灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

破壁灵芝孢子粉破壁率的测定

对破壁灵芝孢子粉破壁率的检测方法进行优化,以降低试验误差。使用血球计数板对灵芝孢子粉和破壁灵芝孢子粉进行计数,考虑到灵芝孢子粉破壁率的分析方法中出现的孢子悬液分布不均匀问题,故对超声振荡的时间和蔗糖粉末粗细程度试验条件进行优化,并对优化前后的结果进行比较。结果表明,方法优化前,破壁灵芝孢子粉破壁率测量为98%,相对标准偏差(S_RSD)为10.25%,经试验条件优化后,其破壁率测量的结果提高到99%,相对标准偏差(S_RSD)下降至1.79%,前后差异明显,效果满意。通过分析灵芝孢子粉破壁率测量误差的主要来源,并采取针对性措施,可以有效降低灵芝孢子粉计数结果的相对标准偏差,提升破壁率测量的准确度。     

6个破壁灵芝孢子粉的理化性质

为更好地了解山东省破壁灵芝孢子粉的品质,收集6个灵芝孢子粉样品,对其理化性质进行分析。结果表明, 6个样品的灵芝破壁孢子粉含水率在2.013%～8.922%之间,粗脂肪含量在27.12%～34.05%之间;总糖含量在4.359%～5.769%之间,多糖含量在0.879%～1.182%之间,还原糖含量在0.196%～0.247%之间,段木栽培的破壁灵芝孢子粉多糖含量并不比代栽多糖含量高;破壁灵芝孢子粉的D[4, 3]在6.042～7.91μm之间, D50在5.723～6.284μm之间;经扫描电镜观察,发现代栽灵芝孢子粉粒径为(8.6～8.8)μm×5.6μm,而段木栽培的孢子粉粒径为8.8μm×6.6μm,碾压式孢子粉破壁率达100%。山东省破壁灵芝孢子粉多糖、重金属等含量符合中华供销总社灵芝孢子粉理化性质的行业标准。扫描电镜发现段木栽培比代栽孢子粉更饱满,但个别样品破壁率未达标。     

破壁提油灵芝孢子粉羧甲基化研究

以破壁提油灵芝孢子粉(SDGLS)为原料,以氢氧化钠为催化剂,氯乙酸为醚化剂,对破壁提油灵芝孢子粉的羧甲基化进行了研究。结果表明,制备羧甲基破壁提油灵芝孢子粉的较佳工艺条件为:SDGLS 1.00g,80%的乙醇20mL,氢氧化钠用量1.20g,氯乙酸用量1.18g,碱化时间2h,醚化温度45℃、醚化时间20h。此条件下,羧甲基破壁提油灵芝孢子粉的取代度(DS)达0.78,溶解率高达91%。     

响应面优化灵芝孢子粉挤出破壁工艺

采用双螺杆挤出技术对灵芝孢子粉进行破壁处理,利用响应面对影响挤出破壁工艺的主要因素:挤出温度、螺杆转速、物料含水量进行优化。结果表明:当挤出温度110℃、物料含水量27%、螺杆转速640 r/min时,灵芝孢子粉破壁率可达到96.48%。方差分析结果表明,影响挤出破壁灵芝孢子粉工艺的因素由强到弱依次为挤出温度物料含水量螺杆转速。     

破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型的构建

为构建不同产地破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型,该研究收集了我国四大灵芝主产区的破壁灵芝孢子粉,对其水分、灰分、破壁率、L*值、a*值、b*值、脂肪、三萜类、多糖和脂肪酸等15个感官理化指标进行综合分析。首先采用SPSS统计软件对所得数据进行相关性分析(CA)和主成分分析(PCA),筛选出6个评价核心指标为水分、灰分、破壁率、L*值、多糖和亚油酸。然后运用层次分析法(AHP)确定各指标权重,计算各产地破壁灵芝孢子粉综合得分并排名。结果表明,吉林长白山地区破壁灵芝孢子粉品质相对最佳,而来自于同一产区的破壁灵芝孢子粉综合品质亦存在较大的差异。该方法不仅对破壁灵芝孢子粉综合品质评价提供了依据,同时可辅助市场上破壁灵芝孢子粉的溯源鉴别,促进破壁灵芝孢子粉产业的高品质发展。     

PEF协同酶提取猪皮蛋白工艺条件的研究

研究高压脉冲电场(PEF)对枯草杆菌中性蛋白酶提取猪皮胶原蛋白的影响及提取的工艺条件。首先考查高压脉冲电场强度、脉冲数、酶用量、酶解时间等因素对生猪皮胶原蛋白提取效果的影响,然后以此为依据采用正交法优化提取条件。试验结果为,经高压脉冲电场处理的猪皮,其胶原蛋白的溶出率远高于未经高压脉冲电场处理的猪皮,而且酶解所用的时间短。在料液比1∶10(g/mL)、温度40℃、pH=6.5、酶用量10.0μkat/g、电场强度25 kV/cm、脉冲数40次、酶提时间30 min等条件下,胶原蛋白溶出率可达84.2%。     

高压脉冲电场协同酶法提取秋葵果胶的研究

运用响应面分析法对高压脉冲电场协同酶法提取秋葵果胶的工艺进行优化。基于料液比、溶液pH、酶用量、酶解时间、酶解温度、电场强度和脉冲数等单因素试验的基础上,选取料液比、酶解温度、电场强度和脉冲数四个对果胶得率有显著影响的因素为自变量,以果胶得率为响应值,运用响应面法优化并确定高压脉冲电场协同酶法提取秋葵果胶的最佳工艺为：先高压脉冲电场提取再进行酶解处理,料液比1∶28(g/mL)、酶用量600U/g、溶液pH5.5、提取温度53℃、电场强度10kV/cm、脉冲数9个、酶解时间20min,果胶得率可达17.62%。验证试验值与模型预测值拟合良好,该技术能实现秋葵中果胶成分的高效提取。     

破壁对灵芝孢子粉品质的影响

以灵芝孢子粉为原料,利用微波、超声对其进行破壁,以微波和超声的时间、功率、料液比为因素,灵芝孢子粉的多糖和三萜的含量为指标,得到最佳破壁工艺为料液比20∶1 (mL/g),微波功率280 W,微波时间90 s。以微波破壁所得到的灵芝孢子粉为原料,对比破壁前后的孢子粉粒度、松紧密度、比表面积、色度、休止角并用电镜观测形态;测定破壁前后孢子粉的总脂肪、总多糖、总三萜、灰分、蛋白质、多酚等营养成分含量,比较破壁前后孢子粉的品质。结果表明,破壁后灵芝孢子粉的感官状态与未破壁孢子粉差异明显:孢子粉的比表面积、松紧密度、色度均明显增加;粒度、流动性有所减小。经过破壁后的孢子粉中脂肪、多糖、三萜、灰分、蛋白质等营养物质的含量均不同程度地提高。实验证明,微波破壁处理有助于灵芝孢子粉中三萜、粗多糖、粗脂肪等功能性成分的溶出,大大增加了灵芝孢子粉有效成分的溶出。     

利用高压脉冲电场诱导啤酒酵母细胞释放蛋白质与核酸

研究了相对条件对高压脉冲电场(HPEF)技术破壁啤酒酵母细胞、提取酵母细胞中的蛋白质和核酸效果的影响。结果表明,啤酒酵母悬浮液经高压脉冲(频率500 ppa,场强25 kV/cm,处理时间1152μs)作用,再经搅拌(50℃下,6 h)处理后,蛋白质和核酸的提取率分别达到69.90%和82.84%。实验表明,利用高压脉冲电场破壁啤酒酵母细胞,并结合搅拌的方式提取蛋白质和核酸,蛋白质和核酸的提取率均高于单独使用高压脉冲电场或单独使用搅拌进行破壁提取的提取率。     

高压脉冲电场辅助水酶法提取杜仲叶中不可萃取多酚

为优化杜仲叶中不可萃取多酚(Non-extractable polyphenols,NEPP)提取工艺,选取酶用量、场强和脉冲数三个因素,在单因素的基础上,通过三因素三水平的响应面法对提取工艺进行优化,得出的最佳提取工艺为:酶用量18 mg,场强2.81 kV/cm,脉冲数100次,预测值为34.969 mg/g。在此条件下进行试验验证,不可萃取多酚的含量为(34.961±0.052)mg/g。     

酸浸高压法破壁对灵芝孢子中三种主要成分变化影响的研究

研究酸浸高压法对未破壁灵芝孢子中灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇含量的影响,与未经酸浸高压的未破壁及已破壁的灵芝孢子进行含量比较。以无水葡萄糖为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝多糖含量进行测定;以齐墩果酸为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝总三萜含量进行测定;以麦角固醇为对照品,用反相高效液相色谱法,对灵芝孢子的麦角固醇含量进行测定,根据结果对三种成分含量进行比较。结果表明,经酸浸高压的未破壁灵芝孢子,其灵芝多糖的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁及已破壁灵芝孢子,其灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁灵芝孢子。酸浸高压法可作为一种新的灵芝孢子破壁方法,该法获得的灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于对照组。     

蓝莓渣膳食纤维蛋糕的配方优化

以蓝莓果渣为辅助原料,通过单因素实验和正交试验采用感官评定和质构特性对蓝莓渣膳食纤维蛋糕进行配方优化。结果表明,蓝莓渣膳食纤维蛋糕的最优配方(以面粉和蓝莓果渣粉总量100 g,鸡蛋添加量200 g计)为:蓝莓果渣粉添加量1.5 g,泡打粉添加量1.0 g,大豆油添加量35 g,白砂糖的添加量35 g,在此配方下研制的蓝莓渣膳食蛋糕硬度为(448±11)g,可恢复形变为(2.32±0.19)mm,内聚性为0.46±0.01,咀嚼性为(18.2±0.4)mJ,弹性为(8.66±0.05)mm。     

速溶藏茶制备工艺优化、功能性成分及抗氧化性分析

为制备速溶藏茶,本研究以速溶藏茶得率、藏茶多糖提取量和藏茶茶多酚提取量为指标,通过单因素实验和响应面试验优化了速溶藏茶浸提工艺,并进一步研究了冷冻干燥和喷雾干燥对速溶藏茶中功能性成分和体外抗氧化活性的影响。结果表明,藏茶最佳浸提条件为料液比1:53 （g/mL）,温度98.5 ℃,浸提时间1.5 h,浸提次数3次,此时速溶藏茶得率为29.72%±0.13%,藏茶多糖提取量为6.06±0.03（g/100g）,藏茶茶多酚提取量为6.27±0.05（g/100g）利用UHPLC-QqQ-MS/MS检测出冷冻干燥和喷雾干燥的速溶藏茶中均有10种功能性成分,EGCG、GA、GCG、ECG为速溶藏茶主要功能性成分,且冷冻干燥的速溶藏茶中EGC、EGCG和槲皮素含量更高（P<0.05）。冷冻干燥速溶藏茶对DPPH自由基和ABTS自由基清除能力的IC₅₀分别为0.247、0.417 mg/mL;喷雾干燥速溶藏茶对DPPH自由基和ABTS自由基清除能力的IC₅₀分别为0.339、0.443 mg/mL,可见,速溶藏茶具有较好的抗氧化活性。     

竹叶中黄酮和茶多酚的高压脉冲电场提取

采用高压脉冲电场技术,从竹叶中同步提取黄酮和茶多酚活性成分。在单因素试验的基础上,通过正交试验确定高压脉冲电场技术提取竹叶黄酮和茶多酚的最优化工艺。结果表明,竹叶粉与60%乙醇按料液比1∶20胶磨匀质、电场强度22k V/cm、脉冲数为9的条件下进行高压脉冲电场提取,黄酮提取率达到2.49%,茶多酚提取率可达1.26%。该工艺可有效地从竹叶中联合提取黄酮和茶多酚。     

高压脉冲电场对大豆分离蛋白疏水性和巯基含量的影响

本文研究了高压脉冲电场对大豆分离蛋白疏水性和巯基含量的影响。结果表明:随着脉冲强度、脉冲宽度增大及脉冲处理时间的延长,大豆蛋白疏水性和巯基含量都增加。但当脉冲强度为40kV/cm、样品流速为40ml/min时,疏水性和巯基含量略有降低。说明高压脉冲电场对大豆分离蛋白的空间结构有一定的影响,脉冲强度、脉冲宽度愈大及脉冲处理的时间愈长,对蛋白的变性程度愈强。     

Inactivation of Saccharomyces cerevisiae and Bacillus cereus by pulsed electric fields technology

The effect of pulsed electric field (PEF) treatment, applied in a continuous system, on Saccharomyces cerevisiae and Bacillus cereus cells and spores was investigated. S. cerevisiae inoculated into sterilised apple juice and B. cereus cells and spores inoculated into sterilised 0.15% NaCl were treated with electric field strengths of 10–28 kV/cm using an 8.3 pulse number and with pulse numbers of 4.2–10.4 at 20 kV/cm, respectively. The inactivation of S. cerevisiae depended on the electric field intensity and number of pulses. The yeast inactivation increased when the applied electric field intensity and pulse number were increased. Approximately four log cycles reduction was achieved in apple juice using 10.4 pulses at 20 kV/cm. B. cereus cells were less sensitive to PEF treatment. The reduction in microbial count of B. cereus cells was hardly more than one log cycle using 10.4 pulses at 20 kV/cm. The applied PEF treatment was ineffective on Bacillus cereus spores.     

高压脉冲电场辅助提取蓝靛果花青素工艺优化

目的 通过响应面法优化高压脉冲电场辅助提取蓝靛果花青素的工艺参数。方法 以长白山野生蓝靛果为原料, 乙醇作为溶剂, 使用紫外分光光度计全波长扫描获取花青素最大吸收波长, 以此为依据测定花青素含量, 探究高压脉冲电场辅助提取法提取花青素时电场强度、脉冲数、乙醇体积、料液比4个因素对花青素提取量的影响, 采用响应面法优化其提取工艺, 并与传统试剂浸提法最优参数、提取量进行对比。结果 高压脉冲电场辅助提取花青素的最佳工艺参数为: 乙醇体积分数67%, 电场强度20 kV/cm, 脉冲数10个, 液料比1:78, 此时蓝靛果花青素提取量为34.20 mg/g。结论 高压脉冲电场辅助提取花青素经优化后具有溶剂消耗少、提取时间短、花青素提取量多的优势, 有良好的发展前景。     

超声波复合酶法提取双孢菇多糖的研究

采用超声波辅助复合酶提法提取双孢菇粗多糖。实验中利用单因素实验探索并确定了超声波的最佳提取时间和料液比分别为30min,1:20。对于复合酶的反应条件,采取L9(34)正交试验确定纤维素酶和中性蛋白酶的最佳工艺条件分别为:纤维素酶加酶量480u/g,pH4.0,酶解温度50℃,酶解时间100min;中性蛋白酶的加酶量100u/g,pH7.5,酶解温度45℃,酶解时间100min。实验中采用超声波辅助破壁方法,提高了纤维素酶的破壁效率,提高了双孢菇多糖的提取率。     

体外消化和贮藏条件对粗壮脉纹孢菌孢子中类胡萝卜素稳定性的影响

采用国标测定粗壮脉纹孢菌（Neurospora crassa）孢子壁的基本组成成分,扫描电子显微镜观察孢子形态 及颗粒大小,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼和螯合金属离子法测定孢子中类胡萝卜素的抗氧化能力,分光光度法测定总 类胡萝卜素的含量,分别研究不同体外消化体系和贮藏条件对孢子中类胡萝卜素稳定性的影响。结果发现,粗壮脉 纹孢菌孢子壁中水分、粗纤维、粗脂肪、蛋白质、几丁质质量分数分别为（17.70±0.63）%、（29.90±0.03）%、 （0.32±0.11）%、（28.32±0.89）%、（0.66±0.13）%,孢子中总类胡萝卜素含量为（776.42±2.05）μg/g孢子。经 过口腔、胃和小肠消化后粗壮脉纹孢菌孢子壁局部均出现密集的小孔,孢子较未处理相比有一定程度的皱缩。消化过 程中孢子中类胡萝卜素的释放率显著提高,口腔（9.35%）＜胃（18.78%）＜小肠（32.58%）,消化液中抗氧化活性 显著升高,口腔＜胃＜小肠;贮藏9 d后类胡萝卜素的减少率分别为：4 ℃避光组2.24%,25 ℃避光组3.19%,25 ℃ 光照组5.79%。研究表明粗壮脉纹孢菌孢子壁是一种适合包埋不稳定物质的壁材,且利于消化吸收。