珍珠肽螯合钙的制备与性质表征

为提高珍珠的利用率,生产易被人体高效吸收利用的补钙剂。以珍珠粉为原料制备珍珠肽,并对其进行钙螯合处理。以螯合物得率和螯合物中钙含量为考察指标,确定珍珠肽螯合钙的最佳制备方法。采用紫外-可见吸收光谱分析（UV-vis）、傅里叶红外光谱分析（FTIR）、圆二色谱分析（CD）、X射线衍射分析（XRD）、差示扫描量热分析（DSC）和扫描电镜分析（SEM）等比较螯合前后的变化。结果表明:珍珠粉经过丙酸酸解、重复离心除杂后得到珍珠蛋白。使用地衣芽孢杆菌蛋白酶（Bacillus licheniformis proteinase, BLP）对珍珠蛋白进行酶解得到珍珠肽,最终珍珠肽螯合钙得率为27.24%±1.29%,珍珠肽螯合钙中钙含量为48.75%±1.20%。对此条件下制备的珍珠肽和珍珠肽钙螯合物进行结构分析,发现珍珠肽的氨基和羧基都参加了螯合反应,并且螯合物的二级结构由原来的无序结构向有序、紧密的结构转变,螯合物的结晶度大幅度提高并生成结构更加稳定的新物质,而且有明显的分子聚集现象。     

玉米低聚肽螯合钙的结构表征及其体外稳定性

以玉米低聚肽和氯化钙为原料制备玉米低聚肽螯合钙,通过分析氨基酸组成、电镜扫描、紫外扫描来表征玉米低聚肽螯合钙的结构特征,并分析其体外稳定性。结果表明：玉米低聚肽经过螯合后,结构和形态都发生了改变;有吸收峰且吸收强度有很大的变化;玉米低聚肽螯合钙在20～80℃、非强酸强碱、胃蛋白酶消化作用下,均具有较好的稳定性。     

花生蛋白钙螯合肽的制备、富集及表征

本文对花生蛋白钙螯合肽的制备工艺进行了研究,并对所得水解产物及其钙螯合物进行了表征。结果表明,在6种市售的蛋白酶中,Alcalase 2.4L对花生蛋白的水解能力最强,其与ProteAXH进行分步复合水解可进一步提高水解效果,在最适条件下所得花生肽的钙结合能力达到了84.09 mg/g、蛋白质回收率高达87.89%;采用酸法脱酰胺可显著提高花生肽的钙结合能力,在最适条件下可达到132.04 mg/g;利用大孔树脂DM301对脱酰胺花生肽进行富集可进一步提高其钙结合能力,在最优条件下可高达164.34 mg/g。荧光光谱及圆二色谱分析证实花生肽与钙离子发生了螯合作用,红外光谱分析则表明花生肽主要通过其羧基与钙离子进行结合。因此,花生肽是一种潜在的钙螯合剂,这对于花生蛋白的高值化综合利用具有重要的参考价值。     

鳗鱼钙螯合肽制备工艺研究

本文以鳗鱼尾为原料,采用现代酶解技术高效制备鳗鱼钙螯合肽。系统研究了单酶的种类、多酶复配、酶解时间和酶添加量对蛋白回收率、肽得率以及产物钙螯合能力的影响规律,并获得最佳酶解工艺:添加鳗鱼尾蛋白3.5‰的胰酶,调整pH至8.0在55℃下酶解3 h,然后调整体系pH至4.0,加入鳗鱼尾蛋白3.5‰的酸性蛋白酶在55℃下继续酶解2 h得到鳗鱼肽,蛋白回收率和肽得率分别为66.61%和52.46%。并在此基础上,研究了螯合温度、pH值以及质量比对鳗鱼肽螯合能力的影响,优化获得螯合条件为:鳗鱼肽在30℃,pH值为9.0条件下按肽钙质量比1:2,与钙离子螯合30 min得到鳗鱼钙螯合肽,螯合物的钙离子含量为56.78 mg/g。通过氨基酸成分分析,发现鳗鱼肽与钙的螯合反应中,谷氨酸和天冬氨酸等酸性氨基酸的贡献最大。     

汉麻肽钙螯合物的制备及其结构表征和稳定性

汉麻籽仁经脱脂、提取汉麻蛋白、酶法水解制备汉麻肽（HPIH）,再与钙螯合制备汉麻肽钙螯合物（HPIH-Ca）。以钙螯合率为指标,采用单因素实验和正交实验优化HPIH-Ca制备工艺条件;运用红外光谱和圆二色谱分析HPIH-Ca的结构,利用扫描电镜表征HPIH-Ca微观结构,通过热处理、pH和体外模拟消化评价HPIH-Ca的稳定性。结果表明：胰酶是最佳水解酶;HPIH-Ca的最佳制备工艺条件为肽钙比2∶ 1（10 mg/mL HPIH溶液与0.05 mol/L无水氯化钙溶液体积比）、pH 8.0、反应温度60 ℃、反应时间45 min,在最佳条件下钙螯合率为47.61 mg/g;Ca2+与汉麻肽主要通过羧基氧原子和氨基氮原子相互作用; Ca2+与HPIH结合后形成了更为有序和紧凑的二级结构;HPIH与Ca2+交联形成结构有序、紧密的呈片状或大颗粒的肽钙螯合物;HPIH-Ca具有一定的耐热性,但在酸性条件下不稳定;体外模拟消化实验结果显示,HPIH-Ca能保持70%以上的持钙率,具有较高的生物利用度。     

鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备及其结构表征

为提高废弃鸡蛋壳的利用率,对鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备工艺进行研究,并对其结构进行表征,以开发一种新型氨基酸生物钙制剂。本文以鸡蛋壳和L-赖氨酸为原料,赖氨酸螯合钙螯合率为指标,优化鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的制备工艺。通过单因素试验和响应面试验,考察螯合反应时间、反应温度、溶液p H和L-赖氨酸与Ca Cl2摩尔比等因素对赖氨酸螯合钙螯合率的影响,优化确定最佳螯合工艺为:反应时间为49 min,反应温度为70℃,溶液p H为8.7,L-赖氨酸与Ca Cl2摩尔比为2:1。在此条件下,赖氨酸螯合钙螯合率为82.84%,较柠檬酸钙和谷氨酸钙螯合率分别高3.55%和1.72%。采用红外光谱、X衍射分析了鸡蛋壳赖氨酸螯合钙的结构,结果表明L-赖氨酸中的-NH2键和-COOH键均参与了螯合反应,L-赖氨酸中氨基上的N原子和羧基上的O原子均参与了反应,因此赖氨酸与钙形成了螯合物。     

氨基酸螯合钙的结构表征和功能特性研究

利用红外光谱、紫外光谱以及扫描电镜对氨基酸螯合钙进行结构鉴定,并分析其抗氧化性、抑菌性及消化特性。结果表明：通过紫外、红外光谱分析,与未螯合产物比较,螯合产物在化学结构上发生了变化;利用扫描电镜分析,可以清晰地看到较多“白色晶体”附着在螯合产物表面。以上确证了氨基酸螯合钙的形成;氨基酸螯合钙可有效地清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基,具有较好的还原能力和抗氧化性。该螯合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均有抑菌效果,且对金黄色葡萄球菌抑菌效果最明显;体外模拟胃肠道消化试验显示,氨基酸螯合钙在模拟胃环境中消化2 h后,钙溶解率达到90.38%。氨基酸螯合钙在模拟肠道消化后钙溶解率维持在42.50%,说明该螯合物的钙溶出率较高。     

高压脉冲电场技术制备大豆肽螯合钙

目的研究大豆肽螯合钙最佳工艺参数以及高压脉冲电场对螯合效果的影响。方法以鸡蛋壳粉和大豆肽粉为原料,以螯合率为衡量指标,研究了大豆肽粉和蛋壳粉的质量比、反应体系pH、螯合过程中电场强度以及电场的频率等因素对螯合反应的影响情况,并利用响应面试验设计的方法。结果回归方程为:Y=94.96-0.074X_1+0.30X_2-0.14X_3-0.45X_4+0.012X_1X_2+0.060X_1X_3+0.37X_1X_4-0.32X_2X_3+0.64X_2X_4-0.085X_3X_4-0.42X_1~2-0.93X_2~2-0.34X_3~2-0.15X_4~2,优化出大豆肽螯合钙的最佳工艺条件为:大豆肽粉和蛋壳粉质量比1:1.75、pH 8.0、电场强度15 kV/cm、电场频率1200 Hz。在此条件下,螯合率高达95.38%±0.18%。结论本研究为大豆肽螯合钙技术研究提供一种新思路。     

乳源锌螯合肽酶解制备及其螯合特性分析

为研究乳源锌螯合肽酶解制备最佳工艺条件及其螯合特性,从而为促锌吸收活性物质的研究提供基础,以牛乳酪蛋白为原料,以锌螯合率为指标,确定胰蛋白酶酶解制备锌螯合肽的最佳工艺条件,并对最优条件下酶解物的分子质量分布及氨基酸组成进行测定,同时通过傅里叶变换红外扫描和紫外扫描手段对酶解物和肽锌复合物进行结构表征对比分析。结果显示,最佳酶解条件为时间3 h,温度50℃,p H 8. 5,底物质量浓度为70 g/L,加酶量0. 6%(质量分数)。最佳条件下,酶解物的锌螯合率为87. 78%,分子肽分子质量小,人体必需氨基酸含量丰富。螯合前后光谱存在明显差异,Zn~(2+)与羧基等进行了配位结合。乳源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,实验结果为补锌剂的生产应用奠定了基础。     

猪骨渣中可溶性钙的提取及蛋白肽螯合钙的制备

[目的]首先优化出猪骨渣中可溶性钙提取的工艺,然后在此基础上将其制备成蛋白肽螯合钙。[方法]首先研究影响提取猪骨渣中可溶性钙的几个因素,包括酸种类、酸用量、液料比、提取时间和提取温度,并通过正交试验设计与分析优化最佳工艺参数;然后研究影响蛋白肽螯合钙制备的几个因素,包括配比、p H值、反应温度和反应时间。[结果]猪骨渣中可溶性钙提取的最佳工艺参数为酸种类盐酸、盐酸用量(V盐酸∶m猪骨渣,下同)2m L/g、液料比(V提取液∶m猪骨渣,下同)10m L/g和提取时间40min,在此条件下实际得率为15.01%;蛋白肽螯合钙制备的最佳工艺参数为配比(V可溶性钙提取液∶V蛋白肽酶解液,下同)1∶4,p H值8,反应温度50℃和反应时间10min,在此条件下实际螯合率为95%。[结论]采用盐酸提取猪骨渣中可溶性钙及在此基础上将其制备成蛋白肽螯合钙都是可行的。     

鲶鱼骨肉泥酶解多肽螯合钙的结构表征

为表征鲶鱼骨肉泥酶解多肽螯合钙结构特征,分别采用红外吸收(IR)光谱法、紫外吸收(UV)光谱法、扫描电镜(SEM)和X射线光电子能谱(XPS)法,解析并对比多肽及多肽螯合钙结构。结果表明,多肽螯合钙相对于多肽,紫外最大吸收峰红移,红外吸收峰在N-H伸缩振动特征区蓝移,酰胺Ⅱ带的N-H变形振动特征区消失,酰胺Ⅰ带的C=O伸缩振动特征区红移,O-H面内变形振动指纹区消失,表明钙离子与多肽的氨基、羧基发生配合;多肽螯合钙后微观结构由无规则态变为致密且有棱角的块状,表面新增Ca、Mg元素。研究结果为鲶鱼骨肉泥酶解多肽螯合钙的构效研究及应用提供了理论支撑。     

罗非鱼骨胶原钙螯合肽的酶解制备

本研究以罗非鱼骨胶原蛋白为原料酶解制备具有良好钙螯能力性的活性肽。以钙螯合活性为指标,将罗非鱼骨架经过脱肉、脱钙等前处理获得的罗非鱼骨胶原蛋白通过木瓜蛋白酶酶解制备得到罗非鱼骨胶原蛋白肽,通过单因素及正交试验对制备罗非鱼骨胶原螯合肽的酶解工艺进行优化。同时对最优条件下酶解获得的罗非鱼骨胶原钙螯合肽的分子量及氨基酸组成进行分析。结果表明,最优酶解工艺条件为:酶解时间4.5 h,pH 6.5,酶解温度62℃,酶底比0.6%。罗非鱼骨胶原钙螯合肽是一类小分子功能活性肽。同时通过对比罗非鱼骨胶原钙螯合肽及其钙-肽螯合物氨基酸组成,发现胱氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸等氨基酸对活性肽的钙螯合能力起到重要作用。     

酶解脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽

以实验室自制的脱脂蚕蛹蛋白为原料,利用酶工程技术,通过对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶等的筛选及单因素和响应面优化试验,对ACE抑制肽的制备工艺条件进行较系统的研究。结果表明：选择碱性蛋白酶作为脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的酶,制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为料液比11.88:100、温度50.22℃、pH 9.46、加酶量7.03%、酶解4h。在此条件下制备的ACE抑制肽的ACE抑制率达到41.98%。     

牛乳酪蛋白钙肽在酸奶中的应用

利用JMP 软件进行实验设计,采用SPSS 和JMP 分析软件进行统计分析,通过对酪蛋白钙肽(casein calciumpeptide,CCP)酸奶进行感官评定,研究添加CCP 对酸奶的感官品质的影响。结果表明：CCP 添加量对色泽和滋气味没有影响,对组织状态和总平均分有较大影响,添加量在0.2% 水平时,组织状态和总平均分最好;生产酸奶的辅料最佳配比为CCP 0.2%、砂糖量8%、接种量5%。     

酶解鱼鳞胶制备小分子多肽的研究

以鱼鳞为原料采用蛋白酶酶解，确定制备小分子多肽的最佳工艺条件。发现用混合蛋白酶进行阶段酶解效果最好；对两种脱苦、脱腥的方法进行了比较，发现用复配脱色剂比用活性碳优越；发现超滤分离技术和反渗透膜分离技术对水解液有纯化、浓缩作用；最后经微胶囊化包埋喷雾干燥等技术得到的粉末制品含有较多的小分子多肽，是医药和食品的良好中间体产品。     

钙结合卵黄高磷蛋白磷酸肽的制备及其肽钙螯合物的结构表征

以鸡蛋蛋黄为原料制备卵黄高磷蛋白磷酸肽（phosvitin phosphopeptide,PPP）,并与钙离子螯合制备肽钙补充剂。通过高温高压处理卵黄高磷蛋白,先用胰蛋白酶酶解,以水解度和肽钙结合率为指标,进一步优化碱性蛋白酶的酶解条件以制备PPP。PPP与钙螯合获得螯合物PPP-Ca,通过紫外光谱、红外光谱分析、圆二色谱分析、扫描电镜和Zeta电位分析表征PPP-Ca的结构特性。结果表明最佳酶解条件为加酶量5%、酶解90 min、pH 9.0、温度40℃,在此最优条件下水解度为（25.45±0.17）%,肽钙结合率为（93.41±1.10）%。结构表征发现PPP-Ca主要通过羧基、氨基和磷酸基团相互作用结合,PPP和钙离子结合后其结构变得紧密有序,且有聚集现象。     

大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究

以大米蛋白为研究对象,比较了几种酶对大米蛋白的水解作用效果,确定了一种合适的酶源——精制中性蛋白酶。同时通过单因素试验和响应面分析,确定了采用精制中性蛋白酶制备大米蛋自抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.0%、[E]/[S]2.0%、pH7.0、温度37.5℃、时间4.16 h,该条件下制备的大米蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为60.54%。     

酶解麦胚蛋白制备抗氧化肽的研究

通过单因素试验和响应面分析,确定了采用碱性蛋白酶ProleatherFG-F制备麦胚抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.00%、[E]/[S]4.90%～5.05%、pH9.5、温度53.30～54.50℃、时间3.8h,该条件下制备的麦胚抗氧化肽对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为59.55%和56.38%。