茉莉酸甲酯诱导采后番茄果实抗病的作用

为寻找安全无毒的采后保鲜防病途径,探讨茉莉酸甲酯(MeJA)在采后番茄果实诱导抗病性中的作用和机制。以绿熟期“丽春”番茄为材料,接种灰霉菌,并观察该菌对诱导抗病性的作用,研究MeJA对采后抗病的反应及其诱导作用,并对不同处理中番茄果实抵抗病原菌侵染能力、茉莉酸类物质含量、植物抗菌物质含量的诱导差异进行检测。结果表明：外源MeJA处理能够有效抑制番茄果实采后病害的发生,提高果实对琏格孢霉(Alternaria solani)、灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)、扩展青霉(Penicillium expansum)、匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)病原菌侵染的广谱抗性,并通过诱导包括病程相关蛋白、酚类、番茄红素在内的抗菌物质积累,达到诱导抗病效果。     

茉莉酸在L-谷氨酸诱导的番茄果实抗性中的作用

为解析植物激素茉莉酸在化学激发子L-谷氨酸诱导抗性机制中的作用,以番茄果实为对象,经0.1 mg/mL L-谷氨酸和0.1 mmol/L茉莉酸甲酯处理后接种链格孢菌孢子悬浮液,观察果实的发病率。采用实时荧光定量PCR方法从转录水平上分析L-谷氨酸对果实茉莉酸合成路径和信号路径上关键基因表达的影响。结果显示：番茄果实经L-谷氨酸处理后其发病率较对照组下降了35%,而在茉莉酸甲酯处理组中,L-谷氨酸与对照组发病率无显著差异;茉莉酸路径上编码脂氧合酶、丙二烯氧化物合酶、丙二烯氧化物环化酶、冠菌素不敏感蛋白1、转录因子MYC2和蛋白酶抑制剂PI-II的基因不同程度地被L-谷氨酸下调表达,同时茉莉酸信号路径的负调控因子JAZ1则被诱导上调表达。综上,在番茄果实与链格孢菌互作中,L-谷氨酸可能通过抑制果实的茉莉酸路径来调控对病原菌的防御反应,这解析了L-谷氨酸作为激发子响应病原菌侵染的抗性机制,也为其商业化应用提供理论依据。     

拮抗酵母控制樱桃番茄采后病害及其机制研究

通过体外和体内试验,从实验室保存的酵母菌中筛选对樱桃番茄采后黑斑病具有控制作用的拮抗酵母,考察所筛选的拮抗酵母对樱桃番茄自然腐烂的防治效果及对果实品质的影响。通过拮抗酵母对黑斑病病原菌链格孢孢子萌发、芽管伸长和菌丝结构的影响,在樱桃番茄伤口处和表面的生长动态,探讨其对病原菌的直接和间接抑制作用。采用RT-qPCR技术测定拮抗酵母对樱桃番茄抗性相关基因表达水平的影响,分析其对樱桃番茄果实抗病性的影响。结果表明,试验菌株中,卡利比克毕赤酵母对樱桃番茄采后黑斑病的控制效果最好,该处理组果实发病率仅为16.25%,显著低于对照组（68.76%）,并且该拮抗酵母还可显著降低樱桃番茄采后自然腐烂,缓减果实品质劣变。卡利比克毕赤酵母通过抑制链格孢孢子萌发、菌丝伸长以及寄生于菌丝上直接抑制病原菌生长,还在樱桃番茄伤口处和表面与链格孢竞争营养和空间而间接抑制病原菌生长。卡利比克毕赤酵母还能诱导樱桃番茄抗氧化基因（SOD,CAT和APX）以及病程相关基因（PR基因）（GLU和CHI）的表达。卡利比克毕赤酵母可以显著控制樱桃番茄采后黑斑病和自然腐烂,对果实品质无显著不良影响。该拮抗酵母可以通过抑制病原菌生长...     

ε-聚赖氨酸对樱桃采后病原菌橘青霉和链格孢菌的抑菌作用研究

目的 探究ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)对樱桃果实采后病原菌橘青霉(Penicillium citrinum)和链格孢菌(Alternaria alternata)的抑菌作用和抑菌机制.方法 本研究测定100、200、400、800 mg/Lε-PL处理对2种病原菌菌丝生长、孢子萌发、细胞膜透性的影...     

采后β-氨基丁酸处理对梨果实黑斑病的抑制

本文研究了采后β-氨基丁酸(BABA)处理对苹果梨损伤接种互隔交链孢(Alternaria alternata)果实病斑扩展以及苯丙烷代谢的影响。结果表明,50μg/m L的BABA可有效抑制损伤接种果实病斑直径的扩展;用BABA浸泡果实10min,以及处理和损伤接种间隔12h的处理效果最佳。果实经BABA处理后,体内的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性明显提高,总酚和类黄酮含量也显著增加。由此表明,BABA可通过诱导果实体内的苯丙烷代谢来增强对黑斑病的抗性。     

采后草酸处理对杏果实黑斑病的控制及苯丙烷代谢的影响

为探究草酸对杏果实采后黑斑病的控制效果,该试验以“赛买提”杏为试材,采用2、4、6 mmol/L草酸对杏果实进行减压渗透处理,晾干后,置于温度和湿度为（1±1.0）℃、90%~95%的条件下,贮藏48 h后,损伤接种交孢链格孢（Alternaria alternata,A. alternata）并在相同条件下贮藏。定期测定苯丙烷代谢相关指标,孢子萌发率、菌落直径。损伤接种试验结果表明,在第49天时,与对照组相比,4 mmol/L草酸处理组接种发病率与病斑直径分别低了16.94%、19.44%。4 mmol/L草酸处理组的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、4-香豆酸辅酶A连接酶（4CL）、肉桂酸-4-羟化酶（C4H）活性是对照组的1.06、1.04、1.07倍,有效促进了总酚、类黄酮、木质素含量的积累;体外试验结果表明,4 mmol/L草酸对A. alternata孢子萌发和菌丝生长有明显抑制作用。结果表明草酸处理可通过诱导苯丙烷代谢途径来增强杏果实对黑斑病的抗性。     

香芹酚处理对枸杞鲜果采后黑霉病的控制

为探究香芹酚处理对宁夏枸杞鲜果采后黑霉病的控制,在离体条件下研究了香芹酚对宁夏枸杞鲜果采后黑霉病菌(Alternaria alternata)生长、菌落形态及其超微结构的影响,并在活体条件下研究了其对枸杞黑霉病的控制效果以及对果实过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。离体试验结果表明:香芹酚处理能显著抑制A. alternata的孢子萌发和菌丝生长,其抑制效果存在浓度依赖效应;与对照相比,浓度为8 μL/L香芹酚对菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别达到80.81%和57.17%;扫描电镜观察发现香芹酚处理的A. alternata菌丝量少,表面粗糙,粗细不均匀,部分出现塌陷,孢子细胞受到不同程度的破坏。进一步体内试验结果表明:香芹酚处理枸杞果实能抑制损伤接种黑霉病的发病率和病斑扩展速度,并且处理还能提高果实的POD和PAL活性。由此可见,香芹酚可以通过直接治愈和间接诱导抗性来控制枸杞鲜果采后黑霉病,在采后病害控制中具有潜在的应用前景。     

24-表油菜素内酯调控苯丙烷代谢增强杏果实抗病性的研究

为了探究24-表油菜素内酯(24-epibrassinolide,24-EBR)对杏果实抗病性及苯丙烷代谢的影响。以新疆"赛买提"杏为试材,于0.05 MPa的压力下,用0.9 mg/L的24-表油菜素内酯对绿熟期的杏果实进行减压渗透处理,以蒸馏水处理为对照,处理后的杏果实放置24 h后损伤接种链格孢菌(Alternaria alternata),置于温度为4℃,相对湿度为90%~95%条件下贮藏,定期测定苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酰-辅酶A连接酶(4-CL)的活性及木质素、总酚和类黄酮含量,并统计果实的发病率及病斑直径。结果表明:24-表油菜素内酯处理能显著提高杏果实PAL、C4H、4-CL的活性和木质素、总酚的含量,在贮藏后期增加类黄酮含量,降低杏果实损伤接种的病害发生率及病斑直径。说明24-表油菜素内酯有可能通过诱导杏果实苯丙烷代谢增强来提高果实的抗病性。     

沙枣胶/枯茗醛复合涂膜对番茄采后红粉病的抑制作用及机制

红粉病是番茄果实主要的病害之一,采前采后均可发生,给番茄生产和贮运造成了较大损失。本实验研究枯茗醛对番茄红粉病病原真菌粉红单端孢（Trichothecium roseum Pers. Link）的体外抑制活性,并制备沙枣胶与枯茗醛复合涂膜‘千禧’樱桃番茄,果实经损伤接种后探究该涂膜对番茄红粉病的抑制作用及其对番茄果实抗性的影响。结果显示,枯茗醛在离体条件下能有效抑制T. roseum孢子萌发和菌丝生长,在0.1 μL/mL枯茗醛作用下,对菌落生长的抑制率达80%以上。在体内条件下,沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能明显抑制果实上T. roseum菌体生长,延缓病斑扩展并降低番茄果实接种发病率,在贮藏第9天,质量浓度30 mg/mL沙枣胶与体积分数0.2%枯茗醛复合涂膜组病斑直径和发病率分别为对照组的36.7%和69.2%。复合涂膜可显著提高番茄果实接种前期H2O2含量,并显著提高果实贮藏期间过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和4-香豆酸辅酶A连接酶的活力,促进果实中总酚和类黄酮的积累。沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能够有效抑制番茄采后红粉病的发生与发展,其作用机制不仅与枯茗醛抑制病原菌生长有关,还与诱导番茄果实增强抗性有关。     

Trichothecium roseum蛋白激发子诱导杏果抗黑斑病的作用机理

研究非亲和菌株粉红单端孢（Trichothecium roseum）菌体蛋白激发子对杏果实抗黑斑病的诱导效果及其作用机理。以‘兰州大接杏’为试材,通过处理后不同时间损伤接种杏果黑斑病菌（Alternaria alternata）,研究T. roseum蛋白激发子对杏果实黑斑病抗病性的诱导及其时效性,同时进一步研究最佳处理质量浓度对杏果实组织活性氧及抗性相关酶的影响。结果表明,T. roseum蛋白激发子处理可显著抑制损伤接种杏果病斑的扩展（P＜0.05）,其中14.4 μg/mL蛋白激发子的控制效果最好,且诱导处理72 h时杏果产生最大抗性。T. roseum蛋白激发子处理后杏果组织O2－·的生成速率和H2O2含量分别在48 h和72 h出现明显的峰值,同时处理的果实组织超氧化物歧化酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性均有所增强。T. roseum菌体蛋白激发子处理能显著增强杏果组织的抗性,其可能是通过激发活性氧爆发和提高杏果实抗病性相关酶的活性来实现的。可见T. roseum蛋白激发子可以作为一种有潜力的诱抗剂应用于采后病害的控制。     

链格孢侵染对枸杞鲜果挥发性物质释放的影响

目的 探究链格孢(Alternaria alternata)侵染对枸杞果实挥发性化合物释放的影响。方法 以宁杞1号枸杞果实为研究对象,通过损伤接种链格孢菌处理,分析测定接种后果实发病率和病斑面积,采用顶空-气相色谱-离子迁移谱法探究接种对果实挥发性成分释放的影响。结果 接种果实发病率和病斑面积均随贮藏时间延长显著增加,5-甲基-2-呋喃甲醇可作为区别损伤和非损伤处理的候选物质,损伤接种链格孢菌处理显著促进了第5 d果实中2,3-二甲基吡嗪、2-正戊基呋喃和二异丁基酮等物质和第1 d后果实中苄醇、2-丁酮、异戊酸乙酯、3-甲硫基丙醛和庚醛等物质的释放,这些物质可能与枸杞黑霉病的发生和严重度有关,可作为鉴定链格孢侵染枸杞果实的候选靶标物质,通过指纹图谱和主成分分析将不同处理枸杞样品的挥发性成分进行有效区分。结论 链格孢侵染可促进枸杞果实香气成分释放,为枸杞黑霉病快速诊断与评估奠定基础。     

Biocontrol of Alternaria alternata on cherry tomato fruit by use of marine yeast Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman

The basidiomycetous yeast Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman isolated from the south of East China Sea was evaluated for its activity in reducing postharvest decay of cherry tomatoes caused by Alternaria alternata in vitro and in vivo tests. The results showed that washed cell suspension of R. paludigenum provided better control of A. alternata than any other treatment, while the autoclaved cell culture failed to provide protection against the pathogen. The concentration of antagonist had significant effect on biocontrol effectiveness in vivo: when the concentration of the washed yeast cell suspension was used at 1 x 10(9)cells/ml, the percentage rate of black rot of cherry tomato fruit was only 37%, which was remarkably lower than that treated with water (the control) after 5days of incubation at 25 degrees C. Furthermore, a great biocontrol efficacy of R. paludigenum was observed when it was applied prior to inoculation with A. alternata: the longer the incubation time of R. paludigenum, the lower disease incidence would be. However, there was little efficacy when R. paludigenum was applied after A. alternata inoculation. In addition, on the wounds of cherry tomato, it was observed that R. paludigenum grew rapidly increasing 50-fold during the first 12h at 25 degrees C. To the best of our knowledge, this is a first report concerning that the marine yeast R. paludigenum could be used as a biocontrol agent of postharvest fungal disease.     

臭氧对杏果实黑斑病的抑制及贮藏保鲜作用

为了研究臭氧对杏果实采后黑斑病的抑制效果,以新疆‘赛买提’杏为试材,损伤并接种链格孢菌（Alternaria alternata）,接种后的杏果实用200 mg/m3臭氧气体进行熏蒸处理,每次熏蒸30 min,每7 d处理一次,处理后的接种链格孢菌杏果实置于1～2 ℃、90%～95%相对湿度条件下贮藏49 d,定期统计其病斑直径和接种发病率,并测定苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia-lyase,PAL）、肉桂酸-4-羟化酶（cinnamic acid-4-hydroxylase,C4H）、4-香豆酸辅酶A连接酶（4-coumaric acid CoA ligase,4CL）、β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）和几丁质酶（chitinase,CHT）活力及总酚和类黄酮含量。结果表明：与对照相比,200 mg/m3臭氧可有效提高杏果实PAL、C4H、4CL、GLU和CHT活力,增加杏果实总酚和类黄酮含量,显著抑制杏果实病斑直径和接种发病率的增加（P＜0.05）,增强杏果实对黑斑病的抗病性。说明臭氧处理增强杏果实的抗病性与调控苯丙烷代谢密切相关。     

采后亚硒酸钠处理对杏果黑斑病的控制及贮藏品质的影响

通过离体和体内实验研究亚硒酸钠对杏果黑斑病菌互隔交链孢（Alternaria alternata）的抑制作用及黑斑病的控制效果和贮藏品质的影响。结果表明,亚硒酸钠处理能显著抑制A. alternata菌落的生长和孢子萌发,且存在质量浓度效应,40 mg/L的亚硒酸钠能显著抑制A. alternata菌落的生长,其菌落直径较对照降低了30.8%,同时亚硒酸钠还能使A. alternata菌丝发生凹陷、扭曲等形态结构的改变;体内实验表明,采后亚硒酸钠处理能有效抑制损伤接种A. alternata的杏果黑斑病的扩展,其中20 mg/L亚硒酸钠的控制效果最佳,其病斑直径较对照减小了11%;采后亚硒酸钠处理还能够明显减少杏果乙烯的释放和呼吸强度的升高,延缓质量损失率和硬度的降低。可见硒在果蔬采后防腐保鲜中具有潜在的应用前景。     

Effects of oligochitosan on postharvest Alternaria rot, storage quality, and defense responses in Chinese jujube (Zizyphus jujuba Mill. cv. Dongzao) fruit

Effects of oligochitosan (OCH) on postharvest rot caused by Alternaria alternata in Chinese jujube (Zizyphus jujuba Mill. cv. Dongzao) fruit were investigated. An in vitro test indicated that mycelial growth of A. alternata was strongly suppressed by OCH at 0.5, 1, 2, 5, 10, 15, or 20 g/liter. The half-inhibition concentration of OCH against this fungus was 0.76 and 1.69 g/liter on days 4 and 6 of incubation, respectively. Lesion area and disease incidence in the jujube fruit inoculated with A. alternata were remarkably reduced by the OCH treatments at concentrations higher than 1 g/liter, but 5 g/liter OCH was considered the optimal treatment for inhibiting disease development. OCH also significantly reduced postharvest natural decay, promoted fruit firmness, delayed decline in soluble solids and loss of ascorbic acid, and increased total phenolic compounds during storage at 0°C and 85 to 95% relative humidity. Biochemical evaluations revealed that the activities of the main defense-related enzymes in the jujube fruit, including phenylalanine ammonia-lyase, peroxidase, chitinase, and β-1,3-glucanase, were significantly enhanced (P < 0.05) by OCH treatment. OCH increased superoxide dismutase activity but decreased catalase activity and, consequently, elevated hydrogen peroxide levels in the fruit. These results suggest that OCH might trigger several defense mechanisms in the jujube fruit for disease control in addition to its direct antifungal activity. OCH could be a viable alternative to conventional control of postharvest diseases of horticultural products.     

吡啶-2,6-二羧酸处理对梨果采后黑斑病控制作用及其抑菌机理

由互隔交链孢（Alternaria alternata）引起的黑斑病是梨果主要采后病害之一,会导致严重的经济损失。本实验以梨果黑斑病菌A. alternata为研究对象,通过体内外实验研究了枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）代谢产物吡啶-2,6-二羧酸（pyridine-2,6-dipicolinic acid,DPA）对A. alternata生长的抑制和对梨果黑斑病的控制作用,并进一步探讨了其抑菌作用的机理。结果表明：DPA能显著抑制A. alternata的菌落生长、孢子萌发以及芽管伸长,其中2.0 mmol/L DPA处理后培养9 d时A. alternata菌落直径仅为对照组的51.76%,4.0 mmol/L处理可完全抑制A. alternata的生长。DPA处理对梨果黑斑病的扩展有明显的控制作用,贮存至第11天时,20.0 mmol/L DPA处理组早酥梨病斑直径仅为对照组的55.17%。进一步研究表明,DPA处理提高了A. alternata细胞膜的通透性,菌丝电导率、蛋白质和核酸渗漏量显著增加,同时DPA处理降低了细胞膜组分麦角甾醇质量浓度,提高了A. alternata丙二醛浓度。结论：DPA可通过延缓A. alternata生长、提高膜通透性、破坏细胞膜的完整性和促使膜脂氧化而发挥抑菌作用。     

一氧化氮熏蒸处理对甜瓜采后细胞壁代谢及黑斑病控制的影响

为探究NO熏蒸处理对甜瓜果实采后细胞壁代谢和抗病性的影响,用60 μL/L的NO熏蒸‘西州蜜25号’甜瓜3 h,常温下放置12 h后,接种交孢链格孢菌（Alternaria alternata）,置于常温下贮藏,定期测定甜瓜果实接种发病率、硬度、细胞膜渗透率和原果胶、可溶性果胶、纤维素质量分数及多聚半乳糖醛酸酶（polygalacturonase,PG）、果胶甲酯酶（pectin methyl esterase,PME）和纤维素酶（cellulase,Cx）的活力,并通过扫描电子显微镜观察果实瓜皮结构变化。结果表明：采后60 μL/L NO熏蒸处理能够有效降低甜瓜果实采后病斑直径、病斑深度及发病率,维持较高的果实硬度和原果胶、纤维素质量分数,减缓细胞膜渗透率、可溶性果胶质量分数的上升,降低PG、PME、Cx活力;扫描电子显微镜结果显示NO处理能够抑制瓜皮表面气孔结构及裂纹部位菌丝的生长,较好地维持气孔结构的完整性。说明适量外源NO熏蒸处理可减缓细胞壁代谢进程,增强采后果实抗病防御能力。     

壳聚糖复合硅酸钠对冬枣采后苯丙烷代谢及病程相关蛋白的影响

研究了壳聚糖复合硅酸钠浸泡处理对A. alternata挑战接种果实的苯丙烷代谢与防御相关酶的影响。以冬枣为材料,分别用1%的壳聚糖(chitosan,CTS)复合不同浓度(10、40、160 mmol/L)的Na₂SiO₃水溶液浸泡冬枣5 min,以蒸馏水作为对照。室温下贮藏并定期测定其病斑直径、类黄酮、多酚、木质素及相关酶的活性。实验结果显示:在贮藏20 d后,1% CTS+40 mmol/L Na₂SiO₃处理病斑直径为1% CTS处理组病斑直径的57.33%。1% CTS+40 mmol/L Na₂SiO₃处理激活了苯丙氨酸解氨酶(Phenylalane Ammonlalyase,PAL)、肉桂酸4-羧化酶(Cinnamate 4 Hydroxylase,C4H)、4-香豆酰-辅酶A连接酶(4coumarate Coenzyme A Ligase,4CL)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)的活性,使得总酚、类黄酮、木质素含量增加。同时,病程相关蛋白几丁质酶(Chitinase,CHT)、β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-giucanase,GLU)活性增强。实验结果表明,CTS+Na₂SiO₃处理可以通过诱导果实苯丙烷代谢和病程相关蛋白活性增强采后枣果实抗病性。     

臭氧处理对交链孢菌生长及其毒素积累的抑制作用

交链孢菌（Alternaria spp.）易侵染农作物,引起农产品病害,而且能够代谢产生交链孢毒素,包括细交链孢酮酸（tenuazonic acid,TeA）、交链孢酚（alternariol,AOH）、交链孢酚单甲醚（alternariol monomethyl ether,AME）等,严重影响人体健康。因此,亟需高效、安全的方法用以防控交链孢菌及其毒素积累。本实验研究了臭氧处理对体外互隔交链孢（A. alternata）生长及其产毒能力的影响。结果表明,臭氧处理组的菌落直径显著低于对照组（P＜0.05）,且臭氧处理可显著抑制互隔交链孢产生TeA、AOH、AME这3 种交链孢毒素;利用扫描电子显微镜观察臭氧处理后互隔交链孢的微观形态,发现孢子和菌丝发生了凹陷、褶皱、断裂等异常现象;臭氧处理后的交链孢菌对番茄果实的致病力明显减弱,同时交链孢菌的产毒能力明显降低,20 mg/L臭氧处理条件下TeA、AOH、AME含量比对照组分别减少了36.1%、89.9%、93.2%。此外,臭氧对TeA、AOH、AME具有降解作用,降解率随着臭氧质量浓度的增加和处理时间的延长而显著提高,TeA经过20 mg/L臭氧处理30 min即可被完全降解,AOH及AME经20 mg/L臭氧处理120 min后降解率可达90%以上。综上,臭氧处理可以作为农产品及其制品中互隔交链孢及其毒素污染的防治手段。