胺含量可达到8.79%。所制得的玉米蛋白水解物（375和625 mg/kg·bw）能够明显改善结肠炎小鼠体重下降，缓解结肠缩短，降低疾病活动指数，减轻结肠组织中炎症细胞的浸润，调节炎症细胞因子水平。玉米蛋白水解物对小鼠结肠炎具有良好的缓解作用，本研究旨为拓宽玉米蛋白粉的高值化利用及开发肠道保护的功能性食品提供理论依据。     

Enzymatic preparation and functional properties of wheat gluten hydrolysates

The water-insolublity of wheat gluten is one of the major limitations for its more extensive use in food processing. Wheat gluten was enzymatically hydrolyzed by several commercially available proteases (Pancreatin Trypsin 6.0S, Porcine pepsin, Pancreatin and Alcalase 2.4L) with protein recovery varying from 42.5 ± 0.7% to 81.3 ± 0.1%. The hydrolytic efficiency of these proteases on wheat gluten was also compared. Alcalase served best for the preparation of wheat gluten hydrolysates (WGHs). Thus, Alcalase-assisted hydrolysates of wheat gluten (AWGHs) with different degrees of hydrolysis (DH 5.0, 10.0 and 15.0%) were further assessed for their functionalities. All the AWGHs had excellent solubility (>60%) over a pH range of 2–12. The emulsifying and foaming properties of AWGH with relatively low DH (5.0%) were remarkably higher compared to the original gluten. However, extensive hydrolysis of gluten resulted in remarkable reduction in emulsifying and foaming properties.     

功能栗仁的酶法制备及功能评价

对完整形态的板栗仁进行酶解,使之含有功能性短肽,以强化或者赋予其保健功能,拟开发出具有降血压和抗氧化活性的功能栗仁产品。主要对功能栗仁制备的关键技术进行研究,包括蛋白酶的选择、酶解条件的优化、酶解后栗仁的功能评价等。结果表明：采用木瓜蛋白酶酶解可得到较高的短肽得率和水解度;木瓜蛋白酶与α-淀粉酶复合可提高短肽得率;木瓜蛋白酶和其他蛋白酶复合可提高水解度,其中与Flowryme复合水解度提高最为明显;蛋白酶用量过低或过高均不利于酶解反应进行;α-淀粉酶(Liquozyme Supra)的适宜用量为0.35g/100mL蛋白酶液,木瓜蛋白酶和Flowryme适宜的配比为2:1(m/m),蛋白酶的适宜用量为8000U/g,当酶解温度55℃、酶解时间15h时,短肽得率为43.62%、水解度为26.27%;板栗水解物具有较好的ACE(血管紧张素转化酶)抑制和抗氧化活性,ACE抑制的IC50为4.70mg/mL,亚油酸氧化抑制的IC50值为4.26mg/mL,清除超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的IC50值分别为2.77、7.78、4.30mg/mL。     

改性对玉米蛋白质功能性质和结构的影响—（Ⅲ）复合改性

改性是加强食品蛋白质功能性质的有效方法,复合改性是现代食品蛋白质化学的热点研究,通过琥珀酰化对3%水解度玉米蛋白质水解物的改性发现,随酰程度的增大,玉米蛋白质水解物的分子柔性,表面疏水性和溶性粘度不断增大,这一方面表明3%水解度的玉米蛋白质水解仍具有部分蛋白质高级结构,另一方面表明琥珀酰化改变了玉米蛋白质水解物的结构,而随着琥珀酰化程度的增大,玉米蛋白质水解物的乳化活性和乳化稳定性得到加强,这表明复合改性明显得优于单一改性。     

增溶预处理对面筋蛋白功能性质和酶解效率的影响

采用低浓度尿素和添加少量乙醇对小麦面筋蛋白进行预处理,旨在提高其溶解性,改善其功能性质以及酶解特性,从而拓宽应用范围.结果表明:尿素预处理使面筋蛋白质溶解度从8%提高到45%左右,尿素-乙醇预处理提高到40%,乙醇预处理提高到38.8%.乙醇、尿素预处理均利于水解度的提高,尿素-乙醇预处理则不利于水解度的提高.各种预处理对其起泡性都有显著提高,尿素对泡沫稳定性的改善效果显著,60 min后仍维持有80%以上的起始泡沫体积,而对乳化性和乳化稳定性的改善作用次于未处理的.酶解产物螯合亚铁离子能力结果表明预处理能显著提高其螯合能力,水解度(DH)越大螯合能力越大.DH 15%的酶解产物中,0.5 mol/L尿素预处理5 h结果最佳,提高至92.3%.     

玉米黄粉中淀粉含量对热处理效果的影响

以5批淀粉含量不同的玉米黄粉为原料,以水解度为检测指标,研究玉米黄粉中淀粉含量对热处理效果的影响,结果表明:在温度121℃、时间30min的热处理条件下,热处理可将玉米黄粉中的淀粉全部去除。热处理的效果受玉米黄粉中淀粉含量的影响,当淀粉含量大于17.07%时,热处理才对酶解效率有促进作用,但仅使玉米黄粉的水解度提高了1.73%。用反相色谱方法研究了热处理对玉米黄粉中醇溶蛋白结构变化的影响,图谱表明,热处理可以使醇溶蛋白各组分的疏水性能和相对提取率增加。     

酶法处理玉米胚芽粕提取蛋白质的条件初探

选用提油后的玉米胚芽粕为原料,利用纤维素酶对预处理后的胚芽粕进行水解,通过测定离心液中的糖量,残渣中纤维素水解率及浓缩后蛋白质含量等指标,考察胚芽粕预处理过程及酶解过程中几个主要因素对蛋白提取效果的影响。结果表明,预处理过程中4个因素对蛋白质提取效果影响的次序依次为:浸泡温度>浸泡时间>料液比>样品粒度。酶解过程中3个因素对蛋白质提取效果影响的次序依次为:加酶量>酶解时间>pH。结合正交试验的结果,同时考虑经济节约的原则,得到最佳组合为:浸泡温度35℃,浸泡时间48 h,料液比1:12,粒度100目,加酶量2%,酶解时间48 h,pH值4.5。最佳条件下测定产品中蛋白质含量可达42.5%。     

挤压膨化玉米黄粉酶解制备生物活性肽

采用挤压膨化的方法预处理玉米黄粉,可提高Alcalase酶解玉米黄粉的水解度。确定了Alcalase酶解玉米黄粉的适宜条件,即60℃,pH8.5,底物浓度5%,加酶量3%,反应60min。该条件下玉米黄粉水解度为39.54%,水解物的分子量主要分布在3819～663Da之间。Alcalase酶解玉米黄粉的水解产物具有抗氧化活性。     

酸枣仁蛋白的不同蛋白酶酶解产物功能特性及抗氧化活性分析

以酸枣仁为原料,采用碱提酸沉法对酸枣仁蛋白进行提取,用三种不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)对酸枣仁蛋白进行酶解,得到三种酶解物,研究不同酸枣仁蛋白酶解物的功能特性和抗氧化活性.结果表明,与酸枣仁蛋白相比,不同酸枣仁蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性及其稳定性、乳化性及其稳定性均具有不同程度地提高,其中,...     

核桃蛋白酶解产物的特性研究

研究不同水解度下的核桃蛋白酶解产物的溶解性、乳化性、起泡性、表面疏水性及氮回收率的变化。结果表明：核桃酶解产物溶解度明显增高,均达85% 以上;水解度为9.29% 时乳化性和起泡能力最强;表面疏水性随着水解度的增大而降低;氮回收率随着水解度的增大而升高,水解度为11.76% 时氮回收率可达88.42%。