桑黄菌丝体多糖的分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性分析

采用水提醇沉法制备桑黄菌丝体粗多糖,分别用终浓度为30%、45%和60%的硫酸铵溶液对桑黄菌丝体中粗多糖进行粗分离,并比较所得各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。对其中活性强的组分采用离子交换树脂柱色谱纯化,采用高效排阻色谱-折光示差检测器-多角度光散射仪对纯化多糖进行均一性分析和分子量测定。结果显示,45%硫酸铵分离多糖IPS45显示最强的抗肿瘤活性及较好的清除超氧阴离子活性,IPS45经DEAE-52纤维素离子交换柱纯化得到四个级分,经高效排阻色谱分析,其中蒸馏水洗脱级分（IPS45-W）为均一多糖,重均分子量为79.1 kDa;气相色谱分析其单糖组成为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:未知单糖,摩尔比为1.57:8.38:1.09:1.00。IPS45-W可抑制HepG2细胞生长,当浓度为50μg/mL时,对HepG2细胞的抑制率为56.74%,高于前期研究的乙醇沉淀分离所得桑黄菌丝体均一多糖同浓度下11%～35%的抑制率。该结果为不同组成的桑黄多糖的分离和应用提供依据。     

响应面优化金丝小枣碱提多糖工艺及其抗氧化活性研究

以金丝小枣为原料,通过单因素考察提取温度、时间、料液比和NaOH浓度对多糖得率的影响,在此基础上进行Box-Behnken试验来优化碱提多糖的提取工艺,并对其进行总糖含量、扫描电镜、红外光谱及抗氧化活性测定。结果表明,碱提多糖最佳工艺为:料液比1:35(g/mL),提取温度80℃,提取时间120 min,NaOH浓度为0.2 mol/L,在此条件下多糖的得率为11.44%,总糖含量为69.39%。扫描电镜表明其具有不规则块状结构,内部紧实;红外光谱表明枣碱提多糖具有C=O和C-H等酸性多糖的特征吸收峰。抗氧化活性实验表明,碱提多糖具有一定清除自由基的能力,对DPPH和超氧阴离子自由基的IC₅₀分别为1.201 mg/mL和1.176 mg/mL。此研究为进一步开发枣多糖功能性食品及研究碱提多糖的构效关系提供参考。     

桑黄胞内多糖免疫及抗氧化活性研究

通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠动物模型,考察桑黄粗多糖(SH)、纯化多糖组分(P-47000、P-8700)对增强免疫及抗氧化水平的变化情况,明确不同纯度多糖组分生物活性间的差异。结果表明：SH、P-47000、P-8700对环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠具有不同程度的免疫促进作用,其顺序为：P-8700＞SH＞P-47000;P-47000的还原能力低于SH和P-8700,SH和P-8700还原能力相差不大;P-47000几乎对超氧阴离子自由基(O2－ ·)没有清除效果,P-8700和SH的清除率比较低,且P-8700略大于SH;P-8700对羟自由基( ·OH)具有较好的清除效果,清除率达到53.421%,且P-8700的清除率高于SH和P-47000,P-47000清除率最低;不同纯度多糖对DPPH自由基的清除效果均较高,SH达到93.221%;P-8700清除效果最低,为66.435%。     

灵芝菌丝体碱提水溶性多糖工艺条件及对羟自由基的清除作用

通过单因素实验对影响碱提灵芝茵丝体多糖的各种因素进行了研究，确定提取条件为：提取温度65℃，提取时间4h，碱料(体积：质量)比4：1，碱液浓度0．5mol／L．在此条件下提取并对所得水溶性多糖的抗氧化作用进行了初步研究，表明其对羟自由基有较好的清除能力，在一定范围内清除率与糖的质量浓度呈正相关．     

桑黄子实体与桑黄菌丝多糖抗氧化活性研究

桑黄是我国一种非常珍贵的功能性真菌,多糖是其的主要生物活性成分,试验提取桑黄子实体多糖和二种不同生长期的菌丝多糖,对其进行抗氧化试验,以总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、对Fe~(2+)螯合能力、超氧阴离子自由基清除能力测定5种方法评价其抗氧化活性,试验结果表明桑黄子实体多糖表现出较强的抗氧化活性,对比桑黄子实体多糖与桑黄菌丝多糖,子实体多糖抗氧化效果显著高于菌丝体多糖,不同生长期的菌丝多糖也呈现出不同的抗氧化性,生长期短的菌丝多糖表现出更强的抗氧化性。试验结果为今后桑黄产业提供重要的理论基础。     

桑黄多糖提取工艺优化、结构表征及抗氧化活性研究

目的 以临清桑黄为研究材料,采用热水浸提法制备桑黄多糖（Sanghuangporus sanghuang polysaccharide-hot water extraction, SSP-W）并研究其结构特征和抗氧化活性。方法 以SSP-W提取得率为指标,采用单因素和响应面试验对制备工艺进行优化,采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（high performance anion exchange chromatography-pulsed amperometric detection,HPAEC-PAD）、傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR）、扫描电镜和X-衍射对其结构进行初步表征。结果 最佳制备工艺为：提取时间2.4 h、提取温度95℃、液料比27:1（mL/g）,在此条件下,SSP-W提取得率为2.34%。其结构特征为：SSP-W以吡喃环为基本骨架,由Fuc、GlcN、Glc、Man 4种单糖组成。扫描电镜结果表明,SSP-W形状不规则,有明显的孔洞。X-衍射结果表明,SSP-W以结晶态聚合物和非结晶态聚合物的形式共存。抗氧化试验表明,SSP-W具有较强的抗氧化活性,其羟自由基和ABTS+自由基的EC50值（concentration for 50% of maximal effect,EC50）分别为492 μg/mL和75 μg/mL,当浓度为250 μg/mL时,ABTS+自由基清除率达到96.27%。结论 SSP-W是一种具有抗氧化潜力的活性物质。本研究结果将为临清桑黄多糖的精深加工和高值化利用提供科学依据。     

苦丁茶多糖抗氧化活性研究

采用清除超氧阴离子自由基、清除羟自由基、清除DPPH自由基、双氧水诱导红细胞氧化溶血、红细胞自氧化溶血实验,对A、K_1、K_3三个苦丁茶多糖组分的抗氧化活性进行了研究,并与Vc进行了比较,结果表明:苦丁茶多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除作用;对H_2O_2诱导红细胞氧化溶血反应、对红细胞自氧化溶血反应都有显著的抑制作用。     

毛霉菌菌丝体多糖的提取工艺优化和抗氧化活性

优化毛霉菌菌丝体多糖(MPS)的提取条件,研究其抗氧化活性。利用单因素试验和正交试验考察料液比、提取时间、提取温度和提取次数对菌丝体多糖提取率的影响,检测MPS对DPPH、ABTS和羟自由基的清除活性评价其抗氧化活性,研究MPS对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。毛霉菌菌丝体多糖的最佳提取条件为料液比1∶50 (g/mL),提取时间2 h,提取温度为80℃,重复提取2次;在此条件下, MPS的提取率为18.24%, MPS能够清除DPPH、ABTS和羟自由基,在5 mg/mL时对三种自由基的清除率分别是42.76%, 40.59%和42.76%。同时, MPS对人肝癌Hep G2细胞的增殖无显著影响。文章确定了毛霉菌菌丝体多糖的最佳提取工艺,并发现该多糖具有一定的抗氧化活性。     

响应面法优化桑黄菌丝体多糖的热水提取工艺

目的:采用超声波辅助热水浸提法提取桑黄菌丝体多糖,考察超声时间、超声功率及液固比对多糖提取量的影响。方法:在单因素试验的基础上,利用响应曲面(RSM)分析法对工艺参数进行优化研究。结果:超声时间46 min、超声功率492.4 W及液固比20.8 mL/g是较适宜工艺条件,多糖提取量为0.71 g/100 g。结论:响应面分析方法优化桑黄菌丝体多糖提取工艺是可行的。     

平菇菌丝体多糖的分离纯化和体外抗氧化活性

采用酶法提取平菇菌丝体多糖,通过L9(34)正交试验考察加酶量、温度、时间、pH 值对平菇菌丝体多糖提取率的影响,确定其最佳提取条件;通过DEAE-32 离子交换层析和Sephadex G100 凝胶过滤纯化平菇菌丝体多糖,DPPH 自由基清除作用测定抗氧化活性,紫外光谱扫描和薄膜电泳方法鉴定多糖的纯度;利用化学比色法检测其对O2－·和·OH 的清除能力和对小鼠红细胞溶血抑制程度。结果表明：平菇菌丝体多糖最佳提取条件为加酶量1.0%、温度55℃、时间2h、pH5.3,最佳条件下多糖提取率为(4.91 ± 0.15)%;纯化后的多糖能清除O2－·和·OH 及抑制红细胞溶血的生成,且呈现一定剂量关系。表明平菇菌丝体多糖在一定浓度范围内具有体外抗氧化作用。     

超声波复合酶法提取桑黄多糖研究

采用单因子分析和正交试验,以桑黄菌丝体提取物中多糖得率为指标,对超声波复合酶法中影响多糖提取效果的主要因素进行研究。结果表明：超声波提取优化工艺条件为超声处理时间20min、料液比1:25(g/mL)、功率500W,在此基础上提取多糖得率为3.356%,在超声波优化结果基础上,进一步进行复合酶法处理,酶解最佳提取条件是pH6.5,酶解温度50℃,纤维素酶添加量2.5%、果胶酶添加量2.5%、蛋白酶添加量1%,酶解时间120min,多糖得率为6.619%,由此可见,超声波和复合酶法双重处理提取桑黄多糖是一种有效的提取方法,适合大规模生产运用。     

采用正交设计法对桑黄菌丝体液体培养基的优化

以玉米渣和葡萄糖为复合碳源,以麸皮和蛋白胨及酵母粉为复合氮源,采用L 9(34)正交设计法优化桑黄菌丝体液体培养基,并为此初步确定了液体培养条件.实验结果表明:最佳培养基为玉米渣3%、麸皮3%、葡萄糖3%,KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、VB1 20μg/100ml、VB2 30μg/100ml.在32.5℃、pH自然、摇床转速130r/min、摇床培养192h的条件下,其菌丝体生物量平均得率为4.4g/100ml.     

桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性

研究液体发酵桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换柱层析分离分级得到多个级分,以较大分子质量的中性多糖为主。凝胶渗透色谱分析表明桑黄菌胞内多糖的重均分子质量范围为5.7×103～6.1×106D,由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,其分子物质的量比为15:4:1,多糖含量为41%,特性黏度为12mL/g。通过体外抗氧化模型,发现桑黄菌胞内多糖均能较好的清除 ·OH、O2－ ·和螯合Fe2+,且对O2－ ·具有明显的清除作用。     

不同体积分数乙醇沉淀桑黄胞内多糖的理化性质及抗氧化活性

研究桑黄胞内多糖醇沉过程中乙醇体积分数对多糖得率、纯度、理化性质和抗氧化活性等的影响。结果表明：随着乙醇体积分数的增加,沉淀粗多糖的得率增加,而粗多糖中多糖含量呈现不规则的变化;不同体积分数乙醇沉淀获得的桑黄多糖中均含有木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。扫描电镜图像显示,低体积分数（65%、75%、85%）乙醇沉淀的多糖呈现均匀球状,高体积分数（95%)乙醇沉淀的多糖连成大块片状。桑黄胞内多糖体外抗氧化能力存在明显的量-效关系,95%乙醇沉淀的多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基、2,2’-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）自由基的清除效果最好,对Fe3＋的还原能力最强,抗氧化活性最高。     

超声-微波协同提取鸡枞菌多糖的工艺优化及抗氧化性

以鸡枞菌为试材,利用超声波与微波协同提取鸡枞菌多糖,以多糖提取率为指标,研究料液比、微波功率、超声功率、提取温度、提取时间对鸡枞菌多糖提取率的影响,采用正交试验设计对提取条件进行优化,并测定鸡枞菌多糖对·OH、DPPH·、O2·和ABTS+·的清除能力.结果 表明:超声-微波协同提取鸡枞菌多糖的最佳工艺条件为料液比l∶...     

瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺的研究

为优化瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺,在单因素试验的基础上,以提取温度、提取时间、水料比3个因素为自变量,以瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取率为响应值,使用BOX-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,优化瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺,并确定瓦尼木层孔菌菌丝体多糖的最佳工艺条件为:提取温度80.99℃、提取时间2.13 h、水料比32.06∶1(mL/g)。在此条件下,实际提取率为10.49%,与预测值基本吻合。     

六种不同树种桑黄有效成分的比较

比较6 种生长在不同树种上的桑黄子实体多糖、黄酮及总三萜含量。结果表明,不同树种桑黄子实体有效成分含量差异较大,桑树桑黄子实体多糖、黄酮及三萜含量均高于其他树种,分别为3.84%、5.12% 和2.2%;暴马丁香树桑黄子实体多糖含量最低为1.35%,白桦树桑黄子实体黄酮、总三萜含量均最低,分别为0.68%、0.32%。