费氏丙酸杆菌生物学特性及与5株益生菌拮抗性试验研究

为了评价费氏丙酸杆菌的益生特性,费氏丙酸杆菌活化后,划线和镜检观察其形态特征,然后利用体外共培养法测定费氏丙酸杆菌对3种致病菌的抑制效果,同时利用平板计数法研究费氏丙酸杆菌的耐酸性、耐胆盐和耐高温等生物学特性,以及5株益生菌拮抗性试验。结果表明,费氏丙酸杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌没有显著的抑制作用,而对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显（P＜0.01）;其在pH值为2.0条件下维持3 h,活菌数降低一个数量级;在胆盐含量为0.30%条件下维持6 h,存活率为18.67%;在60 ℃下处理20 min,存活率为12%,因此费氏丙酸杆菌具有一定的耐酸、耐高温能力以及很强的耐胆盐活性。除枯草芽孢杆菌与丁酸梭菌有拮抗作用外,其余菌株间均没有拮抗作用。     

唾液乳杆菌的分离鉴定及生物特性研究

从健康散养的溜达鸡小肠黏膜中分离出一株乳杆菌,通过菌落形态观察、革兰氏染色、生理生化鉴定以及16S rRNA基因序列测定和同源性分析,确定所分离的菌株为唾液乳杆菌,并命名Lactobacillus salivarius C-1-3。对该菌进行抑菌、纤维素降解、耐酸、耐胆盐、耐高温实验。结果表明：其对常见的致病菌大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌都具有良好的抑制作用,且该菌株能够降解纤维素。经过多次驯化后,该菌株表现出较好的抑菌作用及耐酸、耐高温特性。     

葡萄糖、乳酸钠对丙酸杆菌生长的影响

对费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii CS1420)发酵培养基的碳源进行优化,旨在提高菌体密度。结果表明,以乳酸钠作为单一碳源时,当乳酸钠添加量为32 g/L时,菌体生长量最大,OD600 nm为1.95;以葡萄糖作为单一碳源时,当葡萄糖添加量为8 g/L时,菌体生长量最大,OD600 nm为1.242;以乳酸钠和葡萄糖作为复合碳源时,当碳源添加量为18.8g/L乳酸钠+1.2g/L葡萄糖时,菌体生长量最大,OD600nm为2.06,这说明,复合碳源可以有效的提高菌体密度。     

产共轭亚油酸丙酸菌的筛选及转化条件初探

通过富集培养、梯度密度稀释和液体培养发酵,采用紫外分光光度法测定共轭亚油酸(CLA),从市售奶酪中筛选获得1株转化生成CLA能力相对较高的菌株P9:考察了菌体接种量、亚油酸(LA)的添加量、反应温度、反应体系pH值以及乳化剂种类等因素对菌株P9 CLA生成量的影响.通过对菌株P9的菌落和形态特征、产丙酸特性及生理生化特性分析,初步鉴定该菌株为费氏丙酸杆菌(Propionibacterium frudenreichii).研究结果显示,菌株P9在菌体接种量10%(v/v),LA添加量0.75mg/mL,pH值为6.8,反应温度30℃,Tween-80作为乳化剂的条件下,CLA生成量为63.371μg/mL,亚油酸转化率为8.45%,表现出较好的产共轭亚油酸能力.     

直投式费氏丙酸杆菌发酵剂的制备及其保护剂的优化

以费氏丙酸杆菌为研究对象,采用真空冷冻干燥法制备直投式酸奶发酵剂。通过单因素实验,以酸度和活菌数为测定指标,对脱脂奶粉、蔗糖、谷氨酸钠、明胶、甘油和山梨醇6种保护剂进行筛选。结果表明,脱脂奶粉、蔗糖、谷氨酸钠3种保护剂效果较好,确定为复合保护剂的基本成分。进而,以酸度为指标采用响应面法对复合保护剂进行优化,确定了最优的复合保护剂配方为:脱脂奶粉11.82%,蔗糖7.03%,谷氨酸钠2.98%。在最优条件下,直投式费氏丙酸杆菌发酵剂发酵酸奶的酸度达到69.2712+0.2425,与理论预测值71.0683接近。     

费氏丙酸杆菌发酵生产V_B_(12)

VB12广泛应用于医药业和食品工业,费氏丙酸杆菌是其主要的工业生产菌种。费氏丙酸杆菌发酵过程中会产生大量丙酸和乙酸,有机酸的积累会抑制菌体生长,延长发酵周期。通过改进发酵工艺来解除有机酸抑制,提高发酵产量是费氏丙酸杆菌发酵工艺的主要研究内容。VB12是费氏丙酸杆菌胞内产物,提取工艺对生产总收率具有重要作用。耦合发酵工艺改造和膜分离技术目前是费氏丙酸杆菌发酵VB12的研究热点。     

费氏丙酸杆菌费氏亚种在不同基质中转化生成共轭亚油酸的研究

研究了在MRS、乳酸钠和脱脂乳三种培养基质下温度、时间、底物浓等因素对P.freudenreichiissp.freudenreichii生成CLA的影响,结果表明P.freudenreichiissp.freudenreichii在MRS、乳酸钠和脱脂乳中均具有生成CLA的能力,三种培养基质中一定浓度的葵花籽油对P.freudenreichiissp.freudenreichii的生长都有明显的抑制作用,在MRS培养基中葵花籽油浓度为12mg/ml,菌液量10%(V/V),30℃培养24hCLA生成量最大为24.813μg/ml。     

双歧杆菌的分离与鉴定

双歧乳酸杆菌是一种对机体有益的菌。通过大量的实验,并结合国内的现有情况,就双歧乳酸杆菌的分离与鉴定提出了厌气分离的方法,为国内双歧乳酸杆菌的分离培养和鉴定提供一项可行的办法。     

pH对费氏丙酸杆菌细菌素抑菌性的影响

以实验室保存的一株费氏丙酸杆菌CS1420(Propionibacterium freudenreichii CS1420)为试验菌株。首先考察了不同初始pH下对其发酵产细菌素的影响。结果表明:以大肠杆菌ATCC25922为指示菌,当培养基初始pH为6.0时,细菌素抑菌效果最好;以Saccharomyces cerevisiae 2-10515为指示菌,当培养基初始pH为5.5时,细菌素抑菌效果最好。然后用丙酸调节细菌素粗提物的pH进行抑菌试验,结果表明,pH对粗提得到的细菌素抑菌性影响很大,当用丙酸将细菌素溶液的pH调至5.5时,细菌素的抑菌活性有显著提高。     

发酵条件对费氏丙酸杆菌代谢物抑菌活性的影响

费氏丙酸杆菌代谢物是一种新型的天然防腐剂。试验研究氮源、碳源表面活性剂和温度对费氏丙酸杆菌代谢物抑菌活性的影响。结果表明,葡萄糖是其最适碳源,抑菌活性最高,为19AU/mL,玉米浆为最适氮源,抑菌活性为17.4AU/mL。0.1%的Tween80能提高代谢物的抑菌活性,最高为23.6AU/ mL。产生丙酸杆菌代谢物的最适培养温度为30℃。     

一株费氏丙酸杆菌生长特性及其代谢物抑菌作用分析

对一株费氏丙酸杆菌生长特性及其代谢物抑菌作用进行研究。结果表明：该菌株生长周期约为10 d,第1～3天为其对数生长期,第4～8天为菌体生长的稳定期,第9～10天为衰亡期。在生长过程中,菌体利用糖的速率很快,还原糖在发酵1 d内几乎被消耗殆尽,发酵液pH值在发酵的第1天下降到4.6左右,此后一直到第10天,pH值基本稳定在4.6左右。在同等条件下,该丙酸杆菌代谢物对大肠杆菌的抑制作用优于对金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑制作用。对代谢产物的分析结果表明,发酵产物中抑菌物质除了丙酸之外,还存在其他物质,初步判定为细菌素。     

Incorporation of Propionibacterium shermanii subsp. freudenreichii in probiotic dairy drink production: physicochemical,rheological, microbiological and sensorial properties

The aim of this study was to investigate the use of Propionibacterium shermanii subsp. freudenreichii as a combined culture with Lactobacillus acidophilus (AP), Bifidobacterium animalis subsp. lactis (BP), Lactobacillus casei (CP) and Lactobacillus rhamnosus (RP) in probiotic dairy drink production. Although Propionibacterium spp. is used for many purposes including biopreservative and adjunct culture, in this study, probiotic dairy drinks containing P. freudenreichii were evaluated in terms of their physicochemical, rheological, microbiological and sensory properties. The results of the study showed that P. freudenreichii can also be suitable for the production of probiotic drinks and that there are no adverse effects on the product characteristics.     

产油脂微藻的分离、鉴定及筛选

微藻油脂是生产生物柴油的重要原料,同时也是生产不饱和脂肪酸的原料来源之一。本文以广州市华南理工大学校内东湖为采样点,筛选鉴定湖中存在的微藻并研究其生长和油脂积累特性,旨在筛选出水体中可能存在的富油微藻以便后续研究分析。研究共筛选出6株绿藻,18Sr DNA鉴定显示6株绿藻中DH1、DH2、DH6均属于小球藻属,DH3、DH4、DH5均属于栅藻属,后分析构建了6株微藻进化发育树。通过藻细胞胞内油脂含量测定,表明DH1、DH2与DH6均能较好地积累油脂,尤其是DH2与DH6两株微藻。培养25 d发现其最大生物量(细胞数)分别达到2.14×10~7个/m L和2.74×10~7个/m L,油脂产量分别达到103.89 mg/L和131.69mg/L,藻细胞油脂百分含量均超过30%,表明该两株微藻是潜在的较为理想的产油微藻,可作为生物柴油制备的备用藻种资源。     

鲜奶中产γ-氨基丁酸的乳酸菌株的筛选与鉴定

从新鲜牛奶中筛选高产γ- 氨基丁酸(GABA)的乳酸菌株fmbl12-4,通过形态特征、生理生化特征和16S rDNA 序列分析,鉴定菌株为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp. lactis)。当fmbl12-4 的湿菌体与100mmol/L L- 谷氨酸钠溶液(L-MSG)按1:20(m/V)混合,于30℃、100r/min 振荡反应24h,转化液中GABA 浓度达到82.36mmol/L。在质量浓度为2.5g/100mL L-MSG 的MRS 培养基中培养6d,GABA 质量浓度达到4.68g/L。     

市售草莓腐败菌的分离鉴定及拮抗酵母的筛选

为了分离纯化并鉴定市售草莓主要的腐败污染菌,分析筛选拮抗能力良好且具有较大生物防治潜能的酵母。通过菌落形态和显微形态初筛出主要腐败菌,并采用28S rDNA序列分析鉴定到属。针对典型腐败菌做对峙实验,筛选出有明显拮抗作用的酵母,26S rDNA序列分析鉴定到属种。酵母和腐败菌同时反接在有伤冬枣上,验证酵母拮抗能力,分析酵母作为生防菌的应用效果。本研究显示草莓携带的致腐败的微生物主要是空气中常见的5种霉菌为枝孢霉属(Cladosporium spp.)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、链格孢属(Alternaria sp.)、毛霉(Mucor sp.)和白地霉(Geotrichum candidum)。从191株酵母中筛选出对腐败菌有拮抗作用的菌株23株,属于17种酵母,在体内体外实验中均表现出良好拮抗效果的酵母为美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)S4-1。     

生鲜猪肉中沙门氏菌的分离、鉴定及耐药性检测

调查本地区生鲜猪肉中沙门氏菌的污染情况及耐药性情况,为进一步对肉及肉制品中耐药性沙门氏菌的风险评估奠定基础。采集超市和集贸市场的生鲜猪肉,采用实时荧光定量PCR对生鲜猪肉中沙门氏菌污染进行初筛,然后根据沙门氏菌检验国家标准进行分离鉴定,并对分离到的沙门氏菌进行耐药性检测。结果从83份肉样中分离到21株沙门氏菌,沙门氏菌检出率为25.3%。21株沙门氏菌中有7株对11种抗生素中的至少一种产生耐药性,耐药率33.3%。结果表明本地区生鲜猪肉微生物污染较为严重,沙门氏菌检出率较高且四环素耐药严重;另外在菌落总数和沙门氏菌检出率方面冷却肉的质量好于热鲜肉,超市和集贸出售的肉的质量无显著差异。     

伊犁地区乳品中乳酸菌的分离及鉴定

从伊犁地区牧民家庭采集的乳品中分离得到10株乳酸菌,经过对其生物学特性的鉴定,有干酪乳杆菌假植物亚种(L.casei subsp.Plantaman)4株、鸡肠球菌(E.gallins.rum)1株、屎肠球菌(E.faecium)1株、乳酸乳球菌乳酸亚种(L.lactis subsp.cremoris)2株、肠膜明串珠菌肠膜亚种(Lc.Mesenteroides subsp.Mesenteroides)2株。通过研究发现,该鉴定菌株的生物学特性基本符合各属和种的鉴定标准,均属于中温性乳酸菌。     

Linoleic acid Isomerase Activity in Enzyme Extracts from Lactobacillus Acidophilus and Propionibacterium Freudenreichii ssp. Shermanii

Enzyme extracts from Lactobacillus acidophilus (CCRC14079) and Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii (CCRC11076) were reacted with linoleic acid at 50 °C for 10 min at pH 5, 6, 7, and 8, and the levels of conjugated linoleic acid (CLA) formation were determined by high performance liquid chromatography. CLA formations were observed in all the reactions catalyzed by the retentates using ultrafiltration membranes with 100 kDa nominal molecular weight cutoff, indicating the presence of the activity of linoleic acid isomerase with nominal molecular weight higher than 100 kDa in the retentates from two cultures. More CLA was formed at pH 5 of L. acidophilus treatment and t10c12, c11t13, and c9t11 CLA were 3 major CLA isomers produced. Results demonstrate a potential for CLA production through linoleic acid isomerase.